鐘 麗
山東省臨沂市蒙陰縣畜牧發展促進中心,山東臨沂 276200
近年來,我國奶業快速發展,奶牛養殖規模逐年擴大,但目前我國牛奶品質層次不齊,和國外牛奶在營養指標上存在較大差異。以牛奶中脂肪含量要求為例,歐盟、新西蘭、澳大利亞牛奶中平均乳脂率分別為4.04%、4.78%、4.11%,而我國牛奶的平均乳脂率為3.69%,且乳制品的標準為3.1%[2]。在養殖過程中,保證泌乳早期奶牛生產性能的穩定性十分重要,為此常添加如益生菌、植物多糖、微生物和礦物質等物質來提高奶牛生產性能[3]。在奶牛泌乳早期,機體代謝旺盛,易出現代謝紊亂而導致泌乳早期奶牛免疫力下降,誘發炎癥,引發多種疾病,導致生產性能下降[4]。在植物多糖中,枸杞多糖是一種能提高機體免疫力、改善生產性能的有效活性物質,且枸杞在我國有上千年藥用歷史,滋陰補血、益精明目。現代藥理學研究發現,枸杞多糖具有抗衰老、抗氧化、提高免疫力和抗糖尿病的良好作用[5]。但枸杞多糖添加有一定的劑量要求,濃度過高或過低都影響其作用,選擇合適劑量添加對發揮枸杞多糖的最大價值具有重要意義[6]。本試驗通過探究泌乳早期奶牛日糧中添加不同劑量枸杞多糖添,對奶牛生產性能和血清指標的影響,以期為枸杞多糖在生產中應用提供數據支撐。
1.1.1 試驗動物及管理
試驗在山東某奶牛養殖場開展,試驗期21 d,從2022年4月5日到2022年4月26日。選取胎次相近的80頭泌乳早期奶牛[(產后21 d內,平均泌乳天數為16±2 )d],隨機分為4組,每組20 個重復,每個重復1 頭牛,分別為對照組、試驗A組、B組和C組,對照組飼喂正常日糧,試驗A組、B組和C組分別在基礎日糧中添加1%、2%和4%的枸杞多糖。所有試驗牛群自由采食、飲水,定期打掃牛舍和牛槽,保持定期通風,養殖條件符合衛生健康要求。試驗期間基礎日糧按照國家農產品質量安全監督檢驗中心飼料標準(2001)配制,具體營養組成見表1。

表1 基礎日糧的組成及營養水平(干物質基礎)
1.1.2 試劑和儀器
枸杞多糖(合肥盛潤生物制品有限公司),總抗氧化能力(T-AOC)、丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)活性檢測試劑盒(南京建成生物工程研究所),紫外可見光光度計(北京普析通用儀器有限責任公司),電熱恒溫器(天津泰斯特儀器有限公司),離心機(上海安亭科學儀器有限公司),全波長酶標儀(美國賽默飛世爾科技有限公司),乳成分分析儀(荷蘭DELTA LactoScope FTIR),體細胞計數儀(保加利亞LACTOSCAN)。
1.2.1 血漿分離
在第21天晨飼前,尾部采血10 mL,3 000 r/min離心10 min,取上層血清分裝于0.5 mL離心管中,-20 ℃保存。
1.2.2 生產性能的檢測
記錄每天奶牛日糧飼喂量及剩余飼料量,計算其采食量,同時記錄每日產奶量。記錄試驗第1天和第21天的體重變化,并計算飼料轉化率。
平均日增重=(試驗第21天體重-試驗第1天體重)/飼喂天數
平均日采食量=(給料量-剩余飼料量)/飼喂天數
料重比=平均日采食量/平均日增重
1.2.3 牛奶成分及體細胞含量檢測
在第21天用無菌管采集新鮮牛奶后,利用乳成分分析儀測量乳中脂肪和蛋白質的變化,利用體細胞計數儀測量乳中體細胞數量變化。
1.2.4 生化指標的檢測
血清按照試劑盒說明書要求測定牛T-AOC、SOD、GSH-Px和MDA的活性變化。
1.2.5 數據統計與分析
采用GraphPad Prism 5.0分析數據,試驗結果以平均值±標準誤表示,利用單因素方差分析,采用Tukey檢驗進行多重比較,P<0.05為差異顯著,P>0.05表示差異不顯著。
由表2可知,試驗B組和C組平均日增重和平均日采食量顯著高于對照組和試驗A組(P<0.05)試驗A組平均日增重和平均日采食量顯著高于對照組(P<0.05)。不同處理間料重比差異不顯著(P>0.05)。

表2 枸杞多糖對泌乳早期奶牛生產性能的影響
由表3可知,不同處理對乳脂率和乳蛋白率無顯著影響(P>0.05),但隨著枸杞多糖添加量的增加,試驗A、B、C組體細胞數顯著低于對照組(P<0.05)。

表3 枸杞多糖對泌乳早期奶牛牛奶中乳成分的影響
試驗B組和C組GSH-Px、SOD 和T-AOC顯著高于對照組和試驗A組(P<0.05),對照組和試驗A組GSH-Px、SOD 和T-AOC含量差異不顯著(P>0.05)。對照組和試驗A組、C組MDA含量顯著高于試驗B組(P<0.05)(表4)。

表4 枸杞多糖對泌乳早期奶牛抗氧化能力影響
本試驗發現,在飼料中添加2%的枸杞多糖能提高奶牛的平均日采食量和平均日增重,對降低乳中體細胞數量起明顯作用,這可能和多糖類能調節腸道菌群活性有關。鄭夢荷[7]在飼料中添加枸杞多糖飼喂犢牛,發現瘤胃及腸道中的雷沃氏菌科UCG-003、毛螺菌科NK4A136、普雷沃氏菌屬的豐度均顯著提升,且體重、采食量和消化率都提升,這與本試驗研究的趨勢一致。不同的是,本試驗料重比雖降低,但差異不顯著。添加2%的和4%枸杞多糖后泌乳量提升,乳中的體細胞數量下降,這可能和奶牛機體健康增強有關。這可能是枸杞多糖能調節奶牛機體免疫能力,有效降低體內炎癥。在奶牛飼喂過程中,乳腺部位極易由于病原體感染誘發炎癥,而奶牛患乳腺炎對牛奶及其加工制品質量有重要影響,會帶來嚴重經濟損失,因此降低炎癥的表達對維持泌乳早期奶牛的泌乳性能有重要意義,而體細胞數量變化是奶牛是否患乳腺炎癥的最直觀體現。有研究發現,枸杞多糖能降低乳腺炎小鼠中炎癥因子的表達,提高機體免疫力,對于大腸桿菌導致的乳腺炎具有明顯抑制作用[8]。本試驗也對體細胞數量進行檢測,發現添加飼喂枸杞2%和4%的多糖后,奶牛乳中的體細胞數量明顯下降,這說明在日糧中添加飼喂枸杞多糖對抑制奶牛體內炎癥,維持乳制品質量有重要作用,但兩種添加量之間無顯著性差異。
枸杞多糖可能對機體內的炎癥反應起有效改善作用,而炎癥反應和機體的氧化應激有緊密聯系。丁宇[9]對枸杞多糖的活性作用進行研究,發現枸杞多糖能有效緩解小鼠的氧化應激,提高GSH和SOD相關活性,進一步調節其炎癥反應。鄭夢荷[7]發現在日糧中添加枸杞多糖飼喂犢牛后,犢牛體內SOD活性上升,MDA和ROS水平下降,且影響其相關免疫因子表達。本試驗發現在日糧中添加枸杞多糖有利于提高奶牛GSH-Px、SOD、T-AOC表達,降低MDA含量,說明其對奶牛機體的氧化應激有明顯改善作用,從而助于維持奶牛機體健康。對于降低MDA含量的作用,2%的劑量相比4%更好。王翔巖[10]研究發現多糖的量效關系屬于鐘罩型曲線,與其自身的理化性質、制備方式、給藥方式密切相關,還和自身的腸道吸收能力具有一定關聯,這也可能是因為2%劑量效果更好的原因。王建東等[11]將枸杞多糖作為免疫增效劑飼喂奶牛后發現,1.8%的免疫調節效果比添加量為2.4%和3.0%的效果更好,說明枸杞多糖對機體免疫力及氧化應激的調節作用存在特定的藥物代謝動力學。
在本試驗條件下,日糧中添加2%或4%的枸杞多糖有助于提高奶牛的平均日增重和平均日采食量,同時能提高泌乳量,降低乳中的體細胞數量;而在氧化應激相關指標中,日糧中添加2%的枸杞多糖相比4%效果要好。因此,結合成本和作用效果,建議在日糧中添加2%的枸杞多糖。