抗突變型瓜氨酸波形蛋白抗體對類風濕關節炎的診斷價值

張小云，潘勝男，連建春

南京醫科大學附屬淮安第一醫院檢驗科，江蘇淮安 223021

類風濕關節炎（rheumatoid arthritis，RA）是一種以慢性侵蝕性關節炎為主要特征的全身性自身免疫性疾病，致殘率高。研究表明，RA患者血液存在多種抗環瓜氨酸肽抗體（anti-cyclic citrullinated peptide antibody，抗CCP抗體）及免疫復合物，在自身免疫損害中發揮重要作用[1-3]。抗CCP抗體和抗突變型瓜氨酸波形蛋白抗體（anti-mutated citrullinated vimentin antibody，抗MCV抗體）是RA最為重要的自身抗體，對RA的診斷和預后評估具有重要意義。文獻報道25-羥維生素D[25-hydroxyvitamin D，25（OH）D]在人體內有免疫調節作用，自身免疫性疾病患者體內25（OH）D水平降低且與疾病活動性有關。本研究比較RA患者血清中抗CCP抗體、抗MCV抗體、25（OH）D水平并分析其與相關臨床重要指標之間的關系，研究抗CCP抗體、抗MCV抗體和25（OH）D在RA診斷及其活動性判斷中的價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2016年8月至2021年11月南京醫科大學附屬淮安第一醫院收治的466例RA患者納入RA組，其中男103例，女363例，年齡17～87歲，平均（57.61±13.34）歲。所有RA患者均符合美國風濕病學會/歐洲抗風濕病聯盟發布的RA診斷標準[2]：至少有一個關節腫痛和滑膜炎，X線檢查顯示典型的RA骨破壞改變；排除合并其他自身免疫性疾病、嚴重感染性疾病、器官功能衰竭或惡性腫瘤的患者。將同期住院的非RA的其他自身免疫性疾病及代謝性疾病患者100例納入非RA組，其中男22例，女78例；年齡18～83歲，平均（55.50±9.50）歲；全身性骨關節炎10例，系統性紅斑狼瘡50例，干燥綜合征10例，強直性脊柱炎10例，痛風20例，均符合國內外的相應診治標準。選取同期健康體檢者100人納入對照組，其中男22例，女78例；年齡17～78歲，平均（57.44±11.08）歲，均無自身免疫性疾病家族史。本研究經南京醫科大學附屬淮安第一醫院倫理委員會批準（倫理審批號：KY-2022-027-01），所有受試者均簽署知情同意書。

1.2 研究方法

分別抽取三組受試者的靜脈血約3ml，靜置30min后，離心分離血清，–80℃保存待測。魏氏法檢測紅細胞沉降率（erythrocyte sedimentation rate，ESR），免疫散射比濁法檢測C反應蛋白（C-reactive proten，CRP）、補體C3和C4；雙抗體夾心法檢測抗CCP抗體、抗MCV抗體；電化學發光法檢測25（OH）D；嚴格按照試劑說明書進行操作。

1.3 統計學方法

采用SPSS 23.0軟件對結果進行統計學分析。計量資料符合正態分布的采用均數±標準差（±s）表示，組間比較采用單因素方差分析；繪制受試者操作特征曲線分析抗CCP抗體、抗MCV抗體、25（OH）D診斷RA的效能；抗MCV抗體與各臨床指標的相關性采用Pearson相關性分析。P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 三組受試者的血清抗MCV抗體、抗CCP抗體和25（OH）D水平比較

RA組患者的血清抗MCV抗體和抗CCP抗體水平顯著高于非RA組和對照組（P<0.05）；RA組患者的血清25（OH）D水平顯著低于對照組（P<0.05），見表1。

表1 三組受試者的血清抗MCV抗體、抗CCP抗體和25（OH）D水平比較（±s）

表1 三組受試者的血清抗MCV抗體、抗CCP抗體和25（OH）D水平比較（±s）

注：與RA組比較，*P<0.05

組別 抗MCV抗體（U/ml）抗CCP抗體（RU/ml）25（OH）D（ng/ml）對照組（n=100） 18.08±2.46* 10.44±2.82* 31.89±4.22*非RA組（n=100）19.72±2.63* 15.53±3.52* 15.08±2.98 RA組（n=466） 538.20±46.22 583.60±40.37 15.53±3.94

2.2 抗CCP抗體、抗MCV抗體、25（OH）D及三者聯合對RA的診斷效能

抗CCP抗體、抗MCV抗體、25（OH）D診斷RA的曲線下面積（area under the curve，AUC）分別為0.74、0.81、0.75，三項聯合診斷RA的AUC為0.90，敏感度為83.70%，特異性為82.40%，見表2。

表2 抗CCP抗體、抗MCV抗體、25（OH）D及三項聯合對RA的診斷效能

2.3 RA患者的抗MCV抗體與各臨床指標的相關性分析

在RA患者中，抗MCV抗體與ESR、CRP均呈正相關，與補體C3、C4均呈負相關（P<0.05），見表3。

表3 RA患者的抗MCV抗體與各臨床指標的相關性分析

3 討論

RA是一種主要累及全身多個關節，特別是以小關節受累為特征的自身免疫性疾病，隨著疾病進展，可出現關節的畸形和活動受限，甚至出現多系統、多器官損害，嚴重影響患者的生活質量[4-5]。早期診斷RA的血清學指標主要為類風濕因子（rheumatoid factor，RF），RF雖然敏感度高，但特異性差。尋找新型RA相關抗體，有助于提高RA的診斷效率。2000年，人工合成環瓜氨酸肽成功，之后其被逐漸應用于RA的臨床診斷。同時，與RF聯合運用可大大提高不典型RA診斷的準確率，避免漏診[6-7]。目前，瓜氨酸相關自身抗體在RA診斷和預后評估中日益成為重要的血清指標。瓜氨酸相關自身抗體家族包括抗MCV抗體、抗核周因子、抗CCP抗體和抗角蛋白抗體等，其可在RA患者的滑液、滑膜細胞和血清中被檢測到。波形蛋白是一種細胞骨架蛋白。波形蛋白在凋亡的巨細胞內瓜氨酸化，改變蛋白結構，可進一步增加潛在的抗原決定簇[8]。抗CCP抗體和抗MCV抗體同屬抗瓜氨酸化蛋白抗體家族。CCP抗原決定簇可通過人工進行合成，而MCV抗原來源于天然物質；CCP分子相比波形蛋白分子小20倍，因此其抗原決定簇相對減少，僅1～2個潛在決定簇，而波形蛋白有45個可被瓜氨酸化的潛在抗原位點，故抗MCV抗體在臨床上具有較高的特異性和敏感度[9]。

近年來，抗MCV抗體作為RA診斷指標的研究越來越多。龔艷會等[10]研究顯示，檢測RA患者血清抗MCV抗體，其敏感度為71.60%，特異性為93.10%；蔡艷娟等[11]研究顯示抗MCV抗體診斷RA的敏感度和特異性分別為89.87%、91.21%，明顯高于RF；申旺等[12]研究顯示抗CCP抗體和抗MCV抗體診斷RA的敏感度分別為83.80%和91.40%，診斷RF陰性的RA的敏感度分別為65.20%和81.00%。本研究結果與既往研究結果接近。

25（OH）D作為維生素D的主要代謝形式，是評價體內維生素D的最佳指標。研究報道維生素D缺乏與自身免疫性疾病相關，RA患者血清25（OH）D水平明顯降低且與疾病活動性相關[13]。維生素D可抑制單核細胞向樹突狀細胞分化，從而減少可向T細胞提呈抗原的細胞數量，這在RA的發生發展中起重要作用。此外，維生素D抑制B細胞的成熟分化，抑制免疫球蛋白的產生，從而影響調節性免疫應答[14]。然而，也有研究發現部分RA患者血清25（OH）D水平升高。出現RA患者血清25（OH）D水平不一致的原因可能是由研究樣本量小及臨床癥狀的異質性引起的[15-17]。本研究結果顯示，RA患者的血清25（OH）D水平明顯低于健康人群，診斷RA的敏感度為48.80%，特異性為89.30%。

研究發現抗MCV抗體在RA患者中呈高表達，并與多項臨床指標呈正相關。Avdeeva等[18]研究發現抗MCV抗體與ESR、CRP呈正相關，抗MCV抗體陽性患者的關節疾病活動度評分高于抗體陰性的患者。Keskin等[19]研究發現RA患者的抗MCV抗體與ESR、CRP呈正相關。劉利君等[20]研究發現抗MCV抗體與ESR、CRP無明顯的相關性，但與X線顯示的骨質破壞相關。隨著X線分期的增高，抗MCV抗體水平呈現出增高趨勢，抗MCV抗體水平升高提示RA患者的骨破壞加重。申旺等[12]研究顯示抗MCV抗體水平在CRP>50mg/L、有關節腔積液的RA患者中明顯升高；在RA緩解組中，抗MCV抗體水平在治療3個月后明顯下降；在RA未緩解組中，治療前后的抗MCV抗體水平變化不大。但Innala等[21]研究顯示，RF、抗CCP抗體和抗MCV抗體均不能夠單獨反映RA的疾病活動性，但三者聯合可有效反映RA的疾病活動性。本研究顯示抗MCV抗體與RA疾病活動性指標ESR、CRP均呈正相關，與補體C3、C4均呈負相關。雖然目前關于抗MCV抗體與RA疾病活動性的相關性研究結果不一致，但大部分研究認為二者具有一定的相關性，提示抗MCV抗體檢測有利于對RA患者骨破壞情況、炎癥反應等臨床特征進行判斷，為臨床醫生診治RA患者提供幫助。

綜上，抗CCP抗體、抗MCV抗體和25（OH）D在RA患者中具有較高的敏感度和特異性，有助于RA患者的臨床診斷。抗MCV抗體有助于判斷疾病的活動性，可作為RA活動性的新型診斷指標。