不同HBeAg結(jié)果HBV感染患者臨床指標(biāo)與肝臟病理特征的關(guān)聯(lián)性分析

樊璠,鳳鳴,許雅楠,張宇,朱麗莉,施晴波,徐沛峰,張建峰

乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染所致慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB)嚴(yán)重危害人類健康,可發(fā)展為肝纖維化、肝硬化乃至肝細(xì)胞癌[1]。肝組織活檢是診斷肝纖維化或肝硬化的金標(biāo)準(zhǔn),但作為一項(xiàng)有創(chuàng)檢查,仍具有局限性。因此,尋找新型、敏感、無創(chuàng)的CHB特異性指標(biāo)對(duì)于臨床病情評(píng)估及治療具有重要指導(dǎo)意義[2]。HBeAg轉(zhuǎn)陰的HBV感染患者,HBV復(fù)制及cccDNA水平均降低,但仍有發(fā)展為肝纖維化或肝硬化的可能,此時(shí)病毒學(xué)指標(biāo)無法準(zhǔn)確預(yù)測(cè)患者肝臟病理損傷程度。雖然肝功能指標(biāo)可部分預(yù)測(cè)肝細(xì)胞損傷程度,但部分ALT水平正常的患者可見肝組織學(xué)明顯改變,需要抗病毒治療[3-4]。因此,本研究擬探討不同HBeAg結(jié)果的HBV感染者臨床特點(diǎn),并分析影響不同HBeAg結(jié)果的HBV感染者肝臟炎癥程度和纖維化結(jié)果的因素,為HBV感染者病情評(píng)估或預(yù)測(cè)肝臟病理損傷程度提供新的參考。

1 資料與方法

1.1 研究對(duì)象 選取2021年1月—2022年2月我院就診的HBV感染患者103例為研究對(duì)象,男64例,女39例;年齡20～65(41.15±10.24)歲。按照HBeAg檢測(cè)結(jié)果分為HBeAg陽性組(n=39)和HBeAg陰性組(n=64)。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)符合《慢性乙型肝炎防治指南(2022年版)》[5]關(guān)于乙肝病毒感染的診斷標(biāo)準(zhǔn);(2)臨床資料完整;(3)患病時(shí)間>6個(gè)月;(4)HBsAg陽性;(5)無肝穿刺禁忌證。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)合并其他類型肝炎病毒感染患者;(2)藥物性或酒精性肝病患者;(3)自身免疫性肝病患者。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn),所有患者均簽署知情同意書。

1.2 資料收集 收集患者的年齡、性別、血清HBV DNA載量、ALT、AST、ALB、CHE、TBIL、DBIL、炎癥分級(jí)及纖維化分級(jí)等資料。其中血清生化指標(biāo)采用酶法和連續(xù)檢測(cè)法,儀器采用雅培C16000,試劑由上海復(fù)興長征醫(yī)學(xué)科學(xué)有限公司提供。乙肝病毒血清標(biāo)志物檢測(cè)采用化學(xué)發(fā)光法,儀器和試劑均由雅培公司提供。血清HBV DNA載量檢測(cè)采用熒光定量PCR法,儀器采用AB7500熒光定量PCR儀,試劑由湖南圣湘公司提供。

1.3 肝穿刺活組織檢查及病理 所有受試者均接受肝穿刺活組織檢查。肝組織長度>1.5 cm,用4%中性甲醛固定,常規(guī)石蠟包埋切片,行HE、Marsson等染色對(duì)肝臟病理進(jìn)行分級(jí)分期。肝臟炎性活動(dòng)程度及纖維化程度參照2006年更新版《病毒性肝炎防治方案》分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)[6]。根據(jù)肝臟病理切片炎癥程度將患者分為輕度肝炎患者(G<2)和中重度肝炎患者(G≥2),根據(jù)肝臟病理切片纖維化程度將患者分為輕度肝纖維化患者(S<2)和中重度肝纖維化患者(S≥2)。所有切片均由本院高年資病理科醫(yī)師進(jìn)行閱片,以保證結(jié)果的可靠性。

2 結(jié)果

2.1 不同HBeAg結(jié)果的HBV感染者一般資料和臨床指標(biāo)比較 HBeAg陽性組年齡、ALB、CHE水平低于HBeAg陰性組,中重度炎癥比例高于HBeAg陰性組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。2組間性別、HBV DNA載量、ALT 、AST、TBIL、DBIL、纖維化分級(jí)程度比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表1。

表1 不同HBeAg結(jié)果的HBV感染者一般資料和臨床指標(biāo)比較

2.2 影響不同HBeAg結(jié)果HBV感染者肝臟炎癥及纖維化程度的單因素分析 HBeAg陽性患者中,中重度肝炎患者ALT水平和中重度纖維化比例高于輕度肝炎患者, ALB、CHE水平低于輕度肝炎患者,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);中重度肝纖維化患者ALB、CHE水平低于輕度肝纖維化患者,TBIL、DBIL水平及中重度炎癥比例高于輕度肝纖維化患者,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。HBeAg陰性患者中,中重度肝炎患者年齡高于輕度肝炎患者,CHE水平低于輕度肝炎患者,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表2、表3。

表3 影響不同HBeAg結(jié)果HBV感染者纖維化程度的單因素分析

2.3 影響不同HBeAg結(jié)果HBV感染者肝臟炎癥程度的多因素Logistic回歸分析 以HBV感染者肝臟炎癥程度為因變量(輕度=1,中重度=2),以年齡、ALT、AST、ALB、CHE、TBIL、DBIL、纖維化分級(jí)為自變量,納入Logistic回歸分析。結(jié)果顯示,纖維化分級(jí)≥2、CHE水平降低為HBeAg陰性患者發(fā)生中重度肝炎的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。見表4、表5。

表4 影響HBeAg陽性HBV感染者肝臟炎癥程度的多因素Logistic回歸分析

表5 影響HBeAg陰性HBV感染者肝臟炎癥程度的多因素Logistic回歸分析

2.4 影響不同HBeAg結(jié)果HBV感染者肝臟纖維化程度的多因素Logistic回歸分析 以HBV感染者肝臟纖維化程度為因變量(輕度=1,中重度=2),以年齡、ALB、CHE、TBIL、DBIL、炎癥分級(jí)為自變量,納入Logistic回歸分析。結(jié)果顯示,炎癥分級(jí)≥2級(jí)是HBeAg陰性患者發(fā)生中重度肝臟纖維化的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。見表6、表7。

表6 影響HBeAg陽性HBV感染者肝臟纖維化程度的多因素Logistic回歸分析

表7 影響HBeAg陰性HBV感染者肝臟纖維化程度的多因素Logistic回歸分析

2.5 CHE水平對(duì)不同HBeAg結(jié)果HBV感染者肝臟炎癥和纖維化分級(jí)的預(yù)測(cè)效能 根據(jù)HBeAg陽性患者肝臟炎癥程度和纖維化程度的Logistic回歸分析結(jié)果,分析HBeAg陽性患者數(shù)據(jù)集,并繪制ROC曲線(圖1A、1B)。結(jié)果顯示,血清CHE水平預(yù)測(cè)HBeAg陽性患者肝組織炎癥程度和纖維化程度的曲線下面積(AUC)分別為0.820和0.900,敏感度分別為83.3%和79.3%,特異度分別為71.4%和90.0%。見表8。根據(jù)HBeAg陰性患者肝臟炎癥程度和纖維化程度的Logistic回歸分析結(jié)果,分析HBeAg陰性患者數(shù)據(jù)集,并繪制ROC曲線(圖1C、1D)。結(jié)果顯示,血清CHE水平預(yù)測(cè)HBeAg陰性患者肝臟炎癥程度和纖維化程度的曲線下面積(AUC)分別為0.723和0.597,敏感度分別為82.2%和29.4%,特異度分別為57.9%和100%。見表9。

1A 血清CHE水平預(yù)測(cè)HBeAg陽性患者肝臟炎癥程度的ROC曲線 1B 血清CHE水平預(yù)測(cè)HBeAg陽性患者肝臟纖維化程度的ROC曲線 1C 血清CHE水平預(yù)測(cè)HBeAg陰性患者肝臟炎癥程度的ROC曲線 1D 血清CHE水平預(yù)測(cè)HBeAg陰性患者肝臟纖維化程度的ROC曲線。圖1 血清CHE水平預(yù)測(cè)不同HBeAg結(jié)果HBV感染者肝臟炎癥和纖維化程度的ROC曲線

表8 CHE水平預(yù)測(cè)HBeAg陽性患者肝臟炎癥和纖維化程度的效能

表9 CHE水平預(yù)測(cè)HBeAg陰性患者肝臟炎癥和纖維化程度的效能

3 討論

乙型肝炎病毒感染是肝纖維化、肝硬化及肝細(xì)胞癌的主要病因之一,盡早評(píng)估肝臟損傷程度并進(jìn)行治療能夠很大程度減緩疾病進(jìn)展[7]。肝組織活檢是評(píng)價(jià)肝臟炎癥及纖維化程度的金標(biāo)準(zhǔn),但存在患者依從性差、檢測(cè)費(fèi)用高、有創(chuàng)、并發(fā)癥風(fēng)險(xiǎn)高等缺點(diǎn),限制了臨床應(yīng)用。因此,尋找無創(chuàng)診斷指標(biāo)對(duì)于評(píng)估病情和指導(dǎo)治療有重要意義[8-9]。本研究分析了不同HBeAg結(jié)果HBV感染者肝臟炎癥及纖維化程度的影響因素。

HBeAg是區(qū)分慢性乙型肝炎臨床分期的重要指標(biāo),該指標(biāo)轉(zhuǎn)陰提示慢性乙肝患者進(jìn)入免疫控制階段[10],該階段患者肝組織無明顯異常或輕度炎性壞死,無或僅存緩慢進(jìn)展的纖維化[11]。Wang等[12]和朱琪等[13]研究表明,HBeAg陰性是肝臟炎癥及纖維化的獨(dú)立危險(xiǎn)因素,相較于HBeAg陽性慢性肝炎患者,HBeAg陰性患者更有可能出現(xiàn)肝臟炎癥及纖維化。本研究結(jié)果顯示,HBeAg陰性患者輕度肝炎比例高于HBeAg陽性患者,HBeAg陰性患者雖傾向于出現(xiàn)肝臟炎癥,但其炎癥程度較低,符合免疫控制階段肝組織病理表現(xiàn)。但并未發(fā)現(xiàn)2組患者肝纖維化程度存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。可能原因?yàn)?慢性乙型肝炎患者肝臟炎癥與纖維化進(jìn)展并不完全同步。血清轉(zhuǎn)氨酶ALT分布于肝細(xì)胞細(xì)胞質(zhì),AST分布于肝細(xì)胞線粒體,肝細(xì)胞損傷可將這兩種酶釋放入血。監(jiān)測(cè)ALT和AST,可反映肝損傷程度。ALB和CHE反映肝臟合成功能,膽紅素反映肝臟排泄功能。單因素分析顯示,血清ALT、ALB、CHE水平及纖維化程度是HBeAg陽性患者肝臟炎癥程度的影響因素,血清ALB、CHE、TBIL、DBIL水平及炎癥程度影響HBeAg陽性患者肝臟纖維化程度。而肝排泄監(jiān)測(cè)指標(biāo)TBIL、DBIL水平與HBeAg陽性患者肝臟纖維化分級(jí)無關(guān)聯(lián),這可能與肝臟處理膽紅素儲(chǔ)備能力大,膽紅素不能敏感反映肝功能有關(guān)[14]。血清CHE水平、年齡是HBeAg陰性患者肝臟炎癥程度的影響因素,年齡越大、CHE水平越低的HBeAg陰性患者,其更有可能合并有中重度肝炎,應(yīng)注意監(jiān)測(cè)病情變化并給予積極的臨床干預(yù)。膽堿酯酶是肝細(xì)胞合成的水解酶,用于評(píng)價(jià)肝臟合成功能。梁影等[15]研究表明,CHE水平與肝損傷程度呈負(fù)相關(guān)。此外其他研究[16-17]也提示,隨著慢性乙肝患者病程進(jìn)展,血清CHE水平逐漸降低,其可作為早期診斷慢性乙肝患者早期肝臟纖維化程度的重要指標(biāo)之一。目前尚缺乏CHE水平對(duì)不同HBeAg結(jié)果HBV感染者肝臟病理損傷程度預(yù)測(cè)價(jià)值的研究。多因素Logistic回歸分析顯示,血清CHE越低為HBeAg陰性患者發(fā)生中重度肝炎的危險(xiǎn)因素。ROC曲線分析顯示,血清CHE水平評(píng)估HBeAg陰性患者肝臟炎癥程度有較高的敏感度(82.2%)。

本項(xiàng)研究不足之處在于,收集的數(shù)據(jù)來源單一,樣本量較少。同時(shí),肝臟作為合成凝血因子和儲(chǔ)存肝巨噬細(xì)胞的重要場所,肝功能異常往往伴隨凝血障礙和免疫失調(diào),本項(xiàng)研究未納入凝血和免疫指標(biāo)作為篩選變量,潛在的指標(biāo)可能會(huì)影響CHE等指標(biāo)對(duì)肝臟炎癥及纖維化程度的評(píng)估能力。后續(xù)研究中將進(jìn)一步擴(kuò)大樣本量和待篩選變量范圍,以提高對(duì)不同HBeAg結(jié)果慢性乙型肝炎患者肝臟病理損傷程度的預(yù)測(cè)效能。

盡管如此,本研究通過探討多項(xiàng)臨床指標(biāo)與不同HBeAg結(jié)果患者肝臟炎癥及纖維化程度的關(guān)聯(lián)性,揭示了血清CHE水平對(duì)HBeAg陰性患者肝臟炎癥損傷程度的預(yù)測(cè)效能。而血清CHE水平通過血液生化常規(guī)檢查即可獲得,相較于肝穿刺活檢,患者接受度高、費(fèi)用低、創(chuàng)傷小。這一體液檢查指標(biāo),雖不能完全取代病理檢查,但其臨床易獲得,一定程度上豐富臨床醫(yī)生病情評(píng)估手段,提高診療效率,減少不必要的肝穿刺病理檢查,降低患者治療負(fù)擔(dān)。

綜上所述,不同HBeAg結(jié)果的HBV感染者ALB、CHE水平及炎癥程度不同;炎癥程度越重的HBeAg陰性患者越容易發(fā)生中重度肝纖維化,反之亦然;血清CHE水平可作為預(yù)測(cè)HBV感染者肝臟炎癥和纖維化程度的敏感指標(biāo)。