白帶常規與陰道炎六聯檢在陰道感染性疾病病原體檢測中的價值

翁寶川 王菜籽 楊雅英

陰道微生態系統是成年女性生殖健康的基礎和保障，該系統是由內分泌、免疫、微生態菌群、生理結構等構成，各成分發揮著協調、制約的作用，進而使女性的生殖道微環境維持在一個動態穩定、協調的健康狀態[1]。但是在外部病原微生物的侵入及影響下，陰道的自凈與防御機能下降的狀態會造成該系統破壞，進而易發陰道感染性疾病，對成年女性身心健康和生活質量造成不利影響。研究報道，成年女性的各項激素水平發生改變，會誘發陰道上皮細胞的糖原量增加，進而影響局部酸堿平衡，而這就可能增加外部病原微生物的感染風險，所以成年女性的陰道感染及炎性疾病有著較高發生率[2]。早檢查、早診斷是防治成年女性陰道感染性疾病發生的關鍵。既往常采用白帶常規對陰道微生態進行檢查，在陰道感染性疾病早期診斷中的敏感性整體不高[3]。近年來，隨著婦科診療技術的發展，陰道炎六聯檢在生殖感染性疾病診斷中的應用以來，對其監測陰道感染性疾病的病原體檢測研究不多。基于此，本研究采取對照研究法探討白帶常規聯合陰道炎六聯檢在陰道感染性疾病的病原體檢查及臨床診斷中的價值，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

將2022 年11 月—2023 年4 月在廈門市第三醫院接受婦科診治的500 例白帶異?；颊呒{入觀察，均因白帶增多、有異味、色變就診。納入標準：（1）均存在性生活史，接受檢查前3 d 無性生活。（2）未應用陰道置入性藥物及抗生素。（3）年齡＞18 歲。（4）未行陰道灌洗，經期完成1 周。（5）對臨床檢查知情并配合。排除標準：（1）合并生殖疾病。（2）合并機體血液、免疫系統疾病。（3）合并泌尿系統感染?；颊吣挲g24～55 歲，平均（32.5±4.7）歲；生育史：有358 例，無142 例。本研究經醫院倫理委員會批準。

1.2 方法

1.2.1 采樣

由臨床醫生應用無菌拭子在受檢對象的陰道后穹隆及陰道上1/3 部位刮取適量分泌物，直接涂在一張載玻片和置于一管專用采樣試管內，并及時送檢。

1.2.2 檢測

白帶常規：采用白帶多功能染色液，嚴格按照試劑盒說明書操作。常規檢測包括陰道清潔度、念珠菌屬、滴蟲、白細胞（white blood cell，WBC）、加特納菌、線索細胞、纖毛菌、腎形雙球菌、核異質細胞等組織、細胞、微生物檢測。由醫生采集白帶直接涂在玻片上，待干后，滴R1 液（紅）3～4 滴展開，蓋住涂膜染色15～20 s 后，水洗，去除片上多余水分，滴R2 液（藍）3～4 滴染色10～15 s 后，水洗，趁濕放顯微鏡移動夾上，用低倍鏡觀察全片，再用高倍鏡檢查，如遇腎形雙球菌，待片干后，換油鏡仔細檢視。如遇細胞外腎形相對雙球菌，建議做細菌培養鑒定。

陰道炎六聯檢：主要檢測唾液酸苷酶（sialidase，SA）、白細胞酯酶（leukocyte esterase，LE）、乙酰氨基-β-半乳糖苷酶（acetylamino-β-Galactosidase，Aβ-G）、脯氨酸氨基肽酶（proline aminopeptidase，PA）、過氧化氫濃度、pH 值。由同一個檢驗人員操作。先將配套樣本稀釋液加入10 滴由醫生采集好的試管中，充分搖勻，同時充分擠壓采樣的棉簽拭子，再取出棄拭子，得樣本液待檢。將試劑平衡到室溫，取出反應裝置并將避光放置，將棉簽采集樣品置入軟試管中，加400 μL 稀釋液，反復擠壓棉簽，使樣品溢出，于反應裝置的六孔中每孔滴加1 滴稀釋后樣品，每滴約35 μL，再在SA 反應孔中滴加1 滴顯色液A，37 ℃反應7 min 后于凝固酶反應孔中滴加1 滴顯色液B 繼續反應3 min 后，10 min 內判讀結果。依照比色卡讀取結果并統計分析。

1.3 判定標準

1.3.1 白帶常規判定

清潔度。臨床醫生直接將分泌物涂于載玻片上進行特殊染色后，通過光學顯微鏡檢測，主要觀察上皮細胞、陰道桿菌、WBC、膿細胞及雜菌等分布情況，并評估清潔度。具體分為：Ⅰ度，在鏡下能夠觀察到大量的上皮細胞，且以陰道桿菌為主。Ⅱ度，在鏡下能夠觀察到部分上皮細胞、陰道桿菌，伴或不伴其他微生物。Ⅲ度，在鏡下可以觀察到無或少量的上皮細胞和陰道桿菌，但其他如WBC、膿細胞、雜菌大量存在。Ⅳ度，在鏡下未觀察到陰道桿菌，基本上是WBC、膿細胞、雜菌[4]。

然后在顯微鏡下觀察有無滴蟲、真菌等情況。凡可以觀察到線索細胞和（或）大量膿細胞和（或）滴蟲和（或）念珠菌等病原體，均判定存在陰道炎；如鏡下未能明確雜菌的類型，但清潔度為Ⅲ度以上則判定為陰道炎；如鏡下有線索細胞再加以下其中2 條：（1）陰道分泌物稀薄均勻。（3）pH 值≥4.5。（3）胺試驗呈陽性，清潔度為Ⅲ度以上。即可診斷為陰道炎[5]。

1.3.2 陰道炎六聯檢判定

正常陰道分泌物pH 3.8～4.5，當pH ≥4.5 時判定為陰道炎，pH ＜4.5 判定為真菌性陰道炎，pH ≥5.0 時判定為滴蟲陰道炎；過氧化氫濃度與乳酸桿菌數量呈正比；SA 陽性表示陰道炎；LE 陽性表示有炎癥存在，但不能說明什么病原菌感染；PA 陽性也考慮陰道炎和念珠菌感染；Aβ-G 陽性表示有真菌和（或）陰道毛滴蟲感染，但真菌中白念珠菌和熱帶念珠菌含有此酶，而克柔念珠菌和光滑念珠菌無此酶活性。

1.3.3 聯合診斷

在聯合診斷中，如可觀察到線索細胞和（或）大量膿細胞和（或）滴蟲和（或）念珠菌等病原體，清潔度在Ⅲ度以上，以及根據pH ≥4.5 進行聯合診斷。

1.4 觀察指標

觀察不同檢查方法下WBC 計數增高、細菌性感染、念珠菌感染、滴蟲感染的檢出率，陰道炎檢出率為幾項檢出率的總和。觀察不同檢查方法下白帶清潔度。

1.5 統計學處理

采用SPSS 23.0 統計學軟件進行數據分析。計數資料以n（%）表示，采用χ2檢驗或等級秩和檢驗。P＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 不同檢查方法下WBC 計數增高、細菌性感染、念珠菌感染、滴蟲感染及陰道炎檢出率比較

白帶常規聯合陰道炎六聯檢的細菌性感染、念珠菌感染、滴蟲感染的檢出率及陰道炎檢出率均高于單一方法檢測，差異有統計學意義（P＜0.05）。見表1。

表1 不同檢查方法下WBC 計數增高、細菌性感染、念珠菌感染、滴蟲感染及陰道炎檢出率比較[例（%）]

2.2 不同檢查方法下白帶清潔度比較

白帶常規、陰道炎六聯檢及聯合檢測的白帶清潔度比較，差異有統計學意義（P＜0.05）。見表2。

表2 不同檢查方法下白帶清潔度比較[例（%）]

3 討論

正常成年健康女性的陰道微生態是穩定的，乳酸桿菌是主要的優勢菌群，陰道上皮細胞糖原通過該菌群產生乳酸，以確保陰道環境維持在弱酸環境中，此種環境有助于抑制致病微生物的存活、繁殖，發揮一種陰道自凈和防御屏障的功能，但是由于飲食、性生活、妊娠、病原菌感染等，會導致白帶異常，使陰道微生態平衡打破，這就給其他病原生物的生長繁殖提供了環境。與此同時，個體內分泌激素的變化在一定程度上也會影響陰道微生態的平衡，這就大大增加了外源性病原微生物的侵入，進而增加了陰道感染性疾病的發生風險。從臨床上看，陰道感染性疾病主要表現為分泌物異常、瘙癢、異味等，存在特異性。臨床上僅有宮頸炎性疾病的癥狀與之相似，因而對大部分而言，需要跟進臨床癥狀、陰道分泌物性狀等診斷[5]。但在治療上通常需根據患者個體感染的病原微生物信息針對性用藥，不能判定感染病原微生物而根據經驗用藥可能會造成抗生素應用不當，影響療效和預后，且會增加耐藥性，增加治療難度。因而，有必要探尋新的、針對白帶檢查診斷方法。

近年來，有臨床研究人員指出，受陰道自潔及防御屏障作用的影響，成年陰道感染性疾病的發病存在一定的過程與階段[6]。因此，在早期階段通過相關檢驗指標的觀察實現陰道感染性疾病的早期預防對提升疾病治療有效率、降低疾病對女性生殖健康的影響具有積極作用。白帶常規檢測是婦科的一般檢查，通過白帶檢測可以發現患者陰道分泌物中的各種成分，來分析患者的感染情況，然后發現病原體，可以針對性地治療感染，效果較好[7]。通過白帶常規檢查進行診斷，臨床常規使用顯微鏡觀察標本，這種方法具有較強的主觀意志活動，人為干擾較大，對技術水平的要求較高[8]。因此，近年來臨床采用試劑盒檢測實現簡單、快速、全面評估女性陰道微生態情況，對于處于亞臨床感染的陰道微生態評估則更有助于預防陰道感染的發生，具有評價與預防價值。近年來臨床主張采用陰道炎六聯檢，在SA、LE、過氧化氫的檢測基礎上追加PA、Aβ-G 與pH，從而進一步提升陰道微生態環境評估的全面性與準確性[9]。但不同檢測方法的實際應用檢測效能以及檢測精確度往往存在較大的差異。本研究結果顯示，白帶常規聯合陰道炎六聯檢的細菌性感染、念珠菌感染、滴蟲感染的檢出率及陰道炎檢出率均高于單一方法檢測，差異有統計學意義（P＜0.05），白帶常規、陰道炎六聯檢及聯合檢測的白帶清潔度比較，差異有統計學意義（P＜0.05），與相關研究報道一致[10]。由此表明，陰道炎六聯檢對女性陰道感染性疾病的檢出率高于白帶常規鏡檢。

陰道炎六聯檢作用機制就是當成年女性陰道發生或存在炎癥改變時，陰道內環境的pH 值均會發生不同程度的升高，通過采集陰道分泌物并檢測其pH 值，如果pH值高于正常健康生理狀態下女性陰道內環境pH 值范圍則表明可能存在感染的風險[11]。其中陰道炎六聯檢項目中LE 是存在于WBC 中的中性粒細胞內，其他細胞內則沒有。只要在陰道分泌物中檢測到中性粒細胞也就是炎癥細胞，表示陰道黏膜受損，有炎癥存在。相較于白帶常規鏡檢，陰道炎六聯檢對LE 的檢測可實現定性檢測，有效避免鏡檢法中因WBC 破碎或其他非炎癥細胞存在而無法有效評估的情況。SA 則為陰道炎的可靠標志物之一，其主要由感染的細菌分泌產生。而PA 則與陰道炎、念珠菌的感染具有一定關系。Aβ-G 輔助診斷真菌和（或）陰道毛滴蟲感染[12]。通過對6 個項目的聯合檢測可在陰道微生態評估與感染性疾病診斷中的價值得到進一步提高，并且與常規鏡檢的聯合檢測可快速、準確、簡單地進行微生態評估與感染診斷。

綜上所述，成年女性陰道微生態環境直接關系到生殖系統的健康，一旦生態環境受到影響，那么陰道感染性疾病的發生風險增高，而白帶常規聯合陰道炎六聯檢在女性陰道微生態評估中大大提高檢出率，可用于成年女性陰道感染病原體檢查及診斷。同時，此文的研究結果為檢測陰道感染性疾病后期標準的制定提供了借鑒內容。