微RNA 與冠狀動(dòng)脈疾病研究的文獻(xiàn)計(jì)量學(xué)評(píng)價(jià)

李 敏 趙小晗 劉 敏 馬曉娟▲

1.中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院西苑醫(yī)院心血管科，北京 100091；2.北京中醫(yī)藥大學(xué)研究生院，北京 100029

冠狀動(dòng)脈疾病（coronary artery disease，CAD）主要包括冠狀動(dòng)脈狹窄或斑塊、冠狀動(dòng)脈局限或痙攣、小血管病變、微血管功能障礙等，遺傳、環(huán)境及生活方式對(duì)其都具有一定的影響[1-2]。盡管目前在降低死亡率和發(fā)病率方面取得了成功，但復(fù)發(fā)事件的比例仍居高不下，因此開(kāi)發(fā)新型診斷標(biāo)志物用于CAD 的早期診斷和預(yù)后評(píng)估具有較高的臨床價(jià)值。微RNA（microRNA，miRNA）是一種長(zhǎng)度為18～25 個(gè)核苷酸的單鏈非編碼RNA，通過(guò)轉(zhuǎn)錄后機(jī)制調(diào)節(jié)靶基因的表達(dá)[3-4]。目前已鑒定出超過(guò)2 000 個(gè)miRNA 在人類多種疾病的診斷和治療中起作用[5-7]。隨著對(duì)其研究的深入，越來(lái)越多的證據(jù)表明，miRNA 參與了心臟的各種病理生理過(guò)程，如影響血小板活化、控制脂質(zhì)代謝及斑塊形成等，有望成為CAD 的早期識(shí)別、輔助診斷及預(yù)后評(píng)估的一種新型生物標(biāo)志物[8-10]。

1 資料與方法

1.1 數(shù)據(jù)收集、篩選

檢索WoS 核心數(shù)據(jù)庫(kù)獲取英文文獻(xiàn)，檢索式為TS=（coronary artery disease OR coronary heart disease）AND（microRNA OR miRNA）；檢索中國(guó)知網(wǎng)、萬(wàn)方數(shù)據(jù)知識(shí)服務(wù)平臺(tái)、維普網(wǎng)獲取中文文獻(xiàn)，檢索式為主題=（冠狀動(dòng)脈疾病OR 冠心病OR 急性心肌梗死OR 穩(wěn)定型心絞痛OR 不穩(wěn)定型心絞痛OR 冠狀動(dòng)脈微栓塞OR 冠狀動(dòng)脈慢血流）AND（微RNA OR miRNA）。納入標(biāo)準(zhǔn)：論文和綜述，發(fā)表于2010 年1 月至2023年6 月。排除標(biāo)準(zhǔn)：與主題無(wú)關(guān)，內(nèi)容不完整和重復(fù)發(fā)表的文獻(xiàn)。

1.2 數(shù)據(jù)分析

將英文文獻(xiàn)導(dǎo)入VOSviewer 中，繪制作者、關(guān)鍵詞密度圖，設(shè)置共現(xiàn)頻次為5。將中文文獻(xiàn)導(dǎo)入CiteSpace中，繪制作者、關(guān)鍵詞共現(xiàn)圖譜，參數(shù)為：方法LLR，時(shí)間切片2010 年1 月到2023 年6 月，年份1。最終用CiteSpace 制作中英文文獻(xiàn)時(shí)間線圖及突現(xiàn)圖，結(jié)合Excel 表展現(xiàn)中英文發(fā)文量前5 的機(jī)構(gòu)及關(guān)鍵詞聚類詞組。

2 結(jié)果

2.1 出版量

共納入英文1 733 篇，中文748 篇。該領(lǐng)域國(guó)內(nèi)外發(fā)文總體呈穩(wěn)步上升趨勢(shì)。見(jiàn)圖1。

圖1 時(shí)間-發(fā)文量分布圖

2.2 國(guó)家、機(jī)構(gòu)及作者

全球共284 個(gè)國(guó)家參與研究，發(fā)文量位居前3 的是中國(guó)（834 篇）、美國(guó)（296 篇）及德國(guó)（115 篇）。中英文發(fā)文量排名前5 的機(jī)構(gòu)見(jiàn)表1。圖2、3 分別為中英文文獻(xiàn)作者可視化圖。

表1 發(fā)文量前5 的機(jī)構(gòu)

圖2 英文作者可視化

圖3 中文作者可視化

2.3 關(guān)鍵詞

關(guān)鍵詞密度圖見(jiàn)圖4，圖中顏色越接近暖色，熱度越大。表達(dá)、動(dòng)脈粥樣硬化、生物標(biāo)志物是主要關(guān)鍵詞；圖5 為中文關(guān)鍵詞可視化圖，冠心病、心肌梗死、外泌體為主要關(guān)鍵詞。

圖4 英文關(guān)鍵詞密度圖

圖5 中文關(guān)鍵詞可視化

中英文關(guān)鍵詞聚類具體詞組見(jiàn)表2。英文聚類0、2、3 及中文聚類0、1、3 提示了miRNA 在不同的CAD中起著調(diào)控作用；英文聚類1、3 和中文聚類2 提示了miRNA 調(diào)控CAD 的具體機(jī)制；英文聚類0 及中文聚類1 主要為miRNA 指導(dǎo)CAD 的診斷與治療。

表2 關(guān)鍵詞聚類詞組

關(guān)鍵詞時(shí)間線圖見(jiàn)圖6～7，提示miRNA 與CAD相關(guān)疾病及其機(jī)制一直是中英文文獻(xiàn)的研究熱點(diǎn)，英文文獻(xiàn)側(cè)重機(jī)制研究，核因子κB、細(xì)胞外囊泡等理論的提出為該領(lǐng)域提供了新方向；中文文獻(xiàn)從2014 年開(kāi)始重視中醫(yī)證型及中藥在該領(lǐng)域的應(yīng)用，血瘀證、川芎嗪等研究較多，磁珠捕獲、纖維化等理論的提出具有重要的價(jià)值。中英文關(guān)鍵詞突現(xiàn)見(jiàn)圖8，英文文獻(xiàn)相繼出現(xiàn)的內(nèi)皮祖細(xì)胞、內(nèi)膜病變形成等詞，突出了對(duì)該領(lǐng)域機(jī)制的關(guān)注，2021 年后細(xì)胞外囊泡熱度持續(xù)至今；中文文獻(xiàn)突現(xiàn)的外泌體是近兩年的研究熱點(diǎn)和趨勢(shì)。

圖6 英文關(guān)鍵詞時(shí)間線圖

圖7 中文關(guān)鍵詞時(shí)間線圖

圖8 關(guān)鍵詞突現(xiàn)

3 討論

miRNA 由于其在各種生物過(guò)程中的核心作用而廣受全球關(guān)注，本研究通過(guò)知識(shí)圖譜形式對(duì)miRNA與CAD 相關(guān)研究進(jìn)行宏觀呈現(xiàn)。

3.1 研究現(xiàn)狀

該領(lǐng)域受到國(guó)內(nèi)外廣泛關(guān)注，如英文文獻(xiàn)Lang團(tuán)隊(duì)關(guān)注不同miRNA 在冠狀動(dòng)脈微栓塞、冠狀動(dòng)脈慢血流中的調(diào)控作用及其分子機(jī)制；Nariman 團(tuán)隊(duì)認(rèn)為miRNA 在CAD 的易感性及診斷方面發(fā)揮作用[11-12]。中文文獻(xiàn)各團(tuán)隊(duì)則重視中醫(yī)藥在該領(lǐng)域的應(yīng)用，如王階團(tuán)隊(duì)關(guān)注miRNA 在冠心病治療中的作用及認(rèn)為血塞通影響不穩(wěn)定型心絞痛的miRNA 表達(dá)[13-14]。劉詠梅團(tuán)隊(duì)認(rèn)為三七總皂苷通過(guò)調(diào)控miRNA 抑制急性心肌梗死大鼠心肌細(xì)胞凋亡[15]。各團(tuán)隊(duì)及研究機(jī)構(gòu)間合作相對(duì)分散，沒(méi)有形成獨(dú)特的學(xué)術(shù)交流網(wǎng)絡(luò)。

3.2 熱點(diǎn)及趨勢(shì)

目前miRNA 與CAD 的研究對(duì)象主要涉及冠心病、動(dòng)脈粥樣硬化、急性冠脈綜合征等疾病，其亞型如miR-34a、miR-146a、miR-126 等研究較多，有望成為診斷和預(yù)后CAD 的關(guān)鍵指標(biāo)。該領(lǐng)域機(jī)制的研究也備受關(guān)注，miRNA 在CAD 中起著微調(diào)控、多靶點(diǎn)的作用，如研究認(rèn)為miR-34a 通過(guò)沉默調(diào)節(jié)蛋白1，調(diào)控氧化型低密度脂蛋白所致的細(xì)胞凋亡[16]；并刺激促炎性細(xì)胞因子分泌及影響血管內(nèi)皮細(xì)胞凋亡[17-18]；增加血管細(xì)胞黏附分子-1 和細(xì)胞間黏附分子-1 的蛋白表達(dá)水平，促進(jìn)單核細(xì)胞對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞的黏附，加重內(nèi)皮細(xì)胞炎癥[19]。此外，史大卓課題組發(fā)現(xiàn)miR-34a與冠心病血栓前狀態(tài)密切相關(guān)，對(duì)炎癥-血小板-血栓網(wǎng)絡(luò)涉及的多個(gè)方面具有調(diào)節(jié)作用，并在基因和蛋白質(zhì)表達(dá)水平研究活血解毒中藥抑制血栓形成的機(jī)制，為中藥預(yù)防冠心病血栓形成提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)和分子靶向。基于關(guān)鍵詞突現(xiàn)，預(yù)測(cè)未來(lái)會(huì)有越來(lái)越多關(guān)于細(xì)胞外囊泡的研究，其作為miRNA 的載體在細(xì)胞間傳遞信息，根據(jù)生物合成途徑將細(xì)胞外囊泡分成外泌體、凋亡小體及微泡，游離的miRNA 容易被降解，通常會(huì)被封在囊泡中以獲得穩(wěn)定的狀態(tài)，比傳統(tǒng)的載體更具有靶向性，在CAD 中發(fā)揮著重要作用[20-25]。

綜上，目前對(duì)miRNA 與CAD 的研究均以動(dòng)物實(shí)驗(yàn)和小樣本量臨床試驗(yàn)為主，且對(duì)其分子機(jī)制的探討還不夠完善。此外，由于miRNA 種類繁多及提取技術(shù)和方案缺乏統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)，且易受藥物的干擾，因此今后的研究應(yīng)著重于對(duì)miRNA 的提取和歸一化技術(shù)進(jìn)行優(yōu)化，制訂一個(gè)統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)以滿足不同實(shí)驗(yàn)室之間的偏差，這就需要大量多中心、隊(duì)列前瞻性驗(yàn)證試驗(yàn)。隨著miRNA 管理的不斷完善，臨床研究者有信心實(shí)現(xiàn)其在CAD 的早期診斷、治療及預(yù)后的臨床應(yīng)用。

利益沖突聲明：本文所有作者均聲明不存在利益沖突。