GDM并胎膜早破孕婦腸道菌群變化及其與MCP-1和GRO-α表達的關系

［摘要］ 目的

探討妊娠期糖尿病（GDM）合并胎膜早破孕婦腸道菌群變化及其與外周血單核細胞趨化蛋白-1（MCP-1）和生長調節致癌基因-α（GRO-α）表達的關系。

方法 選取2020年1月—2023年11月在湖北醫藥學院附屬人民醫院就診的GDM合并胎膜早破孕婦162例為觀察組，同時選取單純GDM孕婦100例為對照A組，胎膜早破孕婦100例為對照B組，比較各組腸道菌群分布和外周血MCP-1與GRO-α表達差異，分析上述指標與觀察組妊娠結局的關系。

結果 觀察組孕婦腸球菌含量明顯高于對照A和B組，而乳桿菌和雙歧桿菌均明顯低于對照A和B組（F=12.212～30.595，P＜0.05）。觀察組外周血MCP-1和GRO-α表達均明顯高于對照A和B組（F=11.543、15.922，P＜0.05）。觀察組不良妊娠結局孕婦腸球菌含量明顯高于非不良妊娠結局者，而乳桿菌和雙歧桿菌含量則明顯低于非不良妊娠結局者（t=－8.804～8.736，P＜0.05）；觀察組不良妊娠結局孕婦外周血MCP-1和GRO-α表達均明顯高于非不良妊娠結局者（t=7.278、11.133，P＜0.05）。觀察組妊娠＜37周產婦腸球菌含量明顯高于妊娠≥37周者，而乳桿菌和雙歧桿菌含量則明顯低于妊娠≥37周者（t=－8.756～8.683，P＜0.05）；觀察組妊娠＜37周產婦外周血MCP-1和GRO-α表達均明顯高于≥37周者（t=5.832、12.612，P＜0.05）。腸球菌含量與MCP-1及GRO-α表達均呈正相關（r=0.334、0.365，P＜0.05）；乳桿菌、雙歧桿菌含量與MCP-1及GRO-α表達均呈負相關（r=－0.381～－0.337，P＜0.05）。

結論 GDM合并胎膜早破孕婦存在腸道菌群紊亂和炎癥反應，且在不良妊娠結局孕婦中表現更加明顯。腸道菌群變化與外周血MCP-1及GRO-α表達存在相關性。

［關鍵詞］ 糖尿病，妊娠；胎膜早破；胃腸道微生物組；趨化因子CCL2；白細胞介素8

［中圖分類號］ R714；R378.2

［文獻標志碼］ A

［文章編號］ 2096-5532（2024）05-0709-05

doi：10.11712/jms.2096-5532.2024.60.156

［網絡出版］ https：//link.cnki.net/urlid/37.1517.r.20241105.1030.006;2024-11-06 09：52：54

Changes in intestinal flora and their association with the expression of monocyte chemoattractant protein-1 and growth regulating oncogene-α in pregnant women with gestational diabetes mellitus complicated by premature rupture of membranes

WU Yingying， GAO Xia， LI Yan， GAO Ge， LIU Yi， CHENG Yangchun

（Department of Obstetrics， Renmin Hospital， Hubei University of Medicine， Shiyan 442000， China）

［Abstract］Objective To investigate the changes in intestinal flora and their association with the expression of monocyte chemoattractant protein-1 （MCP-1） and growth regulating oncogene-α （GRO-α） in peripheral blood in pregnant women with gestational diabetes mellitus （GDM） complicated by premature rupture of membranes.

Methods A total of 162 pregnant women with GDM complicated by premature rupture of membranes who attended Renmin Hospital， Hubei University of Medicine， from Ja-

nuary 2020 to November 2023 were enrolled as observation group， 100 pregnant women with simple GDM were enrolled as control group A， and 100 pregnant women with premature rupture of membranes were enrolled as control group B. The three groups were compared in terms of the distribution of intestinal flora and the expression of MCP-1 and GRO-α in peripheral blood， as well as their association with pregnancy outcome in the observation group.

Results Compared with the control groups A and B， the observation group had a significantly higher content of Enterococcus and significantly lower contents of Lactobacillus and Bifidobacterium （F=12.212-30.595，Plt;0.05）. The observation group had significantly higher expression levels of MCP-1 and GRO-α in peripheral blood than the control groups A and B （F=11.543，15.922;Plt;0.05）. As for the observation group， compared with the pregnant women with non-adverse pregnancy outcomes， the pregnant women with adverse pregnancy outcomes had a significantly higher content of Enterococcus and significantly lower contents of Lactobacillus and Bifidobacterium （t=-8.804 to 8.736，Plt;0.05）， as well as significantly higher expression levels of MCP-1 and GRO-α in peripheral blood （t=7.278，11.133;Plt;0.05）. As for the observation group， compared with the pregnant women with a gestational age of ≥37 weeks， the pregnant women with a gestational age of lt;37 weeks had a significantly higher content of Enterococcus and significantly lower contents of Lactobacillus and Bifidobacterium （t=-8.756 to 8.683，Plt;0.05）， as well as signifi-cantly higher expression levels of MCP-1 and GRO-α in peripheral blood （t=5.832，12.612;Plt;0.05）. The content of Enterococcus was positively correlated with the expression levels of MCP-1 and GRO-α （r=0.334，0.365;Plt;0.05）， and the contents of Lactobacillus and Bifidobacterium were negatively correlated with the expression levels of MCP-1 and GRO-α （r=-0.381 to -0.337，Plt;0.05）.

Conclusion Pregnant women with GDM and premature rupture of membranes have intestinal flora disturbance and inflammatory response， which are more obvious in pregnant women with adverse pregnancy outcomes. The changes in intestinal flora are correlated with the expression levels of MCP-1 and GRO-α in peripheral blood.

［Key words］ diabetes， gestational; fetal membranes， premature rupture; gastrointestinal microbiome; chemokine CCL2; interleukin-8

妊娠期糖尿病（GDM）是妊娠期常見代謝性疾病，該病嚴重威脅母嬰健康［1-2］。胎膜早破是指妊娠中晚期胎膜在臨產前自然破裂［3］。兩者合并發生可增加不良妊娠結局風險，如早產、宮內感染及圍產兒死亡率升高等［4-5］。單核細胞趨化蛋白-1（MCP-1）和生長調節致癌基因-α（GRO-α）在GDM及胎膜早破的發病過程中扮演著重要角色［6-7］。研究認為，腸道菌群是影響宿主新陳代謝的重要因素，腸道菌群對免疫調節、營養物質代謝及維生素合成過程等有調節作用［8-9］。但是，關于腸道微生物與GDM合并胎膜早破發生的關系尚少有研究報道。本研究探討GDM合并胎膜早破孕婦腸道菌群變化及其與外周血MCP-1和GRO-α表達關系，旨在為揭示GDM合并胎膜早破的復雜病理機制提供新見解。

1 資料與方法

1.1 研究對象

按照納入和排除標準，選取2020年1月—2023年11月在湖北醫藥學院附屬人民醫院產科就診的GDM合并胎膜早破孕婦162例為觀察組，同時選取單純GDM孕婦100例為對照A組、血糖正常的胎膜早破孕婦100例為對照B組。3組孕婦除了對照B組空腹血糖明顯低于另兩組外（χ2=6.544，P＜0.05），其他一般資料相比較差異均無統計學意義（P＞0.05），具有可比性。見表1。納入標準：①GDM診斷符合《妊娠合并糖尿病診治指南》中的標準［10］，胎膜早破診斷符合《胎膜早破的診斷與處理指南》中的標準［11］；②單胎妊娠；③孕婦及家屬知情同意。排除標準：①合并其他妊娠并發癥；②非正常受孕者；③合并有甲狀腺疾病、惡性腫瘤、血液系統疾病等其他嚴重疾病。本研究經醫院倫理委員會批準（2020倫第007號）。

1.2 研究方法

1.2.1 炎癥因子檢測 采集所有受試者空腹靜脈血4 mL，以3 000 r/min離心10 min取血清，用酶聯免疫吸附法分別檢測C反應蛋白（CRP）、MCP-1和GRO-α。試劑盒由美國R＆D Systems 公司提供，檢測步驟均按照試劑盒說明書操作。使用羅氏Accu-Chek Performa型血糖儀以電化學法檢測血糖濃度，分為＜8.0 mmol/L組及≥8.0 mmol/L組。

1.2.2 腸道菌群檢測 收集所有受試對象每人20 g新鮮糞便于無菌容器中，并用生理鹽水稀釋10倍。取50 μL懸濁液接種于培養液，于37 ℃、含體積分數0.05 CO2條件下培養48 h。使用VITEK2 COMPACT細菌鑒定儀進行細菌檢測。然后，利用Icount 11自動計數儀確定菌落數并計算細菌含量。細菌含量=平均菌落數×稀釋倍數×500。

1.3 統計學方法

采用SPSS 22.0軟件進行統計學處理。計量資料數據采用±s表示，兩組均數比較采用獨立樣本t檢驗，多組均數比較采用方差分析檢驗。計數資料數據以例數和百分數表示，組間比較采用χ2檢驗。相關性采用Pearson相關分析。以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結" 果

2.1 各組孕婦腸道菌群分布和炎癥因子比較

腸道菌群檢測結果表明，觀察組孕婦腸球菌含量明顯高于對照A和B組，而乳桿菌和雙歧桿菌則明顯低于對照A和B組（F=12.212～30.595，P＜0.05）；各組大腸埃希菌、變形桿菌和葡萄球菌等含量比較差異無統計學意義（P＞0.05）。觀察組外周血MCP-1和GRO-α表達均明顯高于對照A和B組（F=11.543、15.922，P＜0.05）；各組CRP比較差異無統計學意義（P＞0.05）。提示GDM合并胎膜早破孕婦存在腸道菌群紊亂和炎癥反應。見表2。

2.2 觀察組妊娠結局對腸道菌群和炎癥因子影響

將絨毛膜羊膜炎、產褥感染、胎兒窘迫、新生兒肺炎和新生兒病理性黃疸等作為不良妊娠結局，觀察組中不良妊娠結局孕婦104例、非不良妊娠結局者58例。觀察組不良妊娠結局孕婦腸球菌含量明顯高于非不良妊娠結局者，而乳桿菌和雙歧桿菌則明顯低于后者（t=－8.804～8.736，P＜0.05）；觀察組不良妊娠結局和非不良妊娠結局孕婦大腸埃希菌、變形桿菌和葡萄球菌含量比較差異無統計學意義（P＞0.05）。觀察組不良妊娠結局孕婦外周血MCP-1和GRO-α表達明顯高于非不良妊娠結局者（t=7.278、11.133，P＜0.05）。提示妊娠結局對GDM合并胎膜早破孕婦腸道菌群紊亂和炎癥反應有顯著影響。見表3。

2.3 觀察組分娩時間及血糖對腸道菌群和炎癥因子影響

觀察組妊娠＜37周產婦腸球菌含量明顯高于妊娠≥37周者，而乳桿菌和雙歧桿菌則明顯低于妊娠≥37周者（t=－8.756～8.683，P＜0.05）。觀察組妊娠＜37周產婦外周血MCP-1和GRO-α表達明顯高于≥37周者（t=5.832、12.612，P＜0.05）。觀察組的不同血糖濃度產婦腸道菌群分布和MCP-1、GRO-α及CRP表達比較，差異均無統計學意義（P＞0.05）。提示終止妊娠時間對GDM合并胎膜早破產婦腸道菌群紊亂和炎癥反應有顯著影響，而不同血糖濃度則對其無明顯影響。見表4、5。

2.4 觀察組腸道菌群分布與炎癥因子及血糖濃度相關性

將觀察組孕婦腸道菌群分布與外周血MCP-1、GRO-α和CRP表達以及空腹血糖進行Pearson相關性分析的結果顯示，腸球菌與MCP-1和GRO-α

表達呈顯著正相關（r=0.334、0.365，P＜0.05）；乳桿菌、雙歧桿菌與MCP-1和GRO-α均呈顯著負相關（r=－0.381～－0.337，P＜0.05）；腸道菌群分布與CRP和空腹血糖無顯著相關性（P＜0.05）。提示GDM合并胎膜早破孕婦腸道菌群紊亂和炎癥反應顯著相關。見表6。

3 討" 論

GDM孕婦的胎盤氧化應激和炎癥反應可損害胎盤結構和功能，引起胎膜早破［12-13］。本研究旨在分析GDM合并胎膜早破孕婦腸道菌群變化及其與外周血MCP-1和GRO-α表達的關系。本文研究結果表明，觀察組的腸球菌含量顯著高于對照A組和B組，而乳桿菌和雙歧桿菌的含量則明顯低于這兩個對照組。提示GDM合并胎膜早破孕婦腸道微生態顯著失衡。GDM的高糖血癥為腸球菌等條件致病菌提供了豐富的營養和良好的生長條件，促進其過度增殖，破壞腸道菌群的平衡。同時，高糖血癥還能抑制有益菌的生長和活性［14-15］。胎膜早破伴隨的感染可進一步加劇腸道微生態的失衡［16-17］。還有研究表明，糖尿病、尿毒癥等疾病狀態下腸道菌群會發生顯著變化［18-20］。本文研究結果提示，GDM合并胎膜早破孕婦腸球菌的增多與乳桿菌及雙歧桿菌的減少顯著相關，這豐富了以往研究的結論。

MCP-1與GRO-α在多種炎癥及免疫疾病中發揮重要作用［21-22］。本文研究結果表明，觀察組外周血MCP-1和GRO-α表達水平顯著高于對照A和B組，且二者在觀察組的不同妊娠結局產婦間也存在差異。MCP-1和GRO-α高水平表達通常與炎癥反應的激活和增強相關，GDM合并胎膜早破可導致孕婦體內炎癥反應的加劇，并與胎膜早破發病及其妊娠結局有關。已有研究表明，MCP-1可在胎盤、絨毛膜、蛻膜等組織中表達［23-24］，絨毛膜-蛻膜界面的破裂可導致MCP-1進入循環中［25-26］。結合本研究結果分析，MCP-1表達增加會刺激巨噬細胞活化，進而增加宮腔壓力及減弱胎膜的張力，導致胎膜

早破。已有研究顯示，GRO-α異常升高會增強炎癥級聯反應，刺激胎盤巨噬細胞產生更多的白細胞介素-1β和腫瘤壞死因子-α，增大胎膜早破的發生風險［27-28］。本研究同時設立了單純GDM和單純胎膜早破的對照組，從而更準確地揭示了GDM合并胎膜早破時的特異性變化。本文進一步研究顯示，觀察組不良妊娠結局產婦與非不良妊娠結局者CRP表達差異無顯著性。因此，僅通過CRP來評估不良妊娠結局可能不夠準確。

本文研究結果還顯示，觀察組妊娠＜37周產婦腸球菌含量明顯高于妊娠≥37周者，前者乳桿菌和雙歧桿菌則明顯低于后者；觀察組妊娠＜37周產婦外周血MCP-1和GRO-α表達明顯高于妊娠≥37周者。這些結果共同說明早產可能與腸道菌群失衡以及炎癥反應增強之間存在潛在聯系。但是，本研究由于樣本量不足或分組不夠細致，觀察組內不同血糖濃度孕婦的腸道菌群分布和炎性因子表達比較差異不顯著。

本文進一步研究顯示，腸球菌含量與MCP-1和GRO-α表達呈正相關，乳桿菌和雙歧桿菌含量與MCP-1和GRO-a表達呈負相關。其機制可能為病原微生物通過激活MCP-1和GRO-α引起炎癥反應，從而參與胎膜早破的發生發展，導致不良菌群大量繁殖，誘導炎癥細胞與細菌蛋白酶的相互作用，造成胎膜張力下降，誘發胎膜早破［29］。提示可以通過調節腸道菌群分布干預GDM合并胎膜早破的發生和進展，為臨床制定治療方案提供依據。

綜上所述，GDM合并胎膜早破孕婦腸道菌群存在紊亂，外周血MCP-1和GRO-α表達明顯升高，且在不良妊娠結局孕婦中更加明顯，腸道菌群變化與外周血MCP-1和GRO-α表達存在相關性。本文研究結果可為臨床對該病的干預提供依據。然而，本文尚有很多不足之處，本研究為回顧性研究，樣本來源單一而且樣本量小，研究結果可能存在一定偏倚，今后尚需進行多中心、大樣本研究來進一步驗證本文結論。

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（本文編輯 于國藝）

［收稿日期］2024-04-16; ［修訂日期］2024-08-30

［基金項目］湖北省衛生健康委面上項目（WJ2019M049）

［第一作者］吳瑩瑩（1993-），女，主管護師。

［通信作者］程楊春（1986-），女，主管護師。E-mail：48781-004@qq.com。