游泳運動調控AMPK/NF-κB通路減輕尼古丁脅迫大鼠腎損傷

孔海軍 翟德強 諶曉安 王鳳華 李新龍

DOI：10.16783/j.cnki.nwnuz.2024.01.012

收稿日期：20230506;修改稿收到日期：20230904

基金項目：國家自然科學基金資助項目（31660736）；新疆維吾爾自治區高校科技計劃項目（XJEDU2021SY040）

作者簡介：孔海軍（1992—），男，山東濟寧人，講師，博士研究生.主要研究方向為運動醫學.

Email：15275475183@163.com

*通信聯系人，男，副教授，碩士.主要研究方向為運動與健康.

Email：1057033469@qq.com

摘要：為研究AMPK/NF-κB信號通路在游泳運動干預尼古丁脅迫大鼠腎損傷中的作用，將36只SPF級雄性SD大鼠隨機分為3組：正常對照組（NC組，n=12）、尼古丁脅迫組（NS組，n=12）及尼古脅迫+運動組（NS+Ex組，n=12）.NS組和NS+Ex組采用連續4周腹腔注射尼古丁（2.5 mg·kg-1·bw·d-1）建立NS模型；建模后，NS+Ex組接受連續8周游泳運動.采用酶聯免疫吸附試驗檢測血清腎功能標志物和腎組織氧化應激、炎癥標志物；免疫組織化學染色檢測腎組織α-SMA，KIM-1表達；Western Blot檢測腎組織AMPK/NF-κB通路相關蛋白表達.結果顯示，與NC組比較，NS組大鼠血清BUN和Scr水平顯著上升（P<0.05）；腎組織MDA，IL-1β，IL-6和TNF-α水平顯著上升，GSH-px水平顯著降低（P<0.05）；腎組織α-SMA，KIM-1表達顯著上升（P<0.05）；Bax，NF-κB p65，p-NF-κB p65，p38，p-p38，JNK和p-JNK蛋白表達顯著上升，Bcl-2，IκBα，p-IκBα，ERK1，p-ERK1，ERK2和p-ERK2蛋白表達顯著降低（P<0.05）.

與NS組比較，NS+Ex組大鼠腎組織炎癥組織浸潤和微細結構損傷減輕；血清BUN和Scr水平顯著降低（P<0.05）；腎組織MDA，IL-1β，IL-6和TNF-α水平顯著降低，SOD和GSH-px水平顯著上升（P<0.05）；腎組織α-SMA和KIM-1表達水平顯著降低（P<0.05）；腎組織Bax，NF-κB p65，p-NF-κB p65，p38，p-p38，JNK和p-JNK蛋白表達顯著降低，Bcl-2，IκBα，p-IκBα，ERK1，p-ERK1，ERK2及p-ERK2蛋白表達顯著上升（P<0.05）.上述結果表明，游泳運動可能通過激活AMPK通路活性并抑制NF-κB通路活性來改善尼古丁脅迫大鼠腎功能.

關鍵詞：游泳運動；尼古丁脅迫；AMPK/NF-κB信號通路；炎癥反應；腎損傷

中圖分類號：R 575;G 861.1??? 文獻標志碼：A??? 文章編號：1001-988Ⅹ（2024）01-0076-08

Swimming exercise alleviates renal injury in nicotine-induced

rats by regulation AMPK/NF-κB signing pathway

KONG Hai-jun1，ZHAI De-qiang1，CHEN Xiao-an2，WANG Feng-hua3，LI Xin-long1

（1.College of Physical Education，Kashgar University，Kashgar 844000，Xinjiang，China;

2.College of Physical Education，Jishou University，Xiangxi 416000，Hunan，China;

3.College of Physical Education，Xinjiang Normal University，Urumqi 830054，Xinjiang，China）

Abstract：To investigate the role of AMPK/NF-κB signaling pathway in the intervention of swimming exercise on nicotine-induced renal injury in rats，36 male SD rats（SPF） were randomly divided into three groups： the normal control group（NC，n=12），the nicotine stress group（NS，n=12） and the nicotine stress plus exercise group（NS+Ex，n=12）.NS and NS+Ex group were treated with intraperitoneal nicotine injection（2.5 mg·kg-1·bw·d-1） for 4 consecutive weeks in NS model.And then，the NS+Ex group received continuous swimming exercise for eight weeks.Serum renal function，renal tissue oxidative stress and inflammatory factors were detected by enzyme-linked immunosorbent assay（Elisa）.α-SMA and KIM-1 expression in kidney were detected by immunohistochemical staining.AMPK/NF-κB pathway-related proteins in renal tissue were detected by western blot.The results showed that，compared with the NC group，the NS group shows a significant increase in serum BUN and Scr levels（P<0.05）;the levels of MDA，IL-1β，IL-6，and TNF-α in renal tissue are significantly increased，and the level of GSH-px is significantly decreased（P<0.05）;the expression of α-SMA and KIM-1 in renal tissue is significantly increased（P<0.05）;the expression of Bax，NF-κB p65，p-NF-κB p65，p38，p-p38，JNK，and p-JNK proteins is significantly increased，while the expression of Bcl-2，IκBα，p-IκBα，ERK1，p-ERK1，ERK2，and p-ERK2 proteins is significantly decreased（P<0.05）.Compared with the NS group，the NS+Ex group shows a reduction in renal tissue inflammatory cell infiltration and microstructural damage.A significant decrease in serum BUN and Scr levels（P<0.05），a significant decrease in the levels of MDA，IL-1β，IL-6 and TNF-α in renal tissue，a significant increase in SOD and GSH-px levels（P<0.05），a significant decrease in the expression levels of α-SMA and KIM-1 in renal tissue（P<0.05），a significant decrease in the expression of Bax，NF-κB p65，p-NF-κB p65，p38，p-p38，JNK and p-JNK，and a significant increase in the expression of Bcl-2，IκBα，p-IκBα，ERK1，p-ERK1，ERK2 and p-ERK2（P<0.05） are presented.

All results indicated that swimming may improve renal function in nicotine-stressed rats by the activation of AMPK pathway activity and inhibition of NF-κB pathway activity.

Key words：swimming exercise;nicotine stress;AMPK/NF-κB signaling pathway;inflammatory response;renal injury

研究發現，除具備成癮性以外，尼古丁還通過激活非神經元煙堿乙酰膽堿受體（nAChRs）發揮其他生物效應，進而誘導多組織器官損傷［1］.如，吸煙可誘導不同類型癌癥、動脈粥樣硬化性血管病（包括冠心病和卒中）、阻塞性肺病、骨質疏松和消化性潰瘍病等［2］.研究表明，吸煙在慢性腎臟疾病（CKD）的進展中發揮重要作用，尼古丁攝入與糖尿病、高血壓、多囊腎病和腎移植后患者CKD的惡化風險存在密切關聯［3］.現階段，針對尼古丁源性腎損傷的治療仍以藥物和姑息手段為主，但其發病率仍在不斷上升，因此，需要預防或減輕尼古丁源性腎損傷進展及其靶器官影響的新療法.

研究認為，有氧運動可改善機體腎組織功能，減少微量白蛋白尿，恢復氧化平衡，進而延緩慢性腎損傷進展，持續炎癥、氧化應激和組織纖維化在急性腎損傷（AKI）向CKD進展中發揮重要作用［4］.有氧運動可通過抗炎、抗纖維化、抗氧化和自噬上調機制預防并減輕草酸鈣晶體誘導的AKI［5］.核因子κB（NF-κB）參與調節多器官組織免疫和炎癥反應，在AKI和CKD病程發展中發揮重要作用.尼古丁可廣泛激活機體NF-κB信號通路，誘導多組織器官炎癥反應和組織細胞損傷［6］.腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）是NF-κB信號通路的重要上游調控分子，AMPK/NF-κB信號通路的炎癥反應調控機制已被廣泛認可［7］.

遺憾的是，目前尚缺乏有氧運動手段干預促進尼古丁誘導腎損傷恢復的直接證據，但有學者猜測有氧運動的抗炎、抗氧化應激效應可能在其中發揮核心機制［8］.基于此，本研究擬探討游泳運動對尼古丁脅迫（NS）大鼠腎損傷的干預作用，同時驗證AMPK/NF-κB信號通路在NS腎損傷干預中的作用，為運動促進NS誘導的腎損傷康復提供思路和實驗依據.

1? 材料和方法

1.1? 實驗對象

36只6周齡SPF級雄性SD大鼠由新疆醫科大學實驗動物中心提供，動物生產許可證號為SCXK（新）2016-0002，動物使用許可證號為SYXK（新）2016-0003.本研究通過喀什大學實驗倫理委員會審查（KSU202207-02），實驗均遵循動物實驗倫理原則.大鼠飼養環境：溫度23～25 ℃，濕度55%～60%，光照條件每天12 h，自由攝食水.

1.2? 儀器與試劑

主要儀器：大鼠恒溫泳池（上海軟隆科技公司），全自動組織切片機（KH-Q330，湖北闊海醫療科技公司），顯微圖像分析系統（TE2000-U，日本奧林巴斯公司），酶標儀（imark Bio-Rad，美國伯樂公司），全自動尿液分析儀（URIT-1600PLUS，桂林優利特醫療電子公司），高速冷凍離心機（5424R，德國艾本德公司），EP凝膠成像系統（AlphaImager EP，美國ProteinSimple公司），電泳系統（Gene Pulser Xcell，美國伯樂公司），蛋白轉印系統（170-3930，美國伯樂公司）.主要試劑：尼古丁購自美國Sigma公司，白介素-6（IL-6）、白介素1β（IL-1β）、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、血清尿素氮（BUN）、血肌酐（Scr）、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）酶聯免疫試劑盒購自南京建成生物公司，RIPA裂解液、DAB顯色試劑盒、抗α-SMA抗體、抗KIM-1抗體、6.6 cm×8.5 cm PVDF膜、免疫組化洗滌和封閉試劑盒購自上海碧云天生物公司，BCA蛋白濃度測定試劑盒、β-actin內參抗體、Mouse源二抗、Rabbit源二抗購自美國CST公司.

1.3? 分組、建模與運動干預方案

實驗動物適應性飼養3 d后，隨機取24只大鼠，參照Ramalingam等［9］研究中NS模型大鼠的構建方法，大鼠接受尼古丁腹腔注射（2.5 mg·kg-1·bw·d-1），連續4周，滅菌注射用水配置尼古丁所需濃度；剩余12只大鼠不接受腹腔藥物給藥，正常飼養.末次尼古丁腹腔注射次日，采用5 mL無菌注射器于膀胱取尿液，全自動尿液分析儀檢測尿蛋白、尿素氮及尿酸水平.試驗過程中可能因尼古丁的毒性作用或其他原因，導致2只大鼠死亡（尼古丁脅迫建模第22 d、第24 d各1只）.參照Ramalingam等［9］研究中對尼古丁源性腎損傷的評價標準（尿蛋白（UP）≥500 mg·L-1、尿肌酐（Ucr）≥200 mg·L-1、尿酸（UA）≥3.5mmol·L-1），最終20只大鼠成功建立尼古丁脅迫模型，成模率為83.3%.20只尼古丁脅迫模型大鼠隨機分為尼古丁脅迫組（NS組）及尼古丁脅迫+運動組（NS+Ex組），每組10只，剩余12只大鼠設置為正常對照組（NC組），NS+Ex組大鼠進行適應性游泳訓練3 d（每天1次， 每次15 min）；NC組和NS組不接受運動干預，正常飼養.適應性游泳訓練后NS+Ex組進行連續8周游泳運動（每周6 d， 每次40 min）.運動干預期間各組大鼠無死亡.

1.4? 取材

末次游泳運動后次日，空腹麻醉，腹主動脈取血，全血室溫自凝45 min，4 ℃，2 000 r·min-1離心10 min取上清即為血清，-80 ℃保存.迅速取大鼠腎組織，右腎制備切片，取左腎500 mg加入PBS勻漿介質，2 000 r·min-1勻漿1 min，勻漿液轉移至離心管，4 ℃，6 000 r·min-1離心10 min，取上清-80 ℃保存.

1.5? 酶聯免疫吸附試驗

取血清及腎組織勻漿液，采用酶聯免疫吸附試劑盒檢測腎組織白介素-6（IL-6）、白介素1β（IL-1β）、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）水平，以及血清尿素氮（BUN）、血肌酐（Scr）、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）水平.

1.6? 免疫組織化學染色

取右腎，切片并脫蠟、復水，經抗原修復，分別加抗α-SMA抗體（1∶200）及抗KIM-1抗體（1∶250），4 ℃孵育過夜，PBS緩沖液清洗，二抗孵育，按照DAB顯色試劑盒流程進行顯色反應.顯色終止后使用蘇木素染色液將核染為藍色，染色結束后脫水、封片，觀察所顯棕黃色的面積與顏色深淺，即α-SMA和KIM-1表達水平.

1.7? 蛋白免疫印跡

取大鼠腎組織勻漿液，采用RIPA法提取組織總蛋白，4 ℃，12 000 r·min-1離心20 min；取上清液使用BCA蛋白濃度試劑盒測定蛋白濃度，加入5×SDS緩沖液，95 ℃變性15 min.配置SDS-PAGE凝膠，濃縮膠恒壓80 V電泳30 min，分離膠恒壓110 V電泳至溴酚藍到達分離膠底部，20 μg上樣，用電轉法將蛋白質轉移到PVDF膜上.5%脫脂牛奶室溫封閉1 h，加入一抗（1∶1 000稀釋），4 ℃搖床孵育過夜；TBST洗膜10 min×3次，加二抗（1∶3 000稀釋），37 ℃孵育40 min；TBST洗膜10 min×5次.ECL法顯影，凝膠成像系統成像后使用Quantity One 3.0軟件分析，以β-actin作為內參，計算目的蛋白相對表達量.

1.8? 統計學分析

采用SPSS 25.0統計學軟件進行統計分析，數據以平均值±標準差表示，兩樣本平均數間比較采用t檢驗分析，P<0.05表示有顯著性差異.

2? 結果

2.1? 大鼠血清腎功能指標的變化

由圖1（a）可見，與NC組比較，NS組大鼠血清BUN和Scr水平顯著上升（P<0.05）.與NS組比較，NS+Ex組血清BUN和Scr水平顯著降低（P<0.05）.

2.2? 大鼠腎臟氧化應激指標的變化

由圖1（b）可見，與NC組比較，NS組大鼠腎組織MDA水平顯著上升，SOD和GSH-px水平顯著降低（P<0.05）.與NS組比較，NS+Ex組腎組織MDA水平顯著降低，SOD和GSH-px水平顯著上升（P<0.05）.

2.3? 大鼠腎臟炎癥反應指標的變化

由圖1（c）可見，與NC組比較，NS組大鼠腎組織IL-1β，IL-6和TNF-α水平顯著上升（P<0.05）.與NS組比較，NS+Ex組腎組織IL-1β，IL-6和TNF-α水平顯著降低（P<0.05）.

2.4? 大鼠腎組織α-SMA和KIM-1表達

由圖2（a）和（b）可見，與NC組比較，NS組大鼠腎組織α-SMA和KIM-1表達水平顯著上升（P<0.05）.與NS組比較，NS+Ex組腎組織α-SMA和KIM-1表達水平顯著降低（P<0.05）.

2.5? 大鼠腎組織Bax和Bcl-2蛋白表達

由圖2（c）和（d）可見，與NC組比較，NS組大鼠腎組織Bax蛋白表達顯著上升，Bcl-2蛋白表達顯著降低（P<0.05）.與NS組比較，NS+Ex組腎組織Bax蛋白表達顯著降低，Bcl-2蛋白表達顯著上升（P<0.05）.

2.6? 大鼠腎組織AMPK/NF-κB通路相關蛋白表達

就NF-κB通路相關蛋白而言，與NC組比較，NS組大鼠腎組織IκBα及p-IκBα蛋白表達顯著降低，NF-κB p65及p-NF-κB p65蛋白表達顯著上升（P<0.05）；與NS組比較，NS+Ex組腎組織IκBα及p-IκBα蛋白表達顯著上升，NF-κB p65及p-NF-κB p65蛋白表達顯著降低（P<0.05），見圖3（a）和（b）.就AMPK通路相關蛋白而言，與NC組比較，NS組大鼠腎組織p38，p-p38，JNK及p-JNK蛋白表達顯著上升，ERK1，p-ERK1，ERK2及p-ERK2蛋白表達顯著降低（P<0.05）.與NS組比較，NS+Ex組腎組織p38，p-p38，JNK及p-JNK蛋白表達顯著降低，ERK1，p-ERK1，ERK2及p-ERK2蛋白表達顯著上升（P<0.05），見圖4（a），（b）和（c）.

3? 討論

3.1? 游泳運動對尼古丁脅迫大鼠腎功能和腎損傷的影響

腎小球濾過率（eGFR）和血清肌酐（Scr）是早期腎損傷的可靠標志物，也可以作為腎小球病變的敏感指標.研究認為，尼古丁溶液灌胃可導致小鼠eGFR和Scr顯著上升，誘導腎小管功能異常、腎單位萎縮和腎小動脈硬化等癥狀［10］.血尿素氮

（BUN）是機體蛋白質代謝的終產物，長期吸煙人群BUN水平高于同齡非吸煙人群，BUN可作為腎損傷的早期診斷標準.肌成纖維細胞活化是腎纖維化和腎損傷發生的核心環節，

α-平滑肌肌動蛋白（α-SMA）和腎損傷分子1（KIM-1）的激活與轉化是成纖維細胞活化的主要來源，因而成為腎纖維化和腎損傷的診斷和治療靶點［11］.在本研究中，經腹腔注射尼古丁后，大鼠血清BUN，Scr和腎組織α-SMA，KIM-1水平顯著上升，說明本研究成功建立了尼古丁源性腎損傷模型.目前尚缺乏運動對尼古丁誘導腎損傷的干預研究，但部分間接證據顯示，運動干預可有效改善單側腎I/R、雷帕霉素、糖尿病等誘導的腎功能損傷［12］.有氧運動在慢性腎損傷康復領域被廣泛應用，Oliveira等［13］發現，有氧運動可有效減輕慶大霉素誘導的大鼠腎損傷并促進損傷后腎功能康復.Yang等［14］亦證實，4周有氧運動可通過改善eGFR、調節腎小球內壓、提高腎內蛋白產物排泄效率等方式減輕早期糖尿病腎損傷.在本研究中也發現了類似的現象，8周游泳運動干預后，尼古丁脅迫大鼠血BUN、Scr和腎組織α-SMA、KIM-1表達顯著降低，病理學檢查顯示，大鼠腎組織炎癥組織浸潤和微細結構損傷減輕，細胞形態及邊界組織趨于正常.

3.2? 游泳運動對尼古丁脅迫大鼠腎臟氧化應激和炎癥反應的影響

氧化應激和炎癥反應直接或間接參與多種與吸煙相關的疾病（動脈粥樣硬化、腎損傷和肝損傷等）和病理生理反應（巨噬細胞功能障礙、內皮屏障功能障礙、足細胞損傷和泛素介導的蛋白酶體加工）進展［15］.尼古丁或可替寧與腎組織炎癥浸潤、促炎細胞因子激活和NF-kB的活化直接相關，現階段的研究認為，尼古丁可能誘導巨噬細胞增殖促進炎性損傷和組織纖維化［16］.動物實驗證實，煙霧暴露大鼠腎組織NF-κB/I-κB蛋白復合物被廣泛降解，NF-κB迅速易位至腎細胞核，進而促進TNF-α，IL-1β和IL-6等炎癥因子活化；此外，Nrf2可通過結合ARE促進誘導型環氧化酶（COX）亞型COX-2表達上升［17］.有氧運動對多途徑誘發的氧化應激和炎癥反應具有抑制作用，8周游泳運動方案可有效激活慶大霉素誘導的AKI動物模型肝臟、骨骼肌和肝臟氧化應激標志物MDA，SOD水平，同時提高骨骼肌等多器官組織CAT活性［13］.就運動干預方案而言，無論AKI模型建立前預處理還是AKI恢復階段運動方案均對慶大霉素、糖尿病、高強度訓練誘導的腎氧化應激和炎癥反應具有抑制作用［18］.人體運動實驗證實，長期、規律有氧運動后，糖尿病腎病患者SOD和一氧化氮（NO）等抗氧化物活性被激活，抗氧化酶活性增強和氧化應激抑制表明運動可降低AKI向CKD進展風險［19］.本研究也發現，游泳運動可有效抑制尼古丁誘導的腎組織氧化應激和炎癥反應.一項針對順鉑類藥物誘導腎損傷模型的運動干預研究發現［20］，5周有氧運動可通過抑制KIM-1和Scr生成、抑制CD4+細胞活性和TNF-α水平，也有學者認為T細胞在急慢性腎損傷中發揮核心作用［21］.因此T細胞的調節效應可能是運動促進尼古丁源性腎損傷的核心機制，但其具體機制仍有待進一步研究.

3.3? 游泳運動對尼古丁脅迫大鼠腎臟細胞凋亡的影響

現階段，尚缺乏尼古丁脅迫對腎組織細胞凋亡影響的相關研究，但部分側面證據可能作為研究的輔證.有學者認為，高劑量尼古丁可通過抑制煙堿型乙酰膽堿受體（nAChR）受體而激活心肌組織凋亡程序［22］.B淋巴細胞瘤（Bcl）家族中的Bcl-2，Bax基因是目前已知的細胞凋亡中最重要的調控組分，可通過線粒體途徑介導NOD樣受體家族3（NLRP3）等物質釋放，通過其氧化應激效應或促進氧自由基生成激活細胞程序性死亡［23］.動物實驗結果顯示，糖尿病腎病、慶大霉素和順鉑誘導腎損傷模型大鼠腎組織Bax蛋白表達上升、Bcl-2蛋白表達降低［24］.Bax/Bcl-2比值失衡與腎組織炎癥反應激活密切相關，因此，外源性刺激誘導的腎組織細胞凋亡亢進可能介導了自身的炎癥激活效應.本研究發現，高劑量尼古丁可導致大鼠腎組織細胞凋亡激活，但與炎癥反應的聯系仍有待進一步研究.已經證實，有氧運動可以發揮損傷組織凋亡調控的作用，如Duan等［25］發現，游泳運動通過抑制腎間質纖維化和細胞凋亡減輕高血壓誘導的腎功能障礙.Hamano等［26］對順鉑順鉑誘導AKI大鼠進行運動干預發現，6周有氧運動可減輕順鉑對腎組織細胞凋亡的擾動.亦有部分研究證實，有氧運動可有效抑制煙霧刺激、低氧暴露誘導的肺組織凋亡反應.

3.4? 游泳運動對尼古丁脅迫大鼠腎組織AMPK/NF-κB信號通路的影響

腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）廣泛參與內質網應激、氧化應激、細胞凋亡和自噬等生理反應調控過程，活化的AMPK通過沉默因子Sir1（SIRT1）、叉頭框蛋白O（FOXO）、雷帕霉素靶蛋白（mTOR）、NF-κB等調節級聯信號抑制NO和ROS生物活性減輕氧化應激誘導的組織損傷［27］.生理條件下，核因子κB（NF-κB）的活化位點被細胞質中的IκB占據，但在炎癥刺激下IκB被廣泛磷酸化并隨后降解，NF-κB被轉移至細胞核并乙酰化，以激活包括促炎介質在內的多個靶基因的轉錄活性［28］.體外實驗證實了AMPK與NF-κB的調控關系，在骨髓中性粒細胞、星形膠質細胞和小膠質細胞原代培養物中激活AMPK，可有效抑制IκB激酶（IKKα/β）活性和IκB對促炎細胞因子的響應［29］.此外，AMPK缺陷小鼠胚胎成纖維細胞顯示，AMPK激活可能直接抑制NF-κB活性.介于急慢性腎損傷是一種細胞因子過量狀態，受MAPK（p38MAPK，JNK和ERK），AKT和AMPK等諸多信號通路的協同調控.課題組假設，尼古丁誘導的AMPK抑制和NF-κB激活可能與氧化應激、炎癥反應誘導的腎損傷有關.多項研究證實，運動可參與調控AMPK/NF-κB信號通路并減輕或促進組織損傷恢復［30］.張坦等［31］發現，游泳運動可通過激活AMPK/SIRT1/NF-κB信號通路抑制糖尿病小鼠骨骼肌炎癥因子表達，減輕糖尿病誘導的骨骼肌炎癥反應.朱洪竹等［32］亦證實了游泳運動對糖尿病腎病大鼠腎組織NF-κB-p65的抑制作用.本研究發現，游泳運動可以激活尼古丁脅迫大鼠腎組織AMPK通路，抑制NF-κB通路及相關蛋白表達.推測AMPK在游泳運動改善尼古丁脅迫大鼠腎損傷中的作用機制為通過激活自身活性進而抑制下游NF-κB通路，改善尼古丁脅迫條件下腎組織氧化應激和炎癥反應，發揮腎組織保護效應.

綜上所述，8周游泳運動可改善尼古丁脅迫大鼠腎功能，減輕腎組織氧化應激和炎癥反應，下調腎損傷標志物表達，抑制腎組織細胞凋亡和組織纖維化；游泳運動可能通過激活AMPK通路活性并抑制NF-κB通路活性，進而發揮腎組織保護作用.

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（責任編輯? 陸泉芳）