化學(xué)發(fā)光免疫測定技術(shù)用于糖尿病生化免疫檢驗(yàn)的診斷價(jià)值研究

劉微微，耿繼儒，畢言偉

江蘇省徐州市中醫(yī)院檢驗(yàn)科，江蘇徐州 221000

糖尿病是臨床中發(fā)病率較高的內(nèi)分泌代謝系統(tǒng)慢性病變，該疾病的主要特征為血漿內(nèi)葡萄糖含量長期增高[1]。糖尿病發(fā)病后患者機(jī)體長期處在高血糖狀態(tài)中，對細(xì)菌繁殖有促進(jìn)作用，可嚴(yán)重?fù)p傷多個(gè)器官的功能，從而對其生活質(zhì)量造成負(fù)面影響。該疾病一旦發(fā)病后若未能及時(shí)采取有效診斷和治療，則會增加皮膚病、腎病及視網(wǎng)膜病變等多種并發(fā)癥風(fēng)險(xiǎn)，若病情嚴(yán)重還會危及患者的生命安全。當(dāng)前對于糖尿病的治療無特效方法，只能選擇終身用藥延緩病情進(jìn)展并預(yù)防并發(fā)癥，因此盡早發(fā)現(xiàn)和診斷糖尿病，在改善臨床預(yù)后方面有重要作用。以往在糖尿病的診斷中尿檢方法的應(yīng)用較多，在疾病的診斷中具有良好的效果，但假陰性和假陽性風(fēng)險(xiǎn)也相對較高，故臨床應(yīng)用相對受限[2]?；瘜W(xué)發(fā)光免疫測定法是近年來新興的一種生化免疫檢驗(yàn)方法，靈敏度、特異度、準(zhǔn)確度高，用于該疾病的診斷中對于患者血糖及相關(guān)生化指標(biāo)有良好的判斷作用，為疾病的治療提供有效依據(jù)，改善預(yù)后及生活質(zhì)量。選取2022年1月—2023年2月江蘇省徐州市中醫(yī)院檢驗(yàn)科接診的疑似糖尿病患者115例開展化學(xué)發(fā)光免疫測定技術(shù)的應(yīng)用效果研究，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取本院檢驗(yàn)科接診的疑似糖尿病患者115例，包括男70例和女45例，年齡37～76歲，平均（58.63±3.24）歲。此研究已經(jīng)上報(bào)江蘇省徐州市中醫(yī)院倫理委員會進(jìn)行審核，并獲得了研究批準(zhǔn)[2024倫審臨字（042）號]。

1.2 納入與排除標(biāo)準(zhǔn)

納入標(biāo)準(zhǔn)：所有疑似患者均有糖尿病類似癥狀表現(xiàn)；年齡均滿18歲；有完整的臨床資料；所有受檢者均對此次研究內(nèi)容和目的知情，自愿參與。

排除標(biāo)準(zhǔn)：合并惡性腫瘤、精神疾病、血液系統(tǒng)病變、肝腎功能不全、內(nèi)分泌失調(diào)嚴(yán)重等病變患者；妊娠期患者；檢查前有降糖類藥物或胰島素應(yīng)用患者。

1.3 方法

在本組疑似患者的生化免疫檢驗(yàn)中開展化學(xué)發(fā)光免疫測定技術(shù)，受檢者在采血前一晚開始禁食，并在次日清晨吃早餐前抽取4 mL靜脈血樣，采血后為其提供75 g無水葡萄糖，對其進(jìn)食時(shí)間進(jìn)行記錄，分別在進(jìn)食1 h和2 h后抽取靜脈血4 mL；所有血樣均在BY600A型號自動(dòng)脫帽離心機(jī)中處理，離心速率及時(shí)間分別設(shè)置為3 500 r/min和10 min，獲取上層血清后在冷凍環(huán)境中保存待檢，對于谷氨酸脫羧酶抗體、胰島細(xì)胞抗體進(jìn)行化學(xué)發(fā)光免疫檢測。

1.4 觀察指標(biāo)

按照口服葡萄糖耐量試驗(yàn)結(jié)果作為金標(biāo)準(zhǔn)，分析化學(xué)發(fā)光免疫測定技術(shù)對糖尿病的診斷效能。

口服葡萄糖耐量試驗(yàn)結(jié)果顯示空腹靜脈血漿血糖≥6.1 mmol/L，75 g葡萄糖口服1 h后≥10.0 mmol/L，2 h后≥8.5 mmol/L，3 h后≥8.0 mmol/L及以上即可確診糖尿病[3]。

化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)檢測糖尿病的陽性標(biāo)準(zhǔn)：谷氨酸脫羧酶抗體超過30 U/mL，胰島細(xì)胞抗體在0.1～300 U/mL之間則可評定為糖尿病陽性[4]。

診斷結(jié)果分為真陽性、假陽性、真陰性和假陰性，分別設(shè)定為A、B、C、D，受檢者總數(shù)量為n，故效能指標(biāo)的計(jì)算方法：準(zhǔn)確度=（A+C）/n×100%；靈敏度=[A/（A+D）]×100%；特異度=[C/（C+B）]×100%；陽性預(yù)測值=[A/（A+B）]×100%；陰性預(yù)測值=[C/（C+D）]×100%。

1.5 統(tǒng)計(jì)方法

數(shù)據(jù)分析選擇SPSS 26.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件，診斷效能值為計(jì)數(shù)資料，用例數(shù)(n)和率(%)表示，一致性分析進(jìn)行kappa檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

口服葡萄糖耐量試驗(yàn)的診斷結(jié)果顯示糖尿病陽性患者共86例，化學(xué)發(fā)光法的診斷結(jié)果顯示糖尿病陽性患者共88例，其中包括真陽性83例，假陽性5例。化學(xué)發(fā)光法對糖尿病的診斷準(zhǔn)確度、靈敏度、特異度、陽性預(yù)測值及陰性預(yù)測值分別為93.04%（107/115）、96.51%（83/86）、82.76%（24/29）、94.32%（83/88）、88.89%（24/27），化學(xué)發(fā)光法與金標(biāo)準(zhǔn)對糖尿病的檢出一致性較高（kappa=0.811，P＜0.05）。見表1。

表1 化學(xué)發(fā)光免疫法對糖尿病的診斷結(jié)果（n）

3 討論

糖尿病在臨床中發(fā)病率較高，屬于一種全身性病變，發(fā)病與胰島素分泌過少引起的糖代謝失調(diào)等有關(guān)，患者發(fā)病后機(jī)體長時(shí)間處在高糖狀態(tài)中，對細(xì)菌繁殖可有促進(jìn)作用，可引起糖尿病足、糖尿病腎病或視網(wǎng)膜病變等并發(fā)癥，會增加患者殘疾率和病死率[5-6]。當(dāng)前糖尿病并無特效療法，患者需要終身用藥延緩病情進(jìn)展及緩解各器官組織的損傷，所以及時(shí)發(fā)現(xiàn)和診斷糖尿病，對其治療方案的制定以及改善患者預(yù)后具有重要作用[7-8]。

與其他疾病相比，糖尿病的臨床診斷難度較低，尿檢的應(yīng)用更多，對尿液中的葡萄糖濃度進(jìn)行檢測可判斷患者發(fā)病與否，但如果血液中的葡萄糖濃度不高，腎臟將其吸收后則無法通過尿檢獲得更為準(zhǔn)確的結(jié)果。胰島細(xì)胞抗體為混合型抗體，當(dāng)其呈陽性結(jié)果時(shí)可直接對患者病程進(jìn)行反映，病程長的糖尿病患者該指標(biāo)含量通常低于病程短的患者?；瘜W(xué)發(fā)光免疫檢測技術(shù)近年來在糖尿病患者生化免疫檢驗(yàn)中的應(yīng)用不斷增加，可對血糖、血清C肽及胰島素等指標(biāo)進(jìn)行測定，從而對糖尿病的發(fā)生與否、辨病程度等進(jìn)行判斷，對臨床用藥發(fā)揮指導(dǎo)作用[9]。在此次研究中顯示，化學(xué)發(fā)光法與金標(biāo)準(zhǔn)的診斷結(jié)果相近，且對糖尿病的診斷效能較高（準(zhǔn)確度93.04%、靈敏度96.51%、特異度82.76%），與江洋[10]的研究結(jié)果（化學(xué)發(fā)光免疫測定對該疾病的診斷特異度100.00%、靈敏度、89.55%、準(zhǔn)確度91.25%）相似，可見化學(xué)發(fā)光免疫檢測技術(shù)在該疾病的診斷及病情判斷中具有確切的作用。

化學(xué)發(fā)光免疫檢測技術(shù)可準(zhǔn)確檢驗(yàn)機(jī)體的個(gè)別指標(biāo)，但在當(dāng)時(shí)因技術(shù)水平限制性，使得化學(xué)發(fā)光時(shí)間過短，因此靈敏度和準(zhǔn)確度均較低，儀器設(shè)備較為受限，僅被用作失蹤信號，導(dǎo)致該種方法的應(yīng)用范圍較小[11]。該技術(shù)可分為化學(xué)發(fā)光和免疫反應(yīng)兩大部分，化學(xué)發(fā)光指的是通過催化劑或氧化劑對化學(xué)發(fā)光物產(chǎn)生催化或氧化作用，以此形成激發(fā)態(tài)的中間體，當(dāng)其回到穩(wěn)定基態(tài)時(shí)會釋放很多等能極光子，從而有發(fā)光表現(xiàn)。按照該技術(shù)發(fā)光法為依據(jù)可分為脂質(zhì)體免疫測定法、膠乳增強(qiáng)免疫比濁法，可對發(fā)光物、發(fā)光酶以及發(fā)光輔助因子進(jìn)行免疫檢測。該技術(shù)作用原理在于利用有關(guān)物質(zhì)的輻射光標(biāo)記細(xì)胞等物質(zhì)，檢測效果確切；該技術(shù)的分析過程是在抗原或抗體上標(biāo)記發(fā)光酶等物質(zhì)，抗原抗體特異性結(jié)合后加入發(fā)光底物或氧化劑，在氧化反應(yīng)等作用下出現(xiàn)發(fā)光跡象[12]?；谔囟l件，可通過該技術(shù)中的化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度與物質(zhì)含量間有直接相關(guān)性，通過儀器對發(fā)光強(qiáng)度進(jìn)行檢測能夠快速明確待測物的具體含量。在糖尿病生化免疫檢驗(yàn)中應(yīng)用化學(xué)發(fā)光免疫測定技術(shù)具有較多的優(yōu)勢，包括操作流程簡單，耗時(shí)較短，通常在10～20 min左右即可獲得檢驗(yàn)結(jié)果，可提升檢驗(yàn)工作的效率；同時(shí)該種檢測方式的價(jià)格相對較低，可減輕患者的經(jīng)濟(jì)壓力，節(jié)省花銷。

綜上所述，糖尿病生化免疫檢驗(yàn)選擇化學(xué)發(fā)光法檢測技術(shù)能夠有效提升疾病的診斷效果與效能，可準(zhǔn)確檢驗(yàn)抗體、胰島素等生化免疫指標(biāo)，盡快明確患者的病情，為疾病的治療提供依據(jù)并發(fā)揮指導(dǎo)作用。