牡蠣肽對帕羅西汀致雄性小鼠性功能障礙的作用效果及潛在機制

黃倩倩 ，吳海英 ，秦小明

1. 廣東海洋大學 食品科技學院，廣東 湛江 524088

2. 國家貝類加工技術研發分中心(湛江)/廣東省水產品加工與安全重點實驗室/廣東省亞熱帶果蔬加工科技創新中心，廣東 湛江 524088

男性性行為是一個復雜的生理過程，包括性喚起、陰莖勃起、陰莖進入陰道、射精幾個環節，其中任何一個環節出現障礙都稱之為性功能障礙；而環境因素、生活習慣、心理因素、藥物副作用等均有可能導致男性性功能障礙[1]。而這其中，藥物副作用導致的男性性功能障礙需要引起關注。近年來，抑郁癥患者比例逐年增加，而抗抑郁藥，尤其是5-羥色胺再攝取抑制劑 (SSRIs)，如帕羅西汀(PRX) 的臨床使用，已被證實會對男性性功能產生不良影響，包括勃起障礙、射精障礙以及性欲異常等，這無疑加大了對抑郁癥患者的傷害[2-3]。雖然磷酸二酯酶-5 抑制劑類藥物如西地那非 (SDF)，已被證明可用于治療勃起功能障礙 (Erectile dysfunction, ED)，但該藥物會給患者帶來其他副作用[4]。因此，亟需尋求一些無毒副作用的天然活性物質替代藥物治療男性性功能障礙。

人參 (PanaxginsengC. A. Mey.)、荸薺 (Eleocharisdulcis)、淫羊藿 (EpimediumbrevicornuMaxim.)、洋蔥 (AlliumcepaL.)等的植物提取物因富含皂苷、類黃酮、三萜類化合物等生物活性物質，已被廣泛應用于治療男性性功能障礙[5-9]。近年來，海洋環境中的動植物同樣為藥物的發現提供了天然化合物庫。鄭環宇等[10]研究發現，華貴櫛孔扇貝 (Mimachlamysnobilis)肉及其酶解產物可改善半去勢大鼠的生殖能力。Qiong 等[11]研究發現，海帶 (Laminariajaponica) 多糖對電離輻射損傷的雄性大鼠生殖系統及性能力均具有良好的恢復效果。此外，紅海藻 (Rhodophytasp.) 對動物的睪丸功能也有增強作用[12]。海馬 (Hippocampussp.) 活性肽與單環刺縊 (Urechisunicinctus) 活性肽同樣被證實可增強男性性功能[13-14]。由此可見，開發海洋動植物新產品以改善男性性功能障礙具有較大的應用前景與潛力。

牡蠣又稱海蠣子、蠔，肉質鮮美，富含蛋白質、氨基酸、多糖、微量元素等營養物質，被冠以“海洋牛奶”的美譽[15]，是我國第一批納入藥食同源的食品之一[16]。牡蠣肉及其提取物具有改善學習記憶[17]、抗皮膚光老化[18]、抗氧化[19]、改善睡眠[20]等生物活性。此外，牡蠣肽 (Oyster peptide,OP) 還可以促進小鼠睪丸間質細胞睪酮與一氧化氮(NO)的產生[21]，增強疲勞游泳后雄性小鼠的性行為[22]。本課題組前期研究也發現，牡蠣肉及其酶解產物可以提高半去勢大鼠的性能力[23]，促進小鼠睪丸間質細胞的睪酮分泌[15]，且牡蠣水解產物對雷公藤甲素誘導的雄性小鼠睪丸損傷具有潛在的保護作用[24]。由此可見，牡蠣肽在改善男性性功能活性方面具有較大潛力。但其改善男性性功能障礙的作用效果及機制依然不明確，缺乏足夠的理論支持，且關于牡蠣肽對PRX 誘導的性功能障礙的作用效果的相關研究尚未見報道。因此，本研究以牡蠣肽為研究對象，以PRX 口腔灌胃構建雄性小鼠性功能障礙模型，探討牡蠣肽對雄性小鼠性功能障礙的作用效果及其可能機制；以期為研發出相關的牡蠣產品提供理論依據，并為抗抑郁藥的臨床使用提供新方案。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

實驗原料：牡蠣肽 (生產許可證號：SC1061630 2300695；執行標準：Q/SMN0012S-2021；保質期36 個月；產品批號：20220712B)，購自海南盛美諾生物技術有限公司澄邁分公司。

實驗動物：64 只健康的SPF 級ICR 小鼠[ (26±2) g]，雌雄各半，購自廣州市研成生物科技有限公司。動物許可證號SCXK (京) 2019-0010，動物飼養處于無菌環境，溫度為22～26 ℃，濕度為50%～60%，明暗交替12 h，自由進食 (C60 輻照實驗鼠維持飼料) 和飲水。整個動物實驗過程嚴格按照廣東海洋大學動物實驗倫理委員會有關規定執行。

實驗藥品與試劑：鹽酸帕羅西汀片 (H10950043)購自中美天津史克制藥有限公司；枸櫞酸西地那非片 (H20020527) 購自輝瑞制藥有限公司；苯甲酸雌二醇注射液 (獸藥字163232511)、黃體酮注射液(獸藥字163231439) 均購自上海全宇生物科技 (駐馬店) 動物藥業有限公司；小鼠睪酮 (Testosterone,T) ELISA 試劑盒、小鼠促黃體生成素 (Luteinizing hormone, LH) ELISA 試劑盒、小鼠促卵泡生成素(Follicle stimulating hormone, FSH) ELISA 試劑盒、小鼠雌二醇 (Estradiol, E2) ELISA 試劑盒、小鼠環磷酸鳥苷 (cGMP) ELISA 試劑盒、小鼠磷酸二酯酶5 (PDE5) ELISA 試劑盒均購自江蘇酶免實業有限公司； NO、一氧化氮合酶 (NOS)、酸性磷酸酶 (ACP)、堿性磷酸酶 (ALP)、乳酸脫氫酶 (LDH)、超氧化物歧化酶 (SOD)、丙二醛 (MDA) 的測定試劑盒均購自南京建成生物工程研究所；BCA 蛋白濃度測定試劑盒 (增強型)購自上海碧云天生物技術有限公司。分子量所用標品：細胞色素C (分子量12384)、抑肽酶 (分子量6500)、桿菌肽 (分子量1422)、乙氨酸-乙氨酸-酪氨酸-精氨酸 (分子量451)、乙氨酸-乙氨酸-乙氨酸 (分子量189)，純度均≥95%，均購自Sigma 公司。17 種氨基酸標準品均購自Sigma 公司。

儀器與設備：Varioskan Flash 全自動酶標儀(美國Thermo 公司)；Waters 2695 高效液相色譜儀(配2487 紫外檢測器和Empower 工作站GPC 軟件，美國Waters 公司)；CKX41 型倒置顯微鏡 (日本Olympus 公司)；正置光學顯微鏡，日本尼康；JOYN-SXT-06B 脂肪測定儀 (上海喬躍電子科技有限公司)；HX204 水分測定儀 (瑞士METTLER TOLEDO 公司)；KjeltecTM8200kai 凱氏定氮儀 [福斯華 (北京) 科貿有限公司]；3-550PD 馬弗爐 (美國Neytech 公司)。

1.2 方法

1.2.1 基本成分測定

按GB 5009.5—2016 凱氏定氮法測定樣品粗蛋白含量；按GB 5009.6—2016 索氏抽提法測定粗脂肪含量；按GB 5009.3—2016 常壓干燥法測定樣品水分含量；按GB 5009.4—2016 高溫灼燒法測定灰分含量；按GB/T 9695.31—2008 苯酚-硫酸法測定樣品總糖含量。

1.2.2 分子量測定

色譜柱：TSKgel 2000 SWXL 300 mm×7.8 mm；流動相：乙腈/水/三氟乙酸，40/60/0.1 (體積比)；檢測：UV 220 nm；流速：0.5 mL·min?1；柱溫：30 ℃。

1.2.3 游離氨基酸測定

參照GB/T 22729—2008《海洋魚低聚肽粉》測定牡蠣肽游離氨基酸含量。

1.2.4 動物實驗

ICR 雄性小鼠適應性喂養7 d 后隨機分為4 組(n=8)：空白組 (CN，等體積蒸餾水)；模型組 (帕羅西汀，14 mg·kg?1PRX)；陽性組 (14 mg·kg?1PRX+7 mg·kg?1SDF)；牡蠣肽組 (14 mg·kg?1PRX+500 mg·kg?1OP)，對所有實驗組小鼠連續口腔灌胃28 d。帕羅西汀與西地那非的給藥劑量參考Ademosun 等[25]的研究。筆者課題組前期研究發現牡蠣酶解產物在250、500 和1 000 mg·kg?13 個劑量組中，中劑量組 (500 mg·kg?1) 對雄性小鼠生殖障礙的保護作用效果最佳[26]。因此，參考上述研究結果，本研究僅選用500 mg·kg?1劑量組，探討牡蠣肽在PRX 導致的性功能障礙中的作用效果。

交配行為實驗于末次口腔灌胃結束60 min 后進行。正式交配前48 h，對雌性小鼠肌內注射0.2 mg·只?1的苯甲酸雌二醇注射液，于前4 h 注射1 mg·kg?1的黃體酮注射液，使雌性小鼠處于動情期[27]。實驗安排在安靜、暗紅燈光下的房間里，于晚上20: 00—24: 00 進行，雄性小鼠先置于30 cm×15 cm×15 cm 規格的籠中適應15 min，隨后采用高清攝像頭記錄，從雌性小鼠放進籠子起開始記錄，觀察并記錄前30 min 的交配行為參數，包括騎跨潛伏期 (Mount latency，ML，雌鼠進入籠子至雄鼠第一次出現騎跨行為的時間間隔)、騎跨頻率 (Mount frequency，MF，雄鼠發生騎跨行為的次數)、插入潛伏期 (Intromission latency，IL，雄鼠首次插入雌鼠陰道的時間)、插入頻率 (Intromission frequency，IF，從雌鼠進入到實驗結束時雄鼠總的插入次數)、射精潛伏期 (Ejaculation latency，EL，雄性小鼠首次插入至射精的時間間隔)、射精后間隔期 (Post ejaculation interval，PEL，雄性小鼠射精后至再次插入的時間間隔)[28]。

實驗小鼠末次口腔灌胃結束后禁食不禁水12 h，稱量并記錄各組實驗小鼠體質量后摘去眼球取血，隨后分別取出小鼠陰莖、精囊腺、睪丸、心臟、胸腔、脾、肝臟、腎臟、肺并用電子天平精確稱量，計算臟器系數:

血清激素水平測定：取血后，血液于室溫下自然凝固15 min，4 ℃下3 000 r·min?1離心15 min，取血清；按照ELISA 試劑盒說明測定血清中睪酮(T)、促黃體生成激素 (LH)、促卵泡生成激素(FSH) 和雌二醇 (E2) 含量。

陰莖組織指標測定：按照試劑盒說明書制備陰莖組織勻漿液，并測定勻漿中蛋白質含量、NO 含量、NOS 活性、cGMP 含量與PDE5 活性。

睪丸組織指標測定：按照試劑盒說明書制備右側睪丸組織勻漿液，并測定勻漿中蛋白質含量，ACP、ALP、LDH、SOD 活性以及MDA 含量。

睪丸組織病理切片：將小鼠左側睪丸分別用甲醛固定液固定、包埋、切片、HE 染色及采集圖像。

精子質量：取小鼠左右附睪于裝有生理鹽水的EP 管中剪碎，搖勻，37 ℃水浴孵育15 min；取一滴稀釋液于血球計數板上，在光學顯微鏡下計數5 個方格中的精子數量，每毫升精子數量等于N×稀釋倍數×5×104。另取1 滴稀釋液涂片，觀察200 個精子，并計數其中有活動能力的精子數以計算精子活率。此外，根據精子快速染色試劑盒說明書對精子進行染色，并使用倒置顯微鏡觀察與捕獲染色后的精子圖像，并對精子形態進行分析。

1.2.5 數據統計分析

所有數據采用SPSS 27、Excel 2021、GraphPad 9.3 軟件進行統計分析及繪圖，通過單因素方差分析 (One-way ANOVA) 分析數據，P＜0.05 表示差異顯著，P＜0.01 表示差異非常顯著，P＜0.001 表示差異極顯著，三者均具有統計學意義，所有實驗結果均用“平均值±標準差”表示。

2 結果

2.1 牡蠣肽基本成分分析

按照國標方法對牡蠣肽基本成分含量進行測定(n=3)，以干基計，牡蠣肽中粗蛋白質量分數最高(70.61%)，其次是總糖 (25.75%)，粗脂肪質量分數僅為6.17%，灰分和水分質量分數分別為5.06%和6.65%，說明牡蠣肽是一種高蛋白低脂肪的物質，具有較高的營養價值。

2.2 相對分子質量分布與游離氨基酸分析

牡蠣肽的相對分子質量分布情況如圖1 所示，主要集中在＜1 000 D，含量高達95.66%，其中＜500 D 占83.41%，表明該牡蠣肽主要為小分子肽段，具有吸收效率高、能量消耗低的特點[29]；因此，可以推斷該小分子牡蠣肽具有較好的生物利用率。此外，牡蠣肽游離氨基酸中含人體所需的7 種必需氨基酸 (表1)，且必需氨基酸在游離氨基酸總量中占比為49.29%，支鏈氨基酸占比為21.35%，疏水性氨基酸占比為40.71%。適量補充必需氨基酸可在一定程度上促進機體新陳代謝并增強生育能力[30]，補充支鏈氨基酸可以提高機體的運動能力、減緩疲勞[31]。而疏水性氨基酸則具有較強的抗氧化能力[32]。牡蠣肽游離氨基酸含量及構成說明其具有較高的營養價值。

表1 牡蠣肽游離氨基酸含量分析Table 1 Analysis of free amino acid content of oyster peptid

圖1 牡蠣肽相對分子質量分布色譜圖Fig. 1 Chromatogram of relative molecular mass distribution of oyster peptides

2.3 牡蠣肽對小鼠交配行為的影響

雄性小鼠交配行為實驗結果如圖2 所示。與CN 組相比，PRX 組小鼠顯著延長了ML、IL、EL 與PEL (P＜0.001,P＜0.001,P＜0.05,P＜0.01)；而經牡蠣肽與SDF 干預后，與PRX 組相比，雄性小鼠ML、IL 與PEL 得到了有效縮短 (P＜0.001,P＜0.01,P＜0.05)，但EL 無統計學意義 (P＞0.05)。此外，與CN 組相比，PRX 組小鼠MF 和IF 分別顯著減少了43.68%和41.54% (P＜0.01)；而與PRX 組相比，PRX+OP 組分別使小鼠MF 和IF 顯著提高了57.14%和50.00% (P＜0.01,P＜0.05)，SDF 作為陽性藥物，同樣顯著提高了MF 和 IF (P＜0.05)。

圖2 牡蠣肽對小鼠交配行為的影響Fig. 2 Effect of oyster peptid on sexual behavior in mice

2.4 牡蠣肽對小鼠臟器系數的影響

由表2 可知，與CN 組相比，PRX、PRX+SDF 與PRX+OP 組的內臟系數及陰莖系數均無顯著性差異 (P＞0.05)，而PRX+SDF 與PRX+OP 組的睪丸系數與精囊腺系數，相比PRX 組均顯著增大(P＜0.01,P＜0.05)。附性腺器官的質量往往與雄性動物的雄激素活性及性能力相關，雄激素對附性腺器官細胞具有增殖增大的作用，即附性腺器官系數的增大可初步判斷樣品具有雄激素效應[33]。本研究發現牡蠣肽在一定程度上增大了睪丸系數與精囊腺系數，表明牡蠣肽具有雄激素作用，可通過作用附性腺器官細胞的增殖增大而達到提高雄性小鼠性能力的效果。

表2 牡蠣肽對臟器系數的影響Table 2 Effect of oyster peptid on organ coefficient%

2.5 牡蠣肽對小鼠血清性激素的影響

血清性激素水平是評價性能力強弱的關鍵指標，如圖3 所示。與CN 組相比，PRX 組T、LH、FSH、E2 濃度顯著降低 (P＜0.001,P＜0.01,P＜0.01,P＜0.001)，顯然，PRX 的給藥干擾了雄性小鼠的性激素水平。而與PRX 組相比，牡蠣肽與SDF 的給藥使雄性小鼠的T、LH 與FSH 濃度恢復至接近CN 組水平 (P＜0.001,P＜0.01,P＜0.05)。此外，與PRX 組相比，PRX+OP 組可使小鼠E2 濃度顯著升高 (P＜0.01)，而PRX+SDF 組E2 濃度則無統計學意義 (P＞0.05)，可能是牡蠣肽使雄性動物體內芳香化酶活性增強，從而使T 芳香化為E2，而SDF 則無此作用[34]。

圖3 牡蠣肽對血清性激素的影響Fig. 3 Effect of oyster peptid on serum sex hormones

2.6 牡蠣肽對小鼠陰莖組織勃起參數的影響

陰莖組織中的NO 與cGMP 含量，及NOS 與PDE-5 活性是雄性陰莖勃起生理過程中的關鍵因素。由圖4 可知，與CN 組相比，PRX 組NO 含量、cGMP 含量與NOS 活性顯著降低 (P＜0.001)，PDE5活性顯著升高 (P＜0.001)；由此可見，PRX 的給藥導致雄性小鼠陰莖勃起障礙。而與PRX 組相比，PRX+SDF 與PRX+OP 組可提高小鼠陰莖組織NO(P＜0.01) 與cGMP 含量 (P＜0.05)，恢復NOS 活性(P＜0.05)，降低PDE-5 活性 (P＜0.01)。說明牡蠣肽可以在NO/cGMP 信號通路上發揮作用，從而改善PRX 導致的勃起功能障礙。

圖4 牡蠣肽對陰莖組織一氧化氮、一氧化氮合酶、環磷酸鳥苷、磷酸二酯酶-5 含量或活性的影響Fig. 4 Effect of OP on content or activity of NO, NOS, cGMP and PDE5 in penile tissue

2.7 牡蠣肽對小鼠睪丸組織酶活性及MDA 含量的影響

ACP、ALP 與LDH 是睪丸標志酶，被認為是精子發生及睪丸發育的功能性指標[24]。當睪丸標志性酶活性發生變化時，睪丸功能及精子發生功能會受到相應影響。由圖5 可知，與CN 組相比，PRX 組ACP、ALP 與LDH 活性顯著降低 (P＜0.01)，可見PRX 可導致小鼠睪丸標志性酶活性下降。而與PRX 組相比，牡蠣肽與SDF 處理可顯著提高ACP 與LDH 的活性 (P＜0.01,P＜0.05)，但牡蠣肽對ALP 活性的影響則無統計學意義 (P＞0.05)。

圖5 牡蠣肽對睪丸組織標志性酶的影響Fig. 5 Effect of oyster peptid on marker enzymes of testis tissue

氧化應激是導致睪丸損傷及雄性動物性能力低下的重要原因，在PRX 誘導的雄性小鼠性功能障礙模型中也發現了這一現象。由圖6 可知，PRX引起脂質過氧化物MDA 含量顯著高于CN 組(P＜0.01)，SOD 活性顯著低于CN 組 (P＜0.01)，可見PRX 可通過破壞小鼠睪丸組織的抗氧化系統而降低其抗氧化能力。經牡蠣肽處理后，與PRX 組相比，MDA 含量顯著低于PRX 組 (P＜0.01)，SOD 活性也得到了顯著提高 (P＜0.01)。說明牡蠣肽可減緩PRX 引起的睪丸氧化應激損傷。

圖6 牡蠣肽對睪丸組織抗氧化能力的影響Fig. 6 Effect of oyster peptid on antioxidant capacity of testis tissue

2.8 牡蠣肽對睪丸組織結構及精子質量的影響

由圖7 可知，睪丸組織HE 染色切片結果表明，CN 組小鼠睪丸組織內生精小管排列整齊有序，生精細胞數量豐富、形態規則良好；而PRX組小鼠睪丸組織生精小管內生精細胞排列稀松紊亂，細胞數量銳減，管腔內空泡化嚴重。而經牡蠣肽處理后，生精小管內細胞排列規整、分布均勻，細胞數量明顯增加，形態也明顯改善。由此可見，牡蠣肽可以減緩PRX 導致的睪丸組織結構損傷。

圖7 睪丸組織病理分析Fig. 7 Pathological analysis of testicular tissue

精子質量可由精子數量、活率和形態反映出來。如圖8 所示，PRX 組小鼠精子數量與活率較CN 組顯著下降 (P＜0.001)；而與PRX 組相比，PRX+SDF 與PRX+OP 組可有效改善精子數量與活率(P＜0.01,P＜0.001)。此外，由圖9 可知，PRX 組小鼠出現大量盤繞尾巴、彎曲尾巴、環頸、無頭、無尾等畸形精子；而牡蠣肽處理后，可有效降低精子發生異常。結果表明，PRX 對雄性小鼠精子質量也產生了不利影響，與2.7 所述影響精子發生的幾種睪丸標志性酶活性下降的結果及睪丸組織HE 染色切片結果一致；本研究發現也與Saikia等[35]的結果相似。

圖8 精子數量與活率Fig. 8 Sperm count and motility

圖9 精子形態分析Fig. 9 Sperm morphology analysis

3 討論

大量研究表明，持續服用抗抑郁藥PRX 后會導致雄性動物的性能力下降，包括ML、IL、EL、PEL 的延長，以及MF 與IF 的下降[2]，而這些性行為指標是反映雄性動物性能力強弱最直觀的指標。在本研究中，雄性小鼠經口腔灌胃PRX 28 d 后，性能力明顯下降，而經牡蠣肽干預后，其性能力得到明顯改善，與Luo 等[22]研究發現牡蠣肽可以提高疲勞雄性小鼠性能力的結果相似。

性激素具有促進性腺器官生長發育、促進性成熟、刺激性欲等作用，在維持男性性健康中發揮著關鍵作用[26]。雄性小鼠在服用PRX 后，血清性激素水平顯著低于CN 組，可能是PRX 作用后對性腺軸產生了直接的毒性作用，亦或是PRX 對下丘腦或垂體的毒性作用而間接影響了性激素的合成與釋放[36]。本研究中PRX 導致的性激素水平下降與已有研究結果[36-38]一致，即持續服用PRX 會導致雄性動物性激素水平紊亂，繼而誘發雄性動物性功能障礙。然而經牡蠣肽處理后，雄性小鼠性激素水平可恢復至接近正常水平，說明牡蠣肽可能通過介導“下丘腦-垂體-性腺軸”而調節PRX 導致的雄性小鼠性激素水平紊亂。

此外，本研究通過測定牡蠣肽游離氨基酸含量發現，其精氨酸含量在所有游離氨基酸中占比最高。研究發現，L-精氨酸除可以維持精子功能、改善精子質量，提高血清睪酮濃度外，其亦是NO 的合成前體，在NOS 的作用下參與NO/cGMP 信號通路；當NO 進入到陰莖平滑肌細胞后，可使鳥苷酸環化酶 (Guanylate cyclase, GC) 激活，從而升高平滑肌細胞內的cGMP 濃度，進而降低鈣離子(Ca2+) 濃度使平滑肌松弛，最終引起陰莖勃起[39-40]。而PDE-5 則是NO/cGMP 勃起通路中的破壞者，可降解cGMP，導致平滑肌細胞內的cGMP 濃度下降，使陰莖難以勃起[41]。在本研究中，PRX 組中NO 濃度的下降，可能是由于PRX 的作用使得精氨酸酶活性增強，從而使L-精氨酸發生了降解[25]；抑或是因為PRX 導致的氧化應激，使得超氧化物與NO 作用形成了過氧亞硝酸鹽[42]。而經牡蠣肽處理后，雄性小鼠NO、cGMP 含量與NOS 活性較PRX 組顯著提高，PDE-5 活性顯著降低，可見牡蠣肽可能作為前體物質提高平滑肌細胞內NO與cGMP 濃度，亦可能作為精氨酸酶與PDE-5 的抑制劑而抑制精氨酸酶與PDE-5 的活性，以達到維持NO 與cGMP 濃度的目的。

精子的發生功能與睪丸標志性酶ACP、ALP和LDH 的活性密切相關，ACP 主要負責睪丸生殖細胞之間的物質交換，促進精母細胞的發育；ALP 主要負責管腔液與精子膜之間的物質交換，以及雄激素在精管周間質與曲細精管之間的轉移；而LDH 主要影響精子發生過程中的能量代謝與生物利用度[43]。本研究中PRX 作用后，睪丸磷酸酶與LDH 活性均顯著低于正常水平，影響了睪丸的生物功能與代謝活性，導致雄激素與精子細胞能量的生物利用度均降低。然而，在使用牡蠣肽干預后，睪丸標志性酶活性明顯增強，說明牡蠣肽具有較強的雄激素效應，在維持睪丸功能與精子發生功能方面發揮著關鍵作用。

氧化應激是導致男性ED 與生殖障礙的重要原因。Ogunro 和Yakubu[44]發現，PRX 作用后，睪丸組織的抗氧化防御系統遭到嚴重破壞；Adefegha 等[45]也發現，PRX 會引起睪丸脂質過氧化物MDA 含量與非蛋白硫醇含量升高。由此可見，PRX 的作用會誘導雄性動物產生氧化應激，進而影響男性性功能，這一現象在本研究中PRX 組小鼠睪丸組織SOD 活性較CN 組顯著下降，MDA 含量顯著升高的結果中也得到了驗證。而牡蠣肽作用后，有效減緩了PRX 導致的氧化應激損傷，說明牡蠣肽具有較強的抗氧化能力，這在本課題組前期的大量研究中也有類似發現[24,26]。

綜上，牡蠣肽對PRX 導致的雄性小鼠性功能障礙具有潛在保護作用，其作用機制可能與介導“下丘腦-垂體-性腺軸”調節性激素水平、作用NO/cGMP 勃起信號通路、減緩氧化應激損傷有關。本研究為今后研發相關的牡蠣產品提供了理論依據，也為藥物PRX 導致的性功能障礙的作用機制研究及PRX 的臨床使用提供了新的研究方案。