血清miR-221在慢性心力衰竭中的表達及與心肌重塑、心功能的關系

呂哲 宋丹 李鵬鵬 張國魯

慢性心力衰竭作為一類多種心臟疾病的終末期綜合征，近年來隨著社會的不斷發展，該病的發病率不斷升高，或在疾病進展期間伴隨出現諸多并發癥，并伴隨動脈硬化的出現，具有較高的死亡率，對患者的生命健康造成了較大的影響[1]。不過在當前臨床工作中針對慢性心力衰竭的疾病診斷率并不高，這也非常有可能給患者帶來較高的治療難度[2]。有臨床資料顯示，心肌重塑被認為是導致心力衰竭出現的重要作用機制，這也使得在對慢性心力衰竭進行研究時對心肌重塑過程引起足夠的關注具有重要的臨床意義[3]。微小RNA（microRNA，miRNA）作為一種具有較強調控作用的非編碼RNA，通常由21 ～23 個核苷酸所構成，其作用機制在于通過利用靶基因的3’非翻譯區結合而發揮較強的負性調控作用。近年來，隨著研究的不斷深入，發現越來越多的miRNA與心肌重塑及慢性心力衰竭的發生具有密切的關系，或可產生一定的調控作用。miR-221 作為miRNA 當中的重要一員，可在人體內廣泛存在，既往臨床研究報道證實，該指標與腫瘤的發生發展具有密切的關系，與心腦血管疾病也具有一定的聯系，但其是否參與了慢性心力衰竭的心肌重塑過程或與心功能密切相關性仍然值得研究及分析，尚無定論[4-5]。本研究就血清miR-221 在慢性心力衰竭中的表達水平及與心肌重塑、心功能的關系與臨床意義進行探討，旨在為疾病接下來的診斷及治療提供可靠依據，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取聊城市第四人民醫院2020年3月—2022年2月收治的110 例慢性心力衰竭患者作為研究對象。納入標準：全部患者均符合《中國心力衰竭診斷和治療指南2018》[4]中診斷標準；臨床上可表現出不同程度的休息或運動時呼吸困難、乏力、雙下肢水腫、納差等癥狀，在疾病進展期間多以勞力性氣促以及浮腫等為主要表現；具有清晰的意識以及認知功能；知情同意本研究。排除標準：合并存在急性冠脈綜合征；合并存在甲狀腺功能亢進性心臟病、圍產期心肌病以及心肌致密化不全等疾病；合并存在嚴重瓣膜性心臟疾病者；合并存在感染性疾病者；合并存在肝腎功能不全者；因各類原因導致的臨床資料缺失者。按照紐約心臟病協會（New York Heart Association，NYHA）分級標準將該組患者分為Ⅰ～Ⅱ級組（n＝38）、Ⅲ級組（n＝35）及Ⅳ級組（n＝37），同時選擇來聊城市第四人民醫院進行健康體檢的30 名健康人作為對照組，4組人員的一般資料比較，差異無統計學意義（P＞0.05），具有可比性。見表1。本研究經醫院醫學倫理委員會批準。

1.2 方法

全部人員均接受了彩色多普勒超聲檢查診斷，同時測量血清miR-221 的表達水平。

1.2.1 彩色多普勒超聲檢查診斷

全部參與人員均需要進行二維以及三維超聲心動圖檢查，檢查時嚴格按照美國超聲心動圖學會推薦的方法進行，測量指標包括左室舒張末內徑（left ventricular end-diastolic diameter，LVEDD）、左心房內徑（left atrial diameter，LAP）、左心室后壁厚度（left ventricular posterior wall thickness，LVPW）、左室質量指數（left ventricular Mass index，LVMI）、左室重構指數（left ventricular remodeling index，LVRI）、心排出量（cardiac output，CO）和左室射血分數（left ventricular ejection fraction，LVEF）。

1.2.2 血清miR-221 表達水平測量

全部參與人員的血清均采用EDTA-K2 真空管于晨間提取空腹靜脈血4 mL，將空腹靜脈血放置在離心機中做離心處理，離心速度為2 500 r/min，共離心10 min，提取血清后對血細胞及血漿進行分離，之后將其放置在-80 ℃環境中保存待測[6]。采用Trizol 試劑提取總RNA，隨后通過利用miR Base 數據庫獲取miR-221 相關成熟序列，對引物設計，上游引物：5’-GAGCCCAGTAGCCAGATG-3’，下游引物：5’-GAATGACCAGTACCAGAA-3’，擴增長度為824 p，退火溫度為50 ℃。采用實時熒光定量法對miR-221 的表達水平進行檢測，具體操作方法按照眾科技股份有限公司生產提供，采用2-△△Ct法對樣品當中的miR-221 表達量計算[7]。

1.3 觀察指標

比較不同心功能分級下慢性心力衰竭患者血清miR-221 的表達水平以及心功能指標的差異性，之后采用Pearson 相關性分析探討血清miR-221 表達水平與心功能指標的相關性。

1.4 統計學處理

采用SPSS 23.0 統計學軟件進行數據分析。計量資料以（±s）表示，采用F檢驗，組間比較采用獨立樣本均數t檢驗；計數資料以n（%）表示，采用χ2檢驗。采用Pearson 相關性分析探討血清miR-221 表達水平與心功能指標的相關性。檢驗水準α＝0.05。

2 結果

2.1 4 組血清miR-221 表達水平比較

Ⅳ級組的血清miR-221 表達水平高于Ⅲ級組、Ⅰ～Ⅱ級組及對照組（P＜0.05），Ⅲ級組血清miR-221 表達水平高于Ⅰ～Ⅱ級組及對照組（P＜0.05），Ⅰ～Ⅱ級組血清miR-221 表達水平高于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05）。見表2。

表2 4 組血清miR-221 表達水平比較（±s）

表2 4 組血清miR-221 表達水平比較（±s）

注：Ⅳ級組血清miR-221 表達水平分別與Ⅲ級組、Ⅰ～Ⅱ級組、對照組比較，t ＝56.512、22.410、28.514，P ＜0.05；Ⅲ級組血清miR-221 表達水平與Ⅰ～Ⅱ級組、對照組比較，t ＝56.512、44.378，P ＜0.05；Ⅰ～Ⅱ級組血清miR-221 表達水平與對照組比較，t ＝15.355，P ＜0.05。

組別血清miR-221 表達水平Ⅰ～Ⅱ級組（n ＝38）1.12±0.09Ⅲ級組（n ＝35）2.31±0.10Ⅳ級組（n ＝37）3.29±0.59對照組（n ＝30）0.54±0.21 F 值9.621 P 值＜0.001

2.2 不同組別人員心肌重塑及心功能指標比較

Ⅳ級組LEVDD、LAP、LVPW、LVMI 高于Ⅲ級組、Ⅰ～Ⅱ級組、對照組，LVRI、CO、LVEF 低于Ⅲ級組、Ⅰ～Ⅱ級組、對照組（P＜0.05）；Ⅲ級組LEVDD、LAP、LVPW、LVMI高于Ⅰ～Ⅱ級組、對照組，LVRI、CO、LVEF 低于Ⅰ～Ⅱ級組、對照組（P＜0.05）；Ⅰ～Ⅱ級組LEVDD、LAP、LVPW、LVMI 高于對照組，LVRI、CO、LVEF 低于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05）。見表3。

表3 4 組心肌重塑及心功能指標比較（±s）

表3 4 組心肌重塑及心功能指標比較（±s）

注：Ⅳ級組LEVDD、LAP、LVPW、LVMI、LVRI、CO、LVEF 與Ⅲ級組比較，t ＝2.000、4.381、2.764、2.044、2.591、2.177、2.985，P ＜0.05；Ⅳ級組LEVDD、LAP、LVPW、LVMI、LVRI、CO、LVEF 與Ⅰ～Ⅱ級組比較，t ＝42.585、10.610、6.137、2.974、3.501、4.215、7.225，P ＜0.05；Ⅳ級組LEVDD、LAP、LVPW、LVMI、LVRI、CO、LVEF 與對照組比較，t ＝19.598、12.451、8.536、3.544、5.653、5.515、9.499，P ＜0.05；Ⅲ級組LEVDD、LAP、LVPW、LVMI、LVRI、CO、LVEF 與Ⅰ～Ⅱ級組比較，t ＝2.019、5.308、3.233、2.044、2.135、2.168、4.743，P ＜0.05；Ⅲ級組LEVDD、LAP、LVPW、LVMI、LVRI、CO、LVEF 與對照組比較，t ＝15.696、8.430、5.379、2.547、4.702、3.183、7.801；P ＜0.05；Ⅰ～Ⅱ級組LEVDD、LAP、LVPW、LVMI、LVRI、CO、LVEF 與對照組比較，t ＝12.001、7.121、3.669、2.014、3.254、3.001、6.654，P ＜0.05。

組別LVEDD（mm）LAP（mm）LVPW（mm）LVMI（g/m2）LVRI（g/mL）CO（mL/min）LVEF（%）Ⅰ～Ⅱ級組（n ＝38） 72.02±7.2543.85±5.128.75±1.41115.69±33.511.10±0.336.51±1.5450.21±4.85Ⅲ級組（n ＝35）73.65±8.1150.21±5.119.80±1.36130.32±40.120.98±0.255.87±1.7744.62±5.22Ⅳ級組（n ＝37）76.22±9.0254.78±3.6610.66±1.28 139.84±36.770.92±0.315.33±1.6040.31±6.87對照組（n ＝30）45.32±6.1036.25±8.108.12±1.12104.36±45.201.15±0.247.32±1.9054.85±5.33 F 值10.25512.36914.0219.36122.25510.29819.664 P 值＜0.001＜0.001＜0.001＜0.001＜0.001＜0.001＜0.001

2.3 心肌重塑及心功能指標與血清miR-221 相關性

Pearson 相關性分析顯示，血清miR-221 與LVEDD、LAP、LVPW、LVRI 分別呈正相關性，與LVRI、CO 及LVEF 呈負相關性（P＜0.05）。見表4。

表4 心肌重塑及心功能指標與血清miR-221 相關性

3 討論

慢性心力衰竭作為一類發病率較高的心血管疾病，也是各類心血管疾病發展到終末期階段的臨床綜合征，在疾病進展期間通常會表現出不同程度的病理生理特點、射血能力受損以及心室血功能低下等情況，預后表現較差，具有較高的死亡率，被認為是能夠對患者健康以及當前醫療負擔造成最為直接影響的主要病因，對當前老齡化日益嚴重的中國人群而言需要引起足夠的重視。miRNA 是一類新發現的在多種生物進程中具有重要調控作用的非編碼RNA，是來源于內源性發夾結構轉錄本的長度大約為22 個核巧酸的單鏈RNAs。研究報道指出，多種不同疾病表達的過程中多存在著miRNA 異改變的情況，miRNA 相關成員通常能夠由細胞被釋放到血液內，并伴隨著血液循環進入患者體內，這也因此將其作為了診斷疾病及判斷預后的一類重要標志物[8-9]。臨床資料顯示，miRNA 能夠通過對心肌細胞的凋亡以及肥大等參與慢性心力衰竭的發生及發展，miR-221 也被證實可在慢性心力衰竭疾病中呈現較高的表達水平，并在心肌重塑工作中表現出了較強的調控作用，這在早期診斷及治療疾病方面發揮了重要的臨床價值及意義[10-11]。另外，也有前期研究證實了miR-221 一旦出現過度表達的情況非常容易誘發各類疾病的出現，增加各類心血管疾病的發生率[12-13]。

在本研究中，聊城市第四人民醫院就血清miR-221 在慢性心力衰竭中的表達水平及與心肌重塑、心功能的關系與臨床意義進行分析，結果顯示，Ⅳ級組的血清miR-221 表達水平高于Ⅲ級組、Ⅰ～Ⅱ級組及對照組，Ⅲ級組血清miR-221 表達水平高于Ⅰ～Ⅱ級組及對照組，Ⅰ～Ⅱ級組血清miR-221 表達水平高于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05）。結果提示，心功能等級越高，miR-221 的表達水平也就越高，且在慢性心力衰竭患者中心肌重構的發生也導致了心臟功能的降低，心臟功能表現也相對較差[14-15]。在對比心肌重塑及心力衰竭功能指標時，Ⅳ級組LEVDD、LAP、LVPW、LVMI 高于Ⅲ級組、Ⅰ～Ⅱ級組、對照組，LVRI、CO、LVEF 低于Ⅲ級組、Ⅰ～Ⅱ級組、對照組（P＜0.05）；Ⅲ級組LEVDD、LAP、LVPW、LVMI 高于Ⅰ～Ⅱ級組、對照組，LVRI、CO、LVEF 低于Ⅰ～Ⅱ級組、對照組（P＜0.05）；Ⅰ～Ⅱ級組LEVDD、LAP、LVPW、LVMI 高于對照組，LVRI、CO、LVEF 低于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05）。由此證實了心肌重塑指標以及心功能指標在不同心功能分級中的差異性[16]。Pearson 相關性分析顯示，血清miR-221 與LVEDD、LAP、LVPW、LVRI 分別呈正相關性，與LVRI、CO 及LVEF 呈負相關性（P＜0.05）。結果也由此證實了血清miR-221 與心肌重塑及心功能指標具有密切的相關性，能夠幫助完成對疾病的診斷及治療[17-18]。

綜上所述，血清miR-221 在慢性心力衰竭中具有較高的表達水平，且這種表達水平的升高與心肌重構以及心臟功能之間具有密切的相關性。在接下來的臨床工作中需要進一步的擴大樣本量，增加觀察指標，由此更好地對肌重構以及心臟功能之間的關系進行探討與評價。