血清Klotho 蛋白、AngⅡ與2 型糖尿病腎病病情進展的相關性

唐春霞，王維

無錫人民醫院特需科，江蘇無錫 214023

糖尿病腎病經過不同途徑、機制對腎臟造成損害，導致腎臟發生不同的病理改變，是造成糖尿病患者死亡的主要原因[1-2]。研究顯示，血管緊張素Ⅱ（AngiotensinⅡ, AngⅡ）在糖尿病腎病的發病過程中具有關鍵意義[3]。血清Klotho 蛋白主要在腎小管上皮細胞中表達，腎臟損傷早期，血清Klotho 蛋白水平較低，可作為早期腎損傷的標志物[4]。目前關于糖尿病腎病病情進展程度與血清Klotho 蛋白及AngⅡ的相關性研究較少。鑒于此，本研究選取2018 年5 月—2019 年10 月無錫人民醫院確診為糖尿病腎病的104 例患者和同期56 名健康志愿者為研究對象，分析血清Klotho 蛋白及AngⅡ表達情況，以及上述指標與糖尿病腎病病情進展之間的關系，旨在為糖尿病腎病的治療及預防提供新的靶點，控制疾病進展?，F報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取本院收治的104 例2 型糖尿病腎病患者和56 例健康志愿者為研究對象。糖尿病腎病患者（Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組）中男73 例，女31 例；年齡43～79 歲，平均（55.02±6.85）歲。健康志愿者（對照組）中女21例，男35 例；年齡25～80 歲，平均（45.113±7.95）歲。糖尿病腎病組與對照組一般資料比較，差異無統計學意義（P均＞0.05），具有可比性。且研究通過本院醫學倫理委員會審核。

1.2 納入與排除標準

納入標準：①符合2 型糖尿病腎病的診斷標準[5]；②病歷資料齊全；③患者、家屬均知情同意，并簽署知情同意書。

排除標準：①非糖尿病所致腎臟損害者；②伴隨其他內分泌疾病者，如腎上腺、甲狀腺、腦垂體等；③處于哺乳期或妊娠期的女性；④伴結核、腫瘤等患者；⑤處于應激狀態者，如低血糖或高滲昏迷、創傷、手術等。

1.3 方法

根據HE 染色、PAS 染色、銀染及Masson 等光學顯微鏡下的染色，再結合電鏡結果進行糖尿病腎病病理分期，并按病理分期分為Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組，其中Ⅱ期（Ⅱ組，出現系膜擴張，＞25%所見系膜區）36 例，Ⅲ期（Ⅲ組，出現Kimmelstiel-Wilson 結節）38 例，Ⅳ期（Ⅳ組，嚴重腎小球硬化，即＞50%腎小球硬化）30例。采用酶聯免疫吸附法（Enzyme-Linked Immunosorbent Assay, ELISA）檢測血清Klotho 蛋白水平，放射免疫法檢測AngⅡ水平，所有試劑盒均購自北京北方生物技術研究所，操作按照試劑盒使用說明書進行。

1.4 觀察指標

對比不同受試者血清Klotho 蛋白、AngⅡ表達情況，采用Pearson 相關性檢驗分析糖尿病腎病病情進程與血清Klotho 蛋白、AngⅡ之間的相關性。

1.5 統計方法

應用SPSS 20.0 統計學軟件處理數據，血清Klotho 蛋白、AngⅡ表達水平為計量資料，符合正態分布，以(±s)表示，多組間比較采用單因素方差分析檢驗，P＜0.05 為差異有統計學意義；采用Pearson分析法進行相關性分析。

2 結果

2.1 各組血清Klotho 蛋白、AngⅡ表達水平比較

糖尿病腎病各組血清Klotho 蛋白水平較對照組明顯下降，糖尿病腎?、艚M低于糖尿病腎病Ⅲ期組和糖尿病腎?、蚪M，糖尿病腎?、笃诮M低于糖尿病腎?、蚪M，差異有統計學意義（P均＜0.05）。糖尿病腎病各組AngⅡ表達水平較健康對照組升高，糖尿病腎?、羝诮M高于糖尿病腎?、笃诮M和糖尿病腎病Ⅱ組，糖尿病腎?、蠼M高于糖尿病腎病Ⅱ組，差異有統計學意義（P均＜0.05）。見表1。

表1 各組血清Klotho 蛋白、AngⅡ表達水平比較[（±s），pg/mL]

表1 各組血清Klotho 蛋白、AngⅡ表達水平比較[（±s），pg/mL]

注：AngⅡ：血管緊張素Ⅱ；與對照組比較，aP＜0.05；與糖尿病腎?、蚪M比較，bP＜0.05；與糖尿病腎?、蠼M比較，cP＜0.05。

AngⅡ組別血清Klotho 蛋白41.56±10.32（46.52±11.85）a（51.23±12.94）ab（56.45±13.75）abc 8.906＜0.001對照組（n=56）糖尿病腎?、蚪M（n=36）糖尿病腎?、蠼M（n=38）糖尿病腎病Ⅳ組（n=30）F 值P 值758.23±220.12（730.12±200.45）a（505.45±185.23）ab（400.12±150.12）abc 27.318＜0.001

2.2 血清Klotho 蛋白、AngⅡ表達與糖尿病腎病病情進展的相關性分析

結果顯示，血清Klotho 蛋白水平與糖尿病腎病病情進展呈負相關，血清AngⅡ表達與糖尿病腎病病情進展呈正相關（P均＜0.05）。見表2。

表2 糖尿病腎病損害情況與血清Klotho 蛋白、AngⅡ表達相關性

3 討論

糖尿病腎病是糖尿病的嚴重并發癥之一，目前對于其發病機制尚不完全清楚，治療上只能減慢其進展，不能阻止或逆轉病情發生[6]。臨床上如能尋找到新的診療靶點，及時診斷并治療，可為控制病情進展以及臨床治療爭取更多時間。糖尿病腎病的發病機制較為復雜，但已有研究表明被激活的炎癥因子及氧化應激介質引發的腎臟炎癥反應可導致腎小球硬化、腎小管萎縮及腎間質持續進展性纖維化，上述過程與糖尿病腎病的發展有緊密相關性。

本研究結果顯示，與對照組相比，糖尿病腎病各組血清Klotho 蛋白下降（P＜0.05），隨著糖尿病腎病病情進展，血清Klotho 蛋白水平呈下降趨勢，Pearson 分析顯示Klotho 蛋白水平與病情進展呈負相關。表明血清Klotho 蛋白與糖尿病腎病患者病情進展密切相關。在田浩等[7]研究中，慢性腎臟病患者中血清Klotho 蛋白水平明顯降低，Ⅰ～Ⅱ期患者血清Klotho 蛋白水平為（4.51±0.57）ng/mL，Ⅲ～Ⅳ期為（3.43±0.64）ng/mL，Ⅴ期為（2.95±0.47）ng/mL，且血清Klotho 蛋白水平與患者分期相關（P＜0.05）。Guo J等[8]通過體外實驗觀察到晚期糖基化終末產物可增強氧化應激，從而降低小管上皮細胞Klotho 的表達；隨著病情進展，導致分解血清Klotho 蛋白的腫瘤壞死因子Q 轉換酶表達增加，血清Klotho 蛋白水平下降。分析原因，血清Klotho 蛋白對腎臟具有保護作用，機制為：①增強抗凋亡蛋白的穩定性，間接抑制氧化應激反應；②抑制細胞內相關傳導信號，增高抗氧化酶水平；③拮抗腎素-血管緊張素系統作用等[9-10]。在糖尿病腎病進展過程中，血清Klotho 蛋白水平不斷下降。本研究結果顯示，對比對照組，糖尿病腎病各組AngⅡ表達水平較明顯升高，隨著病情進展，AngⅡ呈上升趨勢，血清AngⅡ與病情進展呈正相關（r=0.529，P＜0.05），這與Huimin S 等[11]研究結果一致。分析原因為，糖尿病患者長時間處于高血糖狀態，AngⅡ高代謝使得細胞因子系統激活，糖尿病腎病進展，機制可能為：①AngⅡ激活腎小管、腎小球中的AT1受體，血管阻力增加，腎血流量減少，刺激系膜、促進細胞外基質產生，促進疾病進展[12-14]；②AngⅡ導致內皮功能受損，促進產生活性氧，活化NF-κB，腎小球濾過屏障受損[15]。本研究結果表明，血清Klotho 蛋白、AngⅡ與糖尿病腎病患者病情進展密不可分。但本研究并未分析各指標水平與糖尿病腎病預后之間的關系，且納入的研究樣本較少。鑒于此，研究結果的可信度還需在未來開展更多的相關性研究加以佐證，旨在為臨床治療爭取更多時間提供新的靶點依據。

綜上所述，血清Klotho 蛋白、AngⅡ與糖尿病腎病患者病情進展密切相關，臨床糖尿病患者可定期檢測血清Klotho 蛋白、AngⅡ水平，及時預防并治療，旨在控制病情進展，為臨床治療爭取更多時間，促進患者良性預后。