高遷移率族蛋白B1在炎癥誘導早期自然流產中的病理機制研究

【摘要】目的 探討高遷移率族蛋白B1（HMGB1）表達在炎癥因子誘導發生早期流產中的病理機制，為臨床提供參考。方法 選取2021年8月至2022年12月珠海市婦幼保健院收治的40例早期自然流產者作為研究組，另選取珠海市婦幼保健院同期40例選擇手術終止妊娠者為對照組進行回顧性分析。采集兩組研究對象的胎盤組織，比較兩組研究對象胎盤組織中腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、白細胞介素-1（IL-1）、白細胞介素-6（IL-6）水平及HMGB1表達情況，分析血清TNF-α、IL-1及IL-6與HMGB1表達的相關性。結果 研究組研究對象胎盤組織TNF-α、IL-1、IL-6水平及HMGB1表達水平高于對照組（Plt;0.05）。研究組研究對象人絨毛組織塊中TNF-α、IL-1及IL-6水平高于對照組（Plt;0.05）。研究組研究對象人絨毛滋養細胞平均每cm2血管形成數量多于對照組（Plt;0.05）。相關性分析顯示TNF-α、IL-1及IL-6水平與HMGB1表達呈正相關（Plt;0.05）。結論 早期自然流產者的機體炎癥因子及HMGB1表達水平較高，且與HMGB1表達呈正相關，屬于早期自然流產的重要病理基礎。

【關鍵詞】高遷移率族蛋白 B1；炎癥因子；早期自然流產；相關性

【中圖分類號】R714.21 【文獻標識碼】A 【文章編號】2096-2665.2023.15.0008.04

DOI：10.3969/j.issn.2096-2665.2023.15.003

Study on pathological mechanism of high mobility group protein B1 in early spontaneous abortion induced by inflammation

FENG Jiacheng CHEN Yongmei HUANG Yuanping CHEN Hailing

（1.Department of Pathology， Zhuhai Center For Maternal and Child Health Care; 2. Department of Obstetrics， Zhuhai Center For Maternal and Child Health Care， Zhuhai， 519000， Guangdong， China）

【Abstract】 Objective To explore the pathological mechanism of high mobility group protein B1 （HMGB1） expression in early spontaneous abortion induced by inflammatory factors， and to provide clinical reference. Methods 40 cases of early spontaneous abortion admitted to Zhuhai Center For Maternal and Child Health Care from August 2021 to December 2022 were selected as the study group， and 40 cases of surgical termination of pregnancy were selected as the control group for retrospective analysis. The placental tissues of the two groups were collected， and the expressions of tumor necrosis factor-α （TNF-α）， interleukin-1 （IL-1）， interleukin-6 （IL-6） and HMGB1 in the placental tissues of the two groups were compared， and the correlation between TNF-α， IL-1， IL-6 and HMGB1 expression was analyzed. Results The levels of TNF-α， IL-1， IL-6 and HMGB1" in placental tissues of the study group were higher than those in the control group （Plt;0.05）. The levels of TNF-α， IL-1 and IL-6 in human villus tissue blocks in the study group were higher than those in the control group （Plt;0.05）. The average number of blood vessel formation per cm2 in human villus tissue blocks in the study group was higher than that in the control group （Plt;0.05）. Correlation analysis showed a positive correlation of TNF- α， IL-1 and IL-6 levels with HMGB1 expression （Plt;0.05）. Conclusion The expression levels of inflammatory factors and HMGB1" in early spontaneous abortion are higher， and are positively correlated with the expression of HMGB1 ， which is an important pathological basis of early spontaneous abortion.

【Keywords】High mobility group protein B1; Inflammation factor; Early spontaneous abortion; Correlation

自然因素導致的流產稱為自然流產，其中孕周12周以內的自然流產屬于早期自然流產，病因涉及遺傳、內分泌及免疫反應等[1]。早期自然流產會給患者造成巨大的身心傷害，研究自然流產病理機制及尋找合理干預方式對保障產婦生理及心理健康有重要意義[2]。近年研究顯示，正常生殖過程中，母體可抵御外界微生物入侵引起的損傷情況，也可避免存在異源遺傳物質胚胎出現的免疫排斥反應，使胎兒能夠正常生長發育[3]。炎癥誘導生殖道感染是導致早期自然流產的關鍵因素，伴生殖道感染的妊娠女性較容易發生流產，并且大多數存在早期自然流產情況，這為炎癥誘導自然流產的病理研究奠定了基礎。為深入研究早期自然流產的病理機制，后續發現了高遷移率族蛋白B1（HMGB1）這一炎癥因子對于誘導流產具有一定作用，然而具體的病理機制尚不明確[4]。本研究以早期流產者為研究對象，明確炎癥因子與HMGB1的相關性，并分析HMGB1表達在早期自然流產發病中的作用，研究其病理機制，從而為疾病防治提供新思路，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2021年8月至2022年12月珠海市婦幼保健院收治的40例早期自然流產者作為研究組，另選取珠海市婦幼保健院同期40例非意愿妊娠而需手術終止妊娠者為對照組進行回顧性分析。研究組研究對象年齡19～46歲，平均年齡（33.12±1.26）歲；BMI 18～27 kg/m²，平均BMI（22.04±1.26）kg/m²。對照組研究對象年齡19～42歲，平均年齡（32.75±1.31）歲；BMI 18～27 kg/m²，平均BMI（21.75±1.24）kg/m²。兩組研究對象一般資料比較，差異無統計學意義（Pgt;0.05），組間具有可比性。本研究經珠海市婦幼保健院醫學倫理委員會批準。納入標準：①研究組研究對象符合《自然流產診治中國專家共識（2020年版）》[5]中的早期自然流產的診斷標準及手術指征；②孕周≤12周；③無生殖器官結構異常；④絨毛組織染色體結構正常。排除標準：①復發性自然流產者；②合并自身免疫性疾病及內分泌紊亂疾病者；③合并內科及婦科等疾病者。

1.2 研究方法 均在兩組研究對象流產后采集胎盤組織，并收集盡可能新鮮的白色胚胎絨毛組織，裝入無菌采集袋后即刻送檢。

1.3 觀察指標 ①比較兩組研究對象胎盤組織中腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、白細胞介素-1（IL-1）、白細胞介素-6（IL-6）水平及HMGB1表達情況。應用酶聯免疫吸附法（ELISA）測定組織標本的TNF-α、IL-1及IL-6水平，采取免疫印跡實驗（Western Blot）測定組織標本的HMGB1表達情況。②比較兩組研究對象人絨毛組織塊中TNF-α、IL-1及IL-6水平。體外培養人絨毛組織塊，建立絨毛組織培養模型，采取ELISA測定培養液中炎癥因子TNF-α、IL-1及IL-6水平。③比較兩組研究對象人絨毛滋養細胞HMGB1表達情況。體外培養人絨毛滋養細胞，采取Western Blot法測定HMGB1表達情況，每cm2血管形成數量越多表示HMGB1表達越高。④分析胎盤組織中TNF-α、IL-1及IL-6水平與HMGB1表達的相關性。

1.4 統計學分析 采用SPSS 22.0統計學軟件分析數據。計量資料以（x）表示，組間比較采用獨立樣本t檢驗。采用Spearman相關系數進行相關性分析。以Plt;0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組研究對象胎盤組織中TNF-α、IL-1、IL-6水平及HMGB1表達情況比較 研究組研究對象胎盤組織TNF-α、IL-1、IL-6水平及HMGB1表達水平高于對照組，差異有統計學意義（Plt;0.05），見表1。

2.2 兩組研究對象人絨毛組織塊中TNF-α、IL-1及IL-6水平比較 研究組研究對象人絨毛組織塊中TNF-α、IL-1及IL-6水平高于對照組，差異有統計學意義（Plt;0.05），見表2。

2.3 兩組研究對象人絨毛滋養細胞HMGB1表達情況比較 研究組研究對象平均每cm2血管形成數量為（11.25±1.25）個，對照組研究對象平均每cm2血管形成數量為（7.45±1.31）個，研究組研究對象人絨毛滋養細胞平均每cm2血管形成數量多于對照組，差異有統計學意義（t=18.346，Plt;0.05），見圖1。

2.4 胎盤組織中TNF-α、IL-1及IL-6水平與HMGB1表達的相關性分析 相關性分析顯示，TNF-α、IL-1及IL-6水平與HMGB1表達呈正相關（Plt;0.05），見表3。

3 討論

隨著社會經濟的快速發展，人們的生活及工作壓力越來越大，這使早期自然流產發生率也逐漸增加，嚴重影響女性的身體健康[6-7]。關于自然流產發生機制，研究認為炎癥反應與流產病理機制存在聯系，主要表現為自然流產者的血清IL-6、TNF-α等檢測指標水平高于正常妊娠女性，但也有部分的流產者存在相關炎癥因子無明顯改變的情況，這樣難以明確炎癥同自然流產的關聯[8]。

而通過進一步的研究發現，在自然流產者炎癥因子中HMGB1可見表達增高情況，且在人體胎盤組織中顯示HMGB1有一定表達，而其中先兆子癇或者早產者也可見HMGB1表達水平的升高[9-10]。本研究結果顯示，研究組研究對象胎盤組織、人絨毛組織塊中TNF-α、IL-1、IL-6水平及HMGB1表達水平高于對照組，且人絨毛滋養細胞平均每cm2血管形成數量多于對照組，這表明對于早期流產者，可出現HMGB1表達的升高。原因主要是早期自然流產女性廣泛存在滋養細胞基質金屬蛋白酶水平的異常，引起滋養細胞浸潤能力的降低，繼而引發流產情況[11]。對于處在正常分娩期的女性，胎盤組織及血液中均存在HMGB1的表達，早期自然流產者表達水平增加，同時HMGB1在炎癥反應、細胞遷移及細胞分化等的過程發揮重要作用，提示HMGB1可能參與早期自然流產發生過程[12]。而TNF-α、IL-1及IL-6等炎癥因子在研究組中呈現高表達情況，提示上述指標的異常增高可導致自然流產的發生[13]。TNF-α、IL-1及IL-6在流產者外周血中及子宮內膜組織中出現不協調表達情況，而以上炎癥因子作用情況存在一些差異性。

妊娠作為女性重要的生理過程，等同于半同體異體移植過程，在妊娠過程中，母體內胚胎界面存在的免疫細胞、細胞因子構成免疫耐受環境，在這一環境中胎兒免受母體免疫系統排斥反應及免疫攻擊行為，保證生長及供應相關營養物質[14]。本研究相關性分析顯示，胎盤組織TNF-α、IL-1及IL-6水平與HMGB1表達呈正相關，提示HMGB1與炎癥誘導因子表達引發病變相關。早期自然流產的群體，外周血或者胎盤組織HMGB1激活免疫炎癥反應，引起機體免疫失衡情況，因而通過合理方式阻斷HMGB1表達可較好地緩解炎癥及控制患者病情[15]。而當外界干擾或者微生物感染時，HMGB1會在適當條件下被激活，這樣也可進一步釋放至細胞外，進行相關受體的結合，誘導炎癥因子如TNF-α、IL-1及IL-6的產生，而這些炎癥因子反過來刺激使HMGB1釋放，放大炎癥反應[16-17]。

綜上所述，早期自然流產者外周血中的TNF-α、IL-1、IL-6及HMGB1呈現出高表達的情況，并且炎癥因子與HMGB1也存在一定的關聯性，通過早期阻斷HMGB1及炎癥因子對于早期自然流產發生具有一定預防作用。

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