血清高遷移率族蛋白B1、人β防御素2與腺病毒肺炎患兒閉塞性細支氣管炎發生的關系

程佳敏，譚志軍，蒙勇球，梁宙，趙玉蓮，鄭鳳麗

貴港市人民醫院（廣西醫科大學第八附屬醫院）兒科，廣西 貴港 537100

腺病毒肺炎（AP）是人腺病毒（HAdV）感染引起的肺炎，是一種常見且嚴重的兒童急性呼吸道感染。臨床上近1/3 的AP 患兒可發展為重癥肺炎，且在存活患兒中14%～60%會遺留不同程度的呼吸系統并發癥或后遺癥，其中以閉塞性細支氣管炎（BO）最為常見，嚴重影響患兒身心健康［1-2］。研究表明，氣道炎癥反應參與AP 患兒發生BO 進程［3-4］。高遷移率族蛋白B1（HMGB1）是一種多功能核蛋白，抑制HMGB1 能改善呼吸道合胞病毒支氣管肺炎患兒的支氣管炎癥反應［5-6］。人β 防御素2（hBD-2）是一種陽離子多肽，當機體受到病原體感染時其血液水平可急劇升高，升高程度與肺炎支原體感染以及急性下呼吸道感染嚴重程度相關［7-8］。本研究探討血清HMGB1、hBD-2 水平與AP 患兒BO 發生的關系，旨在為降低BO發生提供參考依據。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2021 年1 月—2023 年1 月本院收治的AP 患兒193 例，男108 例，女85 例，年齡1～57 個月。納入標準：①符合《兒童腺病毒肺炎診療規范（2019 年版）》［9］AP 診斷標準；②初次確診AP；③臨床表現（反復高熱、呼吸困難、低氧血癥）、影像學表現（階段性肺實變、肺不張、胸腔積液）、實驗室指標（白細胞計數、血紅蛋白、血小板計數、天冬氨酸氨基轉移酶、丙氨酸氨基轉移酶、乳酸脫氫酶、C 反應蛋白、降鈣素原）和機械通氣資料完整。排除標準：①合并遺傳或染色體疾病；②合并先天性呼吸系統發育畸形、支氣管肺發育不良、先天性心臟病；③合并支氣管哮喘；④近1 個月內使用激素治療；⑤合并自身免疫系統疾病、惡性腫瘤、血液系統疾病；⑥合并肺炎支原體、細菌等其他感染。本研究經貴港市人民醫院醫學倫理委員會批準進行，患兒家屬或監護人簽署書面知情同意書。

1.2 血清HMGB1、hBD-2 檢測 入院時采集AP 患兒靜脈血5 mL，3 000 r/min 離心15 min（離心半徑8 cm）；留取上層血清，用本生（天津）健康科技有限公司提供的酶聯免疫吸附試驗試劑盒檢測HMGB1、hBD-2。

1.3 BO診斷與分組 患兒出院后通過門診復查或電話隨訪3個月，參考《兒童閉塞性細支氣管炎的診斷與治療建議》［10］將AP 患兒分為BO 組58 例和非BO 組135 例。主要診斷標準包括：①發病前有感染或其他原因所致細支氣管損傷史；②持續或反復喘息，或呼吸困難、呼吸急促、咳嗽，運動不耐受，雙肺可聞及廣泛濕啰音、喘鳴音，以上表現持續6 周以上，且對支氣管舒張劑反應差；③肺功能檢測顯示混合性通氣功能障礙或小氣道阻塞性通氣功能障礙、支氣管舒張試驗多為陰性，胸部高分辨率CT檢查顯示支氣管壁增厚、支氣管擴張、馬賽克灌注征；④排除彌漫性泛細支氣管炎、肺結核、各種先天支氣管肺發育畸形、支氣管哮喘、呼吸道感染等其他原因引起的咳喘。

1.4 統計學方法 采用SPSS28.0 統計軟件。符合正態分布計量資料以±s表示，不符合正態分布計量資料以M（P25，P75）表示，組間比較分別采用t檢驗、Z檢驗；計數資料以例（%）表示，組間比較采用χ2檢驗；采用多因素Logistic回歸分析AP患兒BO 發生的影響因素；用受試者工作特征（ROC）曲線分析血清HMGB1、hBD-2 對AP 患兒BO 發生的預測價值。P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 血清HMGB1、hBD-2對AP患兒發生BO的影響

2.1.1 單因素分析結果 BO組月齡小于非BO組，熱程長于非BO 組，低氧血癥、機械通氣比例和血液白細胞計數、血小板計數、C 反應蛋白、降鈣素原、HMGB1、hBD-2 高于非BO 組（P均＜0.05），兩組性別、早產兒構成、影像學表現、反復高熱、呼吸困難以及血液血紅蛋白、天冬氨酸氨基轉移酶、丙氨酸氨基轉移酶、乳酸脫氫酶比較差異無統計學意義（P均＞0.05）。見表1。

表1 影響AP患兒發生BO的單因素分析結果

2.1.2 多因素分析結果 以單因素分析差異有統計學意義的月齡、熱程、低氧血癥、機械通氣以及血液白細胞計數、血小板計數、C 反應蛋白、降鈣素原、HMGB1、hBD-2 為自變量（所有連續變量均原值錄入），是否發生BO（賦值：是/否=1/0）為因變量。多因素Logistic 回歸分析顯示，低氧血癥、機械通氣和HMGB1、hBD-2 為AP 患兒發生BO 的獨立危險因素（P均＜0.05）。見表2。

表2 影響AP患兒發生BO的多因素Logistic回歸分析結果

2.2 血清HMGB1、hBD-2 對AP 患兒發生BO 的預測價值 血清HMGB1、hBD-2 聯合預測AP 患兒發生BO 的曲線下面積大于二者單獨預測的曲線下面積，比較差異有統計學意義（P均＜0.05）。見表3。

表3 血清HMGB1、hBD-2對AP患兒發生BO的預測價值

3 討論

AdV 為腺病毒科哺乳動物腺病毒屬，根據其基因和生物特性等分為多個亞屬，其中部分AdV 亞型對人類呼吸道有較強的組織嗜性，可侵入肺部導致AP，兒童由于免疫系統功能較弱成為AP 的主要人群［11］。BO 是指細支氣管炎性損傷導致的一種以反復或持續氣流受阻、呼吸困難為主要表現的慢性氣流受限綜合征，AP 患兒易發，目前尚無特效治療藥物，常導致患兒出現嚴重呼吸窘迫甚至多器官功能不全，嚴重威脅生命安全［12］。

HAdV 感染引起氣道上皮細胞損傷并釋放炎性介質和募集炎癥細胞，可引起免疫細胞異常活化、浸潤，導致炎癥反應增強促進BO 發生［13］。HMGB1 是真核細胞內廣泛存在的一種非組蛋白結合蛋白。生理狀態下HMGB1 能充當DNA 伴侶在細胞核內結合染色質，以維持基因組穩定和DNA 損傷修復；當細胞受到刺激和損傷壞死時HMGB1 能主動或被動釋放至細胞外，胞外HMGB1能特異性結合RAGE激活多條炎癥信號通路，促進炎癥發生發展［14］。既往研究證實，HMGB1 在HAdV 感染后表達上調，能結合RAGE 激活核因子-κB（NF-κB）信號通路，增強肺部炎癥損傷［15］。同時研究結果顯示，抑制HMGB1/Toll樣受體4（TRL4）/NF-κB 信號通路可緩解哮喘模型氣道炎癥［16-17］。血清HMGB1 水平升高能激活TRL4/NF-κB 信號通路，增強細支氣管上皮細胞炎癥反應，刺激膠原沉積、纖維增殖、組織重構等導致BO發生［18］。

hBD-2 是人體內首個被發現的誘導性抗菌肽，受到感染炎癥刺激后能迅速被激活以趨化免疫細胞發揮免疫功能［19］。既往研究指出，hBD-2 在HAdV感染后過表達，并能夠調控炎癥反應參與支氣管肺發育不良［20］。ROSS 等［21］報道，hBD-2 在氣道炎癥條件下大量表達，能招募未成熟的CD34 樹突狀細胞和記憶T 淋巴細胞引發適應性免疫反應。hBD-2 作為一種誘導性抗菌肽，在受到炎癥刺激時被激活且大量表達，故hBD-2 水平越高反映機體炎癥反應越強，BO 發生風險也就越高。同時研究指出，人氣管支氣管上皮中大量表達的hBD-2 還能與TRL4 復合以激活NF-κB信號通路，從而促進促炎因子表達［22］，增強細支氣管上皮細胞炎癥反應導致BO 發生風險增加。

總之，AP 患兒血清HMGB1、hBD-2 水平升高與BO發生密切相關，為AP患兒發生BO的獨立危險因素，血清HMGB1、hBD-2 水平聯合檢測對AP 患兒發生BO的預測價值較高。