臨床不同標本病原菌培養檢測及耐藥情況分析

鄭玲瀅

福州市倉山區螺洲鎮衛生院檢驗科，福州 350000

臨床感染性炎癥多由細菌、病毒等引起，少部分是真菌引發，增加了患者的痛苦和醫療負擔[1]。通常應用抗菌類藥物進行抗感染治療，能有效抑制和滅殺病原微生物，改善臨床癥狀[2]。臨床上應用的抗菌藥物主要有人工合成類抗菌藥物和抗生素兩種，不同類型藥物在抗感染、抑殺病原菌方面存在差異。近年來，隨著抗菌藥物在臨床上的廣泛應用，易出現不合理用藥的情況，使得耐藥菌株增多，再加上病原菌有進化性特征，這導致臨床耐藥率呈現上升趨勢，不良反應增多，增大了臨床治療難度[3]?；诖?，加強對抗菌藥物應用管理、注重病原菌的耐藥性監控是實現臨床合理用藥的基礎，也是制訂臨床科學合理用藥方案的重要依據[4]。為進一步明確病原菌的最新分布及耐藥情況，本研究對2021 年1—12 月 福州市晉安區醫院（筆者進修單位）檢驗科細菌室接收的3233 份臨床患者的標本的分離培養細菌分布及耐藥情況進行分析，以期為本地區臨床感染防治和合理用藥提供指導。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集2021 年1—12 月福州市晉安區醫院檢驗科細菌室接收的3233 份臨床患者不同標本開展回顧性研究。納入標準：入院檢查前無感染表現；對臨床檢查知情并同意。本研究的進行均受醫學倫理委員會監督。排除標準：肝腎功能不全；合并惡性腫瘤、免疫系統病癥；凝血機制異常。標本類型：血液1283 份，痰液1086 份，分泌物584 份，中段尿139 份，糞便36 份，胸水33 份，胸腹水29 份，膽汁15 份，肺泡灌洗液11 份，其他17 份。

1.2 方法 所有標本均由相同醫護人員嚴格無菌操作獲取，收集后由專人送檢。

1.2.1 菌種分離培養 所有標本進行分離和培養，由細菌室檢驗師嚴格按流程及病原菌培養要求進行，具體操作：采集約5 ml 標本及時送檢，將標本接種到含8%無菌脫纖維羊血平板及麥康凱平板上，置于35℃恒溫CO2培養箱中培養過夜，依照臨床微生物學檢驗技術方法規范進行；將培養分離后病原菌送到細菌室，嚴格按《全國臨床檢驗操作規程》操作，采用質譜分析儀進行細菌鑒定。對培養得到的病原菌可重復多次培養，待結果相同才可確認。

1.2.2 排除重復菌株 對同一患者、同個部位重復菌株僅選用第1 株。依照患者入院時間，對48 h 內分離的菌株確定為醫院感染病原菌，部分患者入院時已出現發熱、黃色痰液等情況，對在48 h 內送檢標本分離的菌株予以剔除。

1.2.3 病原菌藥敏實驗 采用紙片法（K-B 法），以Vitek2-compact 全自動微生物鑒定配套的藥敏鑒定卡完成本項目的藥敏試驗。

1.2.4 藥敏判斷標準 依照美國臨床實驗室標準化協會CLSI 制定的M100-S24 標準進行結果判定。該協會根據情況持續更新內容，為臨床藥敏實驗結論的判斷及治療方案制訂提供切實可行的依據[5]。

1.3 觀察指標 耐藥率，即某種抗菌藥物耐藥菌株數/ 總菌株數。

1.4 統計學方法 通過SPSS 25.0 軟件對本研究臨床觀察指標數據進行分析，對于計數資料用n（%）表示，組間比較以χ2檢驗；計量資料以±s表示，組間比較以t檢驗；P＜0.05 表示差異存在統計學意義。

2 結果

2.1 本組標本的陽性檢出情況 本組3233 份樣本通過檢測，檢出陽性463 份，占比14.32%，包括細菌培養2728 份，檢出陽性236 份（8.67%），真菌培養505 份，陽性227 份（44.95%）；病原菌檢出中，檢出最多前三位的是大腸埃希菌（30.51%）、鮑曼不動桿菌（16.52%）、肺炎克雷伯菌（11.44%），最少為頭狀葡萄球菌（1.69%）、咽峽炎鏈球菌（1.27%）；真菌達到44.95%。見表1。

表1 本組樣本細菌培養的檢出

2.2 不同病原菌的耐藥情況 將分離培養的病原菌去除重復菌株后，大腸埃希菌有37 株，肺炎克雷伯菌19 株，鮑曼不動桿菌13 株。通過藥敏實驗分析，大腸埃希菌主要對氨芐西林、氨芐西林/舒巴坦耐藥，均在50%以上，其次是環丙沙星、左氧氟沙星、頭孢呋辛、頭孢呋辛酯，上述藥物均在40%以上；肺炎克雷伯菌對氨芐西林的耐藥率為100%，其次是哌拉西林、頭孢呋辛、頭孢呋辛酯，均在60%以上；鮑曼不動桿菌對頭孢唑啉耐藥100%，其次是復方新諾明、環丙沙星、妥布霉素、慶大霉素，均在80%以上，再次是左氧氟沙星、亞胺培南、頭孢吡肟、頭孢曲松、頭孢他啶、氨芐西林/舒巴坦，均≥70%。見表2、表3 及表4。

表2 大腸埃希菌的耐藥情況

表3 鮑曼不動桿菌的耐藥情況

表4 肺炎克雷伯菌的耐藥情況

3 討論

醫院感染有較高發病率，大部分是由細菌感染導致。臨床上，抗菌藥物能夠有效改善患者的機體感染癥狀，但是伴隨著藥物研究深入及發展，抗菌藥物種類增多，應用日益廣泛，病原菌的耐藥問題日漸嚴重，大大增加了醫院交叉感染的風險，影響患者的治療效果及預后[6]。基于此，明確醫院感染的病原菌分布及其耐藥情況，對于臨床進行針對性用藥治療有重要意義，有利于感染癥狀的早期控制。

本研究對臨床患者不同標本進行病原菌分離培養和耐藥檢測，從結果看，病原菌以革蘭氏陰性菌中的大腸埃希菌、鮑曼不動桿菌、肺炎克雷伯菌為主，分別占到30.51%、16.52%、11.44%，真菌達到44.95%。大腸埃希菌、鮑曼不動桿菌、肺炎克雷伯菌的檢出率均維持在較高水平，與臨床調查研究結果一致[7]。從臨床分離病原菌的占比看，大腸埃希菌、鮑曼不動桿菌、肺炎克雷伯菌、金黃色葡萄球菌、無乳鏈球菌居于前5 位，是臨床感染的主要病原菌，這可能和綜合性醫院收治急危重患者和侵入性手術較多，而增大病原菌的感染風險有關；菌株標本的來源以血液為主，表明病原菌多與機體臟器感染有關；其次是痰來源，提示呼吸道仍是醫院病原菌感染的主要途徑；感染部位分泌物和中段尿也比較高，是大腸埃希菌主要來源[8]。糞便、胸水、胸腹水的樣本量整體偏少，原因是標本采集相對困難。本研究中，大腸埃希菌主要對氨芐西林耐藥，耐藥率達到70%以上，略高于同期全國耐藥監測數據，其次是氨芐西林/舒巴坦，以及環丙沙星、左氧氟沙星、頭孢呋辛、頭孢呋辛酯等。肺炎克雷伯菌主要在胃腸道，少數在鼻咽部，可引發多種感染性病癥，是醫院常見的一種革蘭氏陰性條件病原菌。從本研究結果看，肺炎克雷伯菌對氨芐西林的耐藥率為100%，其次是哌拉西林、頭孢呋辛、頭孢呋辛酯，均在60%以上，原因可能與碳青霉烯類抗生素應用增加和感染控制等有關。肺炎克雷伯菌是全球常見的一種醫院病原體，除有內在的耐藥機制外，其還能得到外源基因，進而出現對碳青霉烯類、氨基糖苷類和氟喹諾酮類抗菌藥物多重耐藥菌株[9]。本研究表明，其對各種抗菌藥物耐藥率在15%～100%間，已對部分抗生素產生耐藥性，在后續臨床治療需重視。鮑曼不動桿菌是一種葡萄糖非發酵、氧化酶陰性球桿菌，其可在不利環境條件下生存以及高水平獲得抗生素耐藥性的能力使之成為最重要的醫院病原體之一[10]。本研究表明，鮑曼不動桿菌對頭孢唑啉耐藥100%，其次是復方新諾明、環丙沙星、妥布霉素、慶大霉素，均在80%以上，再次是左氧氟沙星、亞胺培南、頭孢吡肟、頭孢曲松、頭孢他啶、氨芐西 林/舒巴坦，耐藥率都在70%以上。在應用抗菌藥物時，需結合患者實際情況及藥敏試驗結果選用高敏藥物，以實現合理、有效用藥，提高治療效果。

綜上而言，在臨床感染病原菌主要是革蘭陰性桿菌，且其常用抗菌藥物有著較高的耐藥性。所以，在臨床選用抗菌藥物時必須做好病原菌培養檢測，明確耐藥情況，以實現科學合理用藥，確保療效，減少耐藥發生。但本研究以單個研究中心樣本開展研究，存在一定的局限性，后續需增加研究中心，多層次選取樣本，進一步強化結論客觀性。