高靈敏度HBV DNA檢測在乙型肝炎相關性肝細胞肝癌中的臨床應用價值研究

鐘歡妹，何玉花，陳丹娜，梁成結

1廣州醫科大學附屬第四醫院，廣州 511300；2廣州醫科大學藥學院，廣州 511495

肝細胞肝癌（HCC）是常見的一種惡性腫瘤，流行病學顯示，肝癌在我國所有惡性腫瘤中居于第四位，而其病死率居第二位[1]。中年男性是此病的高發人群，約有85%的HCC 患者的發病是持續感染乙型肝炎病毒（HBV）導致，有研究指出，導致HCC 的獨立危險因素就是HBV DNA，其載量和發病率之間呈正相關性[2]。近幾年，臨床中廣泛應用核苷類抗HBV 的藥物，增加了患者HBV DNA 的陰轉率[3]。但普通熒光探針法是臨床中常用的對HBV DNA 進行檢測的方法，相對來講靈敏度較低，在低病毒載量的患者中假陰性出現率較高，無法為臨床的判定和治療提供依據[4]。高靈敏度HBV DNA 檢測具有較高的特異度、靈敏性，能更好地明確低病毒載量患者的HBV DNA復制情況[5]。本文主要分析乙型肝炎相關性HCC 應用高靈敏度HBV DNA 檢測的價值。

1 對象與方法

1.1 研究對象 選取2020 年1 月至2022 年5 月于我院經普通熒光探針法檢測HBV DNA 水平持續低于1000 IU/ml 的乙型肝炎相關性肝細胞肝癌患者60 例，年齡43～79 歲，平均（56.75±3.64）歲，女7 例，男53 例。納入標準：確診為乙型肝炎相關性HCC；獲得倫理會批準；患者、家屬簽訂知情同意書。排除標準：有精神病史；存在其他原因導致的肝病，例如病毒性或酒精性肝病。

1.2 方法 所有入選患者均通過高靈敏度HBV DNA進行檢測，選用進口的HBV DNA 定量試劑以及全自動核酸擴增儀進行檢測，參考范圍小于10 IU/ml；通過進口的生化儀對肝功能指標進行監測，主要包含γ-GT（γ-谷氨酰轉肽酶）和ALT（丙氨酸轉氨酶）。普通熒光探針法PCR 檢測應用的試劑盒提供方為中山大學達安基因股份有限公司，參考范圍小于1000 IU/ml。

1.3 統計學分析 應用SPSS 20.0 分析數據，其中計數資料以率（%）表示，進行χ2檢驗，計量資料以±s表示，進行t檢測，P＜0.05 提示差異有統計學意義。

2 結果

2.1 高靈敏度HBV DNA 水平和抗病毒治療、肝硬化發生情況分析 60 例患者中檢出46 例高靈敏度HBV DNA ＞10 IU/ml 的患者（HBV DNA 陽性組），其 中31 例＜100 IU/ml 者，15 例＞100 IU/ml 者；14 例HBV DNA ＜10 IU/ml 者（HBV DNA 陰 性組），HBV DNA 陽性組發生肝硬化的概率（82.61%，38/46）比HBV DNA 陰性組（50.00%，7/14）高；陰性組癌變前進行抗HBV 藥物治療患者占比（45.45%，10/22）比癌變前未進行抗HBV 藥物治療的患者占比（10.53%，4/38）高（P＜0.05），見表1。

表1 高靈敏度HBV DNA水平和抗病毒治療、肝硬化發生情況分析 [例（%），60例]

2.2 HBV DNA 水平和肝功能指標分析 γ-GT、ALT正常組患者的HBV DNA 陽性率低于γ-GT、ALT 異常組（P＜0.05），見表2。

表2 HBV DNA水平和肝功能指標分析

3 討論

依據肝癌的組織學類型可以將其分為混合性肝癌、肝細胞癌以及膽管細胞癌三種，其中最常見的就是肝細胞肝癌，在原發性癌中占90%以上，具有較高的病死率，在全球范圍內均屬于較為常見的一種惡性腫瘤[6-7]。糖尿病、遺傳、肥胖、表觀遺傳改變、吸煙、慢性乙型肝炎、黃曲霉素毒素暴露、丙型肝炎病毒感染等是主要的導致肝細胞肝癌發生的危險因素，患者預后相對較差，具有較高的轉移率和復發率[8-9]。臨床中多通過抗病毒藥物進行HBV 治療，而最主要的對患者預后進行判斷的指標就是HBV DNA 檢測，國內相關指南建議，如果臨床檢驗中存在HBV DNA，就代表患者仍需要繼續進行抗HBV治療[10]。目前臨床中常用的對HBV DNA 進行檢測的方法為普通熒光探針法HBV DNA 定量PCR 檢測，其下限檢測范圍小于1000 IU/ml，因此假陰性出現率較高，無法準確的為臨床的判定、治療提供依據，嚴重的會延誤患者的最佳治療時間，導致病情加重[11-12]。

高靈敏度HBV DNA 檢測具有較高的特異度、準確性和靈敏性[13]。目前較多慢乙肝防治指南中均設定了HBVDNA 的檢測下限，并以此對抗病毒療效評價、治療終點建議評估進行指導，其中EASL（歐洲肝臟研究協會）2017 年設定HBV DNA 下限小于10 IU/ml[14]。本結果顯示：60 例患者中檢出46 例高靈敏度HBV DNA ＞10 IU/ml 的患者（HBV DNA 陽性組），其中31例＜100 IU/ml者，15例＞100 IU/ml者；14 例HBV DNA ＜10 IU/ml 者（HBV DNA 陰性組）。臨床中較容易忽視乙型病毒性肝炎HBV DNA 低水平復制的患者，因此不利于其治療方案的及時調整和預后判斷[15]。高靈敏度HBV DNA 檢測對患者的病情監測有利，可以保證及時對患者的抗HBV 治療方案進行準確的調整，避免肝臟損傷繼續發展的同時降低發生肝細胞肝癌的概率[16]。

相關研究指出，γ-GT 和ALT 和HBV DNA 水平之間存在相關性[17]。本結果發現，γ-GT、ALT 正常組患者的HBV DNA 陽性率低于γ-GT、ALT 異常組（P＜0.05）。由此可見HBV DNA 高水平復制的肝細胞肝癌患者其可能存在更明顯肝臟損害，而積極給予患者抗HBV 治療不僅可以控制患者的肝臟炎癥情況，還可以降低發生肝細胞肝癌的發生率[18]。高靈敏度HBV DNA 檢測的應用不僅可以更加準確的對病毒復制情況進行判斷，還可以幫助臨床及時對治療方案進行調整，另外有利于準確的對病情進行監測、對預后進行判斷，和普通熒光探針法檢測方法相比臨床指導意義更大[19]。臨床中在給予患者普通熒光探針檢測之后，依據患者的病情、其他實驗室數據進一步進行高靈敏度HBVDNA 檢測，以此提高患者治療的準確性、有效性，達到改善患者預后的目的[20]。

綜上所述，持續復制的乙型肝炎病毒是導致乙型肝炎相關性肝細胞肝癌發生的關鍵因素，相較于普通的熒光探針法HBV DNA 檢測，高靈敏度HBV DNA檢測效果更佳，能為臨床提供一定的指導意義。