寇 卉,石 絨,楊 杰,蘇 婧,張 洲
西北婦女兒童醫院生殖中心,陜西西安 710004
不孕是育齡婦女較為常見的疾病,據世界衛生組織相關文獻報道,育齡夫婦不能生育發生率為10%~15%,其中男性不育可占不孕不育夫婦的40%~50%[1-2]。男性不育是一類復雜的男性綜合征,發病機制尚不明確,發病原因較多[3],目前認為,除生殖器官先天異常、內分泌不育等相關疾病外,吸煙、飲酒及挑食等因素也可導致男性不育[4],且感染因素導致的男性不育也逐漸引起學者關注。解脲支原體(Uu)是一種條件致病微生物,可導致泌尿生殖道感染,引發睪丸炎及附睪炎等,進而影響男性生殖系統功能[5-6],但對于Uu感染是否影響男性精子質量尚存在較大爭議。本研究回顧性分析2020年1月至2020年12月在本院門診接受精液分析的22 265例不育男性患者的病例資料,旨在分析男性Uu感染對精液常規參數、精子功能形態及輔助生殖妊娠結局的影響,以期為臨床治療男性不育提供參考依據,現報道如下。
1.1一般資料 回顧性分析2020年1月至2020年12月在本院門診接受精液分析的22 265例不育男性患者的病歷資料。納入標準:(1)未采取避孕措施進行性生活≥1年;(2)6個月內未進行不育藥物治療;(3)無相關手術史。排除標準:(1)有放射性接觸史;(2)有遺傳性疾病家族史;(3)存在嚴重生殖系統異常;(4)合并泌尿生殖系統外科疾病。本研究經本院醫學倫理委員會審核批準(批號:2020661)。
1.2方法
1.2.1Uu檢測 采用Uu試劑盒(上海一研生物科技有限公司,型號:EY00P1338)進行Uu檢測,所有操作步驟均嚴格按照說明書進行,于Uu培養基中接種100 μL精液,放置于CO2培養箱中培養,接種72 h后判定是否存在Uu感染,根據是否存在Uu感染分為Uu陰性組與Uu陽性組。
1.2.2精液常規參數檢測 指導受檢者禁欲3~7 d,排尿后清洗陰莖,手淫法采集受檢者精液樣本,量杯精準測量受檢者精液量,顯微鏡下觀察并記錄精子密度,檢測并比較液化時間,采用伊紅-Y染色法檢測精子存活率。
1.2.3精子運動功能檢測 采用計算機輔助精液分析系統檢測患者精子活力(a-b)、直線速度(VSL)、曲線速度(VCL)及平均路徑(VAP)水平。
1.2.4精液形態及結構檢測 采用巴氏染色法進行染色,油鏡下計數200個精子形態,包括精子頭、頸、中段、主段及末端,計算精子畸形率,采用精子染色質擴散實驗檢測精子DNA碎片,采用苯胺藍染色法檢測精子核蛋白組型。
1.2.5隨訪 隨訪至2023年5月,共16 651例患者接受輔助生殖技術助孕治療,比較兩組輔助生殖妊娠結局。
1.3觀察指標 (1)記錄并比較兩組精液常規參數,包括精子密度、精子活率、精液量、液化時間;(2)記錄并比較兩組精子功能形態指標,包括精子畸形率、DNA碎片、核蛋白質組型;(3)記錄并比較兩組精液運動參數,包括a-b、VAP、VCL、VSL水平;(4)記錄并比較兩組受精率、流產率、早產率。

2.1Uu陰性組與陽性組年齡比較 Uu陰性組共18 793例,年齡22~38歲,平均年齡為(31.16±4.56)歲。Uu陽性組共3 472例,年齡21~39歲,平均年齡為(30.85±5.12)歲。兩組間年齡比較,差異無統計學意義(P>0.05)。
2.2兩組精液常規參數比較 兩組精液量比較,差異無統計學意義(P>0.05);Uu陽性組精子密度、精子活率均明顯低于Uu陰性組,液化時間明顯高于Uu陰性組,差異均有統計學意義(P<0.05)。見表1。

表1 兩組精液常規參數比較
2.3兩組精子功能形態指標比較 Uu陽性組精子畸形率、DNA碎片、核蛋白質組型均明顯高于Uu陰性組,差異均有統計學意義(P<0.05)。見表2。

表2 兩組精子功能形態指標比較
2.4兩組精液運動參數比較 兩組a-b、VAP、VCL水平比較,差異均無統計學意義(P>0.05);Uu陽性組VSL水平明顯低于Uu陰性組,差異有統計學意義(P<0.05)。見表3。

表3 兩組精液運動參數比較
2.5兩組輔助生殖妊娠結局情況比較 16 651例接受輔助生殖技術助孕治療的患者中,Uu陰性組14 287例,Uu陽性組2 364例。Uu陽性組受精率低于Uu陰性組,流產率、早產率均高于Uu陰性組,但差異均無統計學意義(P>0.05)。見表4。

表4 兩組輔助生殖妊娠結局情況比較[n(%)]
在不孕(育)癥的病因中,男性因素可占不孕(育)癥病例的50%,是不孕不育的主要原因。目前,關于男性不育的原因尚不完全明確[7]。許多研究分析了影響精子質量的因素,如肥胖、生活方式、工作條件、飲食文化、先天和遺傳因素,以及泌尿生殖系統感染等。Uu是支原體類型的一種,具有原核生物最小、最簡單、無細胞壁、可自我繁殖等特點,屬于條件致病菌,在人群中的攜帶率較高,30%~60%的門診患者在檢測中呈Uu陽性,其中絕大部分患者無任何癥狀,在生殖器感染和男性不育癥中發揮病因作用[8-9]。因此,分析Uu對男性精液的影響有助于尋找男性不育原因,且能改善患者預后情況。
LE等[10]研究認為,Uu感染可對精子質量存在負面影響,尤其影響精子相關參數。本研究結果顯示,Uu陽性組精子密度、精子活率均明顯低于Uu陰性組,液化時間明顯高于Uu陰性組,說明Uu感染可影響精子活性,可能與Uu感染可破壞精子膜的完整性,導致部分精子死亡,降低精子活性及密度有關;同時有研究表明,長期Uu感染將在導致機體免疫功能抑制Uu代謝及細胞毒性作用的同時出現超敏反應及自身免疫反應,損傷精子功能[11-12]。另外,Uu感染可導致慢性前列腺炎,導致精液中蛋白水解酶減少,精液的液化時間延長,在一定程度上影響受精[13-14]。
Uu感染通常被認為是男性精子細胞畸變的主要原因,Uu作為強大的畸變劑,與精子細胞的頭部結合,可損傷精子整體抗氧化能力,降低精子活力,還可誘導DNA修復缺陷進而導致個體基因突變[15]。精子是由不同DNA組成,而DNA碎片是評價精子質量及預測生育能力的指標,能反映精子DNA完整性,一般認為正常精子DNA碎片應<15%。精子核蛋白組型轉換是指精子核蛋白由組蛋白轉換為魚精蛋白、DNA高度致密化的過程,其水平反映精子的活力與活性[16],本研究結果顯示,Uu陽性組精子畸形率、DNA碎片、核蛋白質組型均明顯高于Uu陰性組,說明Uu感染可損傷精子結構,導致精子畸形率增加,精子活性活力降低,與PAIRA等[17]研究結果相近,Uu男性泌尿生殖系統感染會誘發泌尿生殖系統炎癥并降低精子質量,從而削弱男性的生育能力。
Uu感染可黏附于精子的頭部及尾部,干擾精子活動的同時還可侵入細胞質中釋放有毒物質,導致精子活力損傷[18],同時Uu感染還可誘導機體產生抗精子抗體,導致精子大量凝聚和精子活動能力下降[19-20]。本研究結果顯示,Uu陽性組VSL水平明顯低于Uu陰性組,說明Uu感染可影響精子向前運動速度,導致精子無法正常運行,精子運動能力下降,可能對精子穿卵受精造成一定影響,另外Uu陽性組受精率低于Uu陰性組,流產率、早產率均高于Uu陰性組,但差異均無統計學意義(P>0.05),說明Uu感染可嚴重損傷精子質量,但對輔助生殖妊娠結局影響較小。
綜上所述,Uu感染可導致男性患者精液密度、活力下降,增加液體液化時間及精子畸形率,影響精液前進運動能力及功能,但對輔助生殖妊娠結局影響較小。由于本研究對象來源均為本院就診人員,因此,實驗結果可能存在一定偏移,未來將擴大實驗對象來源進行深入探究。