洛索洛芬鈉膠囊溶出曲線研究方法的建立及實(shí)踐

陳雨蕉 付金鳳 許 直 劉曉強(qiáng)

洛索洛芬鈉為苯丙酸類非甾體消炎藥，具有較好的鎮(zhèn)痛消炎作用，臨床多用于腰痛癥、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、肩關(guān)節(jié)周圍炎、骨性關(guān)節(jié)炎、頸肩腕綜合征和手術(shù)后、外傷后、拔牙后的鎮(zhèn)痛消炎，以及急性上呼吸道炎的解熱鎮(zhèn)痛[1-3]。其具有起效快（口服30 min內(nèi)血藥濃度即達(dá)峰值）、安全有效（臨床鎮(zhèn)痛效果明顯，不良反應(yīng)小且少）等特點(diǎn)，臨床應(yīng)用廣泛[4-5]。膠囊劑較片劑溶出時(shí)間更短，對胃腸道刺激小，且服用時(shí)可以避免藥物的特殊氣味對患者造成的影響，因此膠囊劑臨床應(yīng)用廣泛。體外溶出曲線常用來預(yù)測體內(nèi)的崩解、溶出和吸收情況，同時(shí)藥物體外溶出行為能夠在一定程度上反映制劑的質(zhì)量[6-7]。同時(shí)采用合理的體外溶出曲線方法可以分析不同生產(chǎn)企業(yè)間制劑處方、工藝以及原輔料質(zhì)量差異，有助于更全面剖析市售藥品質(zhì)量[8-9]。

1 儀器、試劑與方法

1.1 儀器

美國 LOGAN 860DLA型自動(dòng)溶出儀（12杯位），METTLER TOLEDO XP205 型電子分析天平，島津LC-20AD型高效液相色譜儀。

1.2 試劑與藥品

冰醋酸、鹽酸、醋酸鈉、磷酸二氫鉀、氫氧化鈉和三乙胺均為分析純；甲醇為色譜純；溶出介質(zhì)均采用經(jīng)脫氣裝置41 ℃真空脫氣30 min的純化水。針頭過濾器（水系）：材質(zhì)：PES；規(guī)格：0.45 μm×25 mm；來源：Agilent Technologies。洛索洛芬鈉，中國食品藥品檢定研究院，批號(hào)：100638-202104，含量：87.5%。

洛索洛芬鈉膠囊，生產(chǎn)企業(yè)A，批號(hào)：221211、220813；生產(chǎn)企業(yè)B，批號(hào)：221104；生產(chǎn)企業(yè)C，批號(hào)：2212022。

1.3 方法

1.3.1溶出方法方法a：照溶出度與釋放度測定法（中華人民共和國藥典2020年版四部通則0931第一法）測定，以水900 ml為溶出介質(zhì)，轉(zhuǎn)速為100轉(zhuǎn)/min，依法操作，經(jīng)5、10、15、20、30、45、60 min時(shí)，取溶出液濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液；方法b：照溶出度與釋放度測定法（中國藥典2020年版四部通則0931第一法）測定，以水900 ml為溶出介質(zhì)，轉(zhuǎn)速為50轉(zhuǎn)/min，依法操作，經(jīng)5、10、15、20、30、45、60 min時(shí)，取溶出液濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液；方法c：照溶出度與釋放度測定法（中華人民共和國藥典2020年版四部通則0931第二法）測定，以水900 ml為溶出介質(zhì)，轉(zhuǎn)速為50轉(zhuǎn)/min，依法操作，經(jīng)5、10、15、20、30、45、60 min時(shí)，取溶出液濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液。

取生產(chǎn)企業(yè)A所生產(chǎn)的洛索洛芬鈉膠囊（批號(hào)：221211）進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)（取12粒平行進(jìn)行實(shí)驗(yàn)），依據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果選擇合適的溶出條件依次取生產(chǎn)企業(yè)A、B、C所生產(chǎn)的洛索洛芬鈉膠囊（生產(chǎn)企業(yè)A，批號(hào)：220813；生產(chǎn)企業(yè)B，批號(hào)：221104；生產(chǎn)企業(yè)C，批號(hào)：2212022）依次在介質(zhì)pH1.0鹽酸溶液、pH4.0醋酸鹽緩沖液、pH6.8磷酸鹽緩沖液、水中分別進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

1.3.2液相方法以Shim-Nex CS C18（4.6×150 mm，5 μm）為色譜柱，流動(dòng)相為甲醇-水-冰醋酸-三乙胺（600∶400∶1∶1），檢測波長為222 nm，柱溫為35 ℃，流速為1.0 ml/min，進(jìn)樣量為20 μl。

1.3.3 對照品溶液的制備取洛索洛芬鈉對照品約17 mg，精密稱定，置100 ml量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，精密量取5 ml置50 ml量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻。

1.3.4溶出介質(zhì)的配制方法1）pH1.0鹽酸溶液：量取鹽酸9 ml溶解于1 000 ml脫氣純化水中，攪勻，即得。2）pH4.0醋酸鹽緩沖液：精密稱取乙酸鈉1.22 g，加水溶解，加入2 mol/L醋酸溶液20.5 ml，加水稀釋至1 000 ml，攪拌溶解，搖勻，即得。3）pH6.8磷酸鹽緩沖液：取0.2 mol/L磷酸二氫鉀溶液250 ml，加0.2 mol/L氫氧化鈉溶液118 ml，用水稀釋至1 000 ml，搖勻，即得。4）水：取純化水，脫氣，即得。

2 結(jié)果

2.1 預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果

生產(chǎn)企業(yè)A所生產(chǎn)的洛索洛芬鈉膠囊在方法a、方法b、方法c中均在15 min時(shí)溶出度達(dá)平臺(tái)期，且方法a、方法b、方法c在5 min時(shí)溶出度的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）值均較大，其中方法b在5 min、10 min及15 min時(shí)溶出度的RSD值均較大。見圖1。

圖1 預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.2 各廠家溶出曲線

生產(chǎn)企業(yè)A所生產(chǎn)的洛索洛芬鈉膠囊在介質(zhì)pH1.0鹽酸溶液、pH4.0醋酸鹽緩沖液、pH6.8磷酸鹽緩沖液、水中溶出量均在15 min時(shí)達(dá)平臺(tái)期，其中在介質(zhì)pH4.0 醋酸鹽緩沖液、pH6.8磷酸鹽緩沖液、水中溶出曲線基本一致，在介質(zhì)pH1.0鹽酸溶液中溶出量受限。見圖2。

圖2 洛索洛芬鈉膠囊溶出曲線（生產(chǎn)企業(yè)A）

生產(chǎn)企業(yè)B所生產(chǎn)的洛索洛芬鈉膠囊在介質(zhì)pH1.0鹽酸溶液、pH4.0醋酸鹽緩沖液、pH6.8磷酸鹽緩沖液、水中累計(jì)溶出量依次上升，在介質(zhì)pH6.8磷酸鹽緩沖液、水中15 min時(shí)達(dá)平臺(tái)期，在介質(zhì)pH4.0醋酸鹽緩沖液20 min時(shí)達(dá)平臺(tái)期，在介質(zhì)pH1.0鹽酸溶液中溶出量明顯受限。見圖3。

圖3 洛索洛芬鈉膠囊溶出曲線（生產(chǎn)企業(yè)B）

生產(chǎn)企業(yè)C所生產(chǎn)的洛索洛芬鈉膠囊在介質(zhì)pH1.0鹽酸溶液、pH4.0醋酸鹽緩沖液、pH6.8磷酸鹽緩沖液、水中溶出量均在15 min時(shí)達(dá)平臺(tái)期，其中在介質(zhì)pH4.0醋酸鹽緩沖液、pH6.8磷酸鹽緩沖液、水中溶出曲線基本一致，在介質(zhì)pH1.0鹽酸溶液中溶出量輕微受限。見圖4。

圖4 洛索洛芬鈉膠囊溶出曲線（生產(chǎn)企業(yè)C）

3 討論

本溶出曲線方法的確定基于多個(gè)因素的考慮，具體如下。1）基于化合物本身特性：洛索洛芬屬生物藥劑學(xué)分類系統(tǒng)（BCS）Ⅰ類藥物，即高溶解性-高滲透性藥物，因此，選擇取樣時(shí)間點(diǎn)依次為5、10、15、20、30、45、60 min。2）基于各制劑自擬標(biāo)準(zhǔn)及其實(shí)驗(yàn)結(jié)果：所涉及的3家生產(chǎn)企業(yè)生產(chǎn)的洛索洛芬鈉膠囊的溶出度檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)分別為1.漿法，以水900 ml為溶出介質(zhì)，轉(zhuǎn)速為50轉(zhuǎn)/mim，依法操作，經(jīng)30 mim時(shí)，取續(xù)濾液；2.漿法，以水1 000 ml為溶出介質(zhì)，轉(zhuǎn)速為100轉(zhuǎn)/mim，依法操作，經(jīng)45 mim時(shí)，取續(xù)濾液；3.籃法，以水600 ml為溶出介質(zhì)，轉(zhuǎn)速為75轉(zhuǎn)/mim，依法操作，經(jīng)30 mim時(shí)，取續(xù)濾液。同時(shí)參考國家藥品監(jiān)督管理部門發(fā)布的普通口服固體制劑溶出度試驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)原則等確定了洛索洛芬鈉膠囊溶出曲線研究的3種方法。洛芬鈉膠囊在筆者所采用的3種溶出條件下均能迅速釋放，到達(dá)平臺(tái)期的時(shí)間均約為15 min，無明顯差異，基于上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果，上述3種溶出條件均可以選擇。3）基于該藥物的適應(yīng)證；該藥物的適應(yīng)證為類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、骨性關(guān)節(jié)炎、腰痛癥、肩周炎、頸肩臂綜合征的消炎和鎮(zhèn)痛；手術(shù)后、外傷后及拔牙后的鎮(zhèn)痛和消炎；急性上呼吸道炎的解熱和鎮(zhèn)痛[10-11]。合并有上述癥狀的患者其生理功能一定程度受影響，100轉(zhuǎn)/min的轉(zhuǎn)速不符合臨床實(shí)際，故考慮舍去條件a。4）基于洛索洛芬鈉片參比制劑的檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)：溶出條件為照溶出度測定法（中華人民共和國藥典2010年版二部附錄XC第二法），以水900 ml為溶出介質(zhì)，轉(zhuǎn)速為50轉(zhuǎn)/min，依法操作。目前洛索洛芬鈉膠囊尚未公布其參比制劑，片劑和膠囊均屬于口服固體制劑，體內(nèi)藥物代謝動(dòng)力學(xué)過程具有一定的相似性，采用與洛索洛芬鈉片參比制劑相同的溶出條件可以比較市售洛索洛芬鈉膠囊之間的質(zhì)量差異，也可以分析其與原研制劑之間的質(zhì)量差異。基于上述多種因素，最終確定的溶出曲線條件為方法c。

上述3家生產(chǎn)企業(yè)生產(chǎn)的洛索洛芬鈉膠囊在介質(zhì)水及pH6.8磷酸鹽緩沖液中均溶出迅速，在15 min時(shí)均迅速達(dá)到平臺(tái)期。生產(chǎn)企業(yè)A及生產(chǎn)企業(yè)C生產(chǎn)的洛索洛芬鈉膠囊在介質(zhì)pH4.0醋酸鹽緩沖液中溶出情況與介質(zhì)水及pH6.8磷酸鹽緩沖液一致，但生產(chǎn)企業(yè)B生產(chǎn)的洛索洛芬鈉膠囊在介質(zhì)pH4.0醋酸鹽緩沖液中溶出速率低于介質(zhì)水及pH6.8磷酸鹽緩沖液，同時(shí)上述3家生產(chǎn)企業(yè)生產(chǎn)的洛索洛芬鈉膠囊在介質(zhì)pH1.0鹽酸溶液中溶出量均受限，其中生產(chǎn)企業(yè)B生產(chǎn)的洛索洛芬鈉膠囊累計(jì)溶出量受限最嚴(yán)重，這與洛索洛芬鈉片參比制劑在4種溶出介質(zhì)中的溶出行為基本一致相差較遠(yuǎn)。基于上述實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)并結(jié)合該制劑的服用方式“飯后服用”，生產(chǎn)企業(yè)A及生產(chǎn)企業(yè)C生產(chǎn)的洛索洛芬鈉膠囊可能質(zhì)量更優(yōu)。

但須指出，上述3家企業(yè)所生產(chǎn)的洛索洛芬鈉膠囊在介質(zhì)pH1.0鹽酸溶液、pH4.0 醋酸鹽緩沖液、pH6.8磷酸鹽緩沖液、水中達(dá)到平臺(tái)期前各取樣時(shí)間點(diǎn)溶出量RSD值均較大，提示上述3家企業(yè)樣品在達(dá)到平臺(tái)期前各取樣時(shí)間點(diǎn)溶出量批內(nèi)差異較大，建議上述生產(chǎn)企業(yè)就各自產(chǎn)品在介質(zhì)pH1.0鹽酸溶液中溶出受限以及達(dá)到平臺(tái)期前各取樣時(shí)間點(diǎn)溶出量批內(nèi)差異較大開展相關(guān)研究，采用更優(yōu)質(zhì)的原輔料，優(yōu)化制劑處方及工藝，進(jìn)一步提升產(chǎn)品質(zhì)量。

因國家藥品監(jiān)督管理部門目前尚未公布洛索洛芬鈉膠囊的參比制劑，且洛索洛芬鈉片原研生產(chǎn)廠家日本第一三共制藥有限公司僅持有洛索洛芬鈉片、洛索洛芬鈉顆粒以及洛索洛芬鈉貼劑3個(gè)劑型，在筆者查詢的多種國外藥典版本中均未查詢到洛索洛芬鈉膠囊這一劑型的檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)。同時(shí)，市售洛索洛芬鈉膠囊溶出度標(biāo)準(zhǔn)均不一致，且彼此間差異顯著，最終溶出曲線方法的確定參考洛索洛芬鈉片參比制劑的溶出度方法。因此，該方法具有一定的局限性。