老年惡性腫瘤化療患者血清促紅細胞生成素、血管內皮生長因子及網織紅細胞參數變化及意義

夏晶穎, 張 倩

海軍軍醫大學第一附屬醫院 干部病房,上海 200081

惡性腫瘤是機體細胞過度增殖,失去正常調節而引起的疾病,被稱為三大非自然死亡疾病之一[1]。化療是目前治療癌癥的主要方法,可以有效地控制腫瘤細胞的增殖,延長患者生命。但老年患者免疫功能低下,機體重要臟器功能及儲備均嚴重下降,化療產生的不良反應會引起骨髓造血抑制,影響整體治療效果[2-3]。因此,尋找能夠靈敏且有效監測化療后患者骨髓造血功能情況的指標十分重要。網織紅細胞是未成熟階段的紅細胞,其在周圍紅細胞中的數量可用來反映機體的骨髓紅系造血功能,判斷是否貧血等異常情況[4]。促紅細胞生成素(erythropoietin,EPO)是一種酸性糖蛋白,也是紅細胞生成的主要調節因素[5]。血管內皮生長因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)是具有高度特異性的血管生成因子,低氧環境下可與受體結合,誘導內皮細胞增殖,促進新生血管形成,并增加血管的通透性[6]。本研究擬通過檢測老年惡性腫瘤患者化療前后血清中EPO、VEGF及網織紅細胞參數的表達情況,探討其對評估骨髓抑制的臨床意義。報道如下。

1 對象與方法

1.1 研究對象 選取自2017年5月至2022年7月于海軍軍醫大學第一附屬醫院就診的89例老年惡性腫瘤患者設為觀察組,其中,男性38例,女性51例;平均年齡(68.65±5.74)歲;疾病類型:胃癌22例,肺癌27例,結腸癌8例,乳腺癌5例,淋巴瘤4例,直腸癌9例,卵巢癌5例,食管癌4例,鼻咽癌5例。納入標準:(1)經臨床和病理檢查確診為惡性腫瘤;(2)首次接受化療;(3)年齡60～82歲;(4)無相關基因突變;(5)可提供完整臨床資料。排除標準:(1)近期使用抑制骨髓造血功能的藥物;(2)近期接受血清VEGF、EPO治療;(3)患有自身免疫疾病、感染性疾病;(4)既往有骨髓抑制史;(5)有精神類疾病。另選取同期于本院進行健康體檢的80例老年人設為常規組,其中,男性34例,女性46例;平均年齡(68.71±5.66)歲。兩組研究對象的年齡、性別比例比較,差異均無統計學意義(P>0.05),具有可比性。本研究經醫院倫理委員會批準。所有研究對象均知情同意。

1.2 研究方法

1.2.1 標本采集 常規組于體檢當日清晨,觀察組在化療前及化療3 d、1周、2周、3周清晨抽取空腹靜脈血5 ml,放入抗凝管。將血樣在室溫下以3 400 r/min離心10 min,收集上清液,然后于-80℃儲存,直到使用。

1.2.2 臨床指標檢測 采用全自動血液分析儀器檢測血小板計數(platelet count,PLT)、白細胞計數(white blood cell,WBC)、網織紅細胞參數等指標。網織紅細胞參數包括:低熒光強度網織紅細胞(low fluorescent reticulocvte,LFR)比率、中熒光強度網織紅細胞(middle fluorescent reticulocyte,MFR)比率、未成熟網織紅細胞指數(immature reticulocyte fraction,IRF)、網織紅細胞計數(reticulocyte,RET)比率、網織紅細胞計數絕對值(RET#)、網織紅細胞血紅蛋白含量(hemoglobin content of reticulocyte,RET-He)、高熒光強度網織紅細胞(high fluorescent reticulocyte,HFR)比率。

1.2.3 血清中EPO、VEGF水平檢測 采用酶聯免疫吸附測定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法檢測血清VEGF、EPO水平,檢測步驟嚴格按照試劑盒說明進行,人VEGF ELISA試劑盒購自武漢菲恩生物科技有限公司(貨號:EH3953),人EPO ELISA試劑盒購自上海酶研生物科技有限公司(貨號:EK-H10513)。

2 結果

2.1 兩組血清中EPO、VEGF及網織紅細胞參數表達水平比較 觀察組患者血清EPO、VEGF、RET#、MFR比率、HFR比率、RET比率、IRF均高于常規組,RET-He、LFR比率均低于常規組,組間比較,差異均有統計學意義(P<0.05)。見表1、表2。

表1 各組血清中EPO、VEGF表達水平比較

表2 各組血清網織紅細胞參數表達水平比較

2.2 觀察組患者血清中EPO、VEGF水平與網織紅細胞參數的相關性分析 Pearson法分析結果顯示,觀察組患者血清EPO、VEGF水平與RET#、MFR比率、HFR比率、RET比率、IRF均呈正相關,與RET-He、LFR比率均呈負相關(P<0.05)。見表3。

表3 觀察組患者血清中EPO、VEGF水平與網織紅細胞參數的相關性分析

2.3 觀察組化療前后患者血清中EPO、VEGF及網織紅細胞參數表達水平比較 化療后3 d,觀察組患者的MFR比率、HFR比率、LFR比率、PLT、WBC均開始下降,但與化療前比較,差異均無統計學意義(P>0.05);化療后1周,觀察組患者的MFR比率、HFR比率、LFR比率、PLT、WBC均明顯下降,化療后2周下降至最低值,化療后3周逐漸上升,各指標與化療前比較,差異均有統計學意義(P<0.05)。觀察組患者的VEGF、EPO、RET-He、RET#、IRF、RET比率在化療后3 d均呈明顯下降趨勢,且均在化療后1周降至最低值,化療后2周開始呈現上升趨勢,與化療前比較,差異均有統計學意義(P<0.05);各指標上升趨勢持續到化療后3周,且VEGF、EPO、RET比率與化療前比較,差異均有統計學意義(P<0.05)。見表4。

表4 觀察組患者化療前后血清中各指標表達水平比較

3 討論

隨著人們生活、工作方式的變化,以及社會老齡化加重,惡性腫瘤發病率逐年上升[7-9]。化療治療產生的毒副作用如骨髓抑制可導致外周血細胞數量減少,增加患者感染、貧血和出血的風險,影響腫瘤的有效治療并增加病死率[10-11]。因此,化療后及時、準確地判斷患者骨髓抑制發生情況仍是目前研究的重點。

網織紅細胞是反映骨髓造血功能、鑒別貧血的重要指標[12]。近年來,隨著網織紅細胞檢測技術的進步,其相關新參數正逐步應用于臨床。在既往研究中,WBC、PLT是用于監測惡性腫瘤患者化療后骨髓造血功能的主要指標,當二者出現下降時,骨髓造血功能已被顯著抑制。寧軍等[13]研究發現,網織紅細胞參數IRF、RET比率在檢測骨髓造血功能時表現出更高的靈敏度。王春陽等[14]研究發現,RET、RET比率、IRF、MFR比率等指標的下降與惡性腫瘤化療患者發生骨髓抑制關系密切。本研究通過對腫瘤患者化療前后各指標動態變化比較發現,患者化療后3 d,MFR比率、HFR比率、LFR比率、PLT、WBC均開始下降,但與化療前比較,差異無統計學意義(P>0.05);化療后1周下降明顯,2周下降至最低值,至3周時,表達逐漸上升。RET-He、RET#、IRF、RET比率在化療后3 d均呈明顯下降趨勢,且均在化療后1周降至最低值,化療后2周開始呈現上升趨勢,直到第3周。從上述結果可以發現,網織紅細胞相關參數RET-He、RET#、IRF、RET比率4個指標相較于MFR比率、HFR比率、LFR比率下降更明顯,可對以上指標進行嚴格監測,為臨床早期評估骨髓造血功能提供參考依據。

EPO可以作用于骨髓中的紅系造血祖細胞,促使造血紅細胞的增殖及分化[15]。VEGF是機體重要的細胞因子,其與血管生成等關系密切[16]。此外,VEGF還是影響骨髓微環境的關鍵細胞因子之一。骨髓微環境又被稱為造血干細胞的“土壤”[17]。有研究報道,VEGF在再生障礙性貧血患者中呈低表達[18]。因此,EPO、VEGF二者均有可能與化療后骨髓抑制的發生有關。本研究結果發現,老年惡性腫瘤患者血清中EPO、VEGF水平明顯高于健康人群,通過與網織紅細胞參數相關性研究結果發現,EPO、VEGF與RET#、MFR比率、HFR比率、RET比率、IRF均呈正相關,與RET-He、LFR比率均呈負相關,提示EPO、VEGF可能會影響網織紅細胞相關參數的變化。通過對患者化療前后血清中VEGF、EPO的動態監測發現,VEGF、EPO在化療后3 d均呈明顯下降趨勢,且在化療后1周下降至最低值,分析其原因,VEGF、EPO與骨髓造血均存在密切聯系,VEGF、EPO水平異常降低,會造成血管通透性降低,造血環境逐漸惡化,導致造血功能障礙趨于嚴重,因此,推測二者與骨髓抑制程度也存在一定聯系。化療后2周開始呈現上升趨勢,直到3周腫瘤患者接受化療后,VEGF、EPO水平進一步增高,其原因可能是化療導致骨髓造血產生抑制,引起紅系祖細胞對VEGF、EPO的利用度減少。以上結果提示,相對于臨床常用的血清指標WBC、PLT,EPO、VEGF具有更高的敏感度,在患者化療后3 d即可檢測到下降趨勢。這也提示,EPO、VEGF也可作為診斷老年惡性腫瘤化療患者化療后發生骨髓抑制的生物學標志物,可為患者的臨床化療提供參考依據。

綜上所述,EPO、VEGF及網織紅細胞參數指標可用來監測老年惡性腫瘤患者化療后骨髓抑制的發生。其中,VEGF、EPO、RET-He、RET#、IRF、RET比率在化療后檢測骨髓抑制發生的敏感度較高,對老年惡性腫瘤的臨床治療具有重要指導意義。但本研究樣本納入量較少,將在今后的研究中進行完善驗證。