氣相色譜-三重四極桿串聯質譜法測定食藥同源物質中10 種農藥殘留

張秋萍，王春民，吳春霞，姚雪漫

（蘇州市疾病預防控制中心，江蘇 蘇州 215004）

鐵皮石斛、靈芝、黃芪等是人們生活中常用的中藥之一，屬于藥食同源類物質。鐵皮石斛具有增強機能、提高免疫等功效，靈芝則補益安神。近年保健品產業蓬勃發展，鐵皮石斛、靈芝除了傳統藥用，在保健方面也呈現出優越的抗氧化、抗衰老、補氣養血等功效[1-2]。隨著需求量的增大，人們為了控制病蟲害、提高產量，施用了多種農藥。不規范的農藥使用方式會對食品和藥品的質量產生負面影響。因此，建立高效、快速、準確的多種類高通量方法對于藥食同源物質中農藥殘留的測定具有重要意義[3-4]。

常用的農藥殘留測定方法有生物傳感器法、酶聯免疫法、氣相色譜法、液相色譜法以及色譜質譜聯用法等[5-6]。目前，常規農藥殘留檢測方法需要使用單組分標準品進行質譜參數的逐一調諧和選擇，導致檢測成本高、工作量大。氣相色譜的保留指數原理很好地解決了這個問題，可以大大提高工作效率[7-9]。因此，為了實現高效、準確、有機溶劑用量少的檢測目標，本文運用保留指數原理，結合QuEChERS 前處理方法，建立了食藥同源樣品中多品種農藥殘留的氣相色譜-三重四極桿串聯質譜測定方法。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

10 種農藥標準品：丙環唑、甲拌磷、毒死蜱、三唑磷、氯氟氰菊酯、腐霉利、苯醚甲環唑、五氯硝基苯、三唑酮和氧樂果（1 000 μg·mL-1），壇墨質檢科技股份有限公司，臨用時用乙酸乙酯配成10 mg·L-1混合標準儲備液；內標溶液：甲醇中環氧七氯B（1 000 μg·mL-1），臨用時用乙酸乙酯稀釋至5 mg·L-1作為內標使用液；C7～C40正構烷烴混標（1 000 μg·mL-1）；乙腈，色譜純，德國Meker 公司；乙酸乙酯，色譜純，德國Meker 公司；正己烷，色譜純，德國Meker 公司；QuEChERS 提取鹽包（4 g 硫酸鎂、1 g 氯化鈉、1 g 檸檬酸鈉、0.5 g 檸檬酸氫二鈉）；QuEChERS 凈化包（885 mg 硫酸鎂、150 mg PSA、15 mg GCB）；陶瓷均質子，CNW 公司。

1.2 儀器與設備

氣相色譜-串聯質譜儀（GCMS-TQ8040，Shimadzu公司）；臺式離心機（ThermoFisher 公司）；水平振蕩器（KB5010，海門市貝爾儀器制造有限公司）；自動氮吹濃縮儀（瑞科公司）；電子分析天平（AX204，Mettler 公司）；純水系統（Millipore 公司）。

1.3 實驗方法

1.3.1 樣品前處理

將鐵皮石斛、靈芝、黃芪分別粉碎，取50 mL 離心管分別加入一份QuEChERS 提取鹽包。分別稱取5.0 g粉碎均勻的樣品放入上述離心管中，加入10 mL 乙腈、1 顆陶瓷均質子，蓋上離心管蓋，渦旋分散后，將離心管置于水平振蕩器振蕩30 min。振蕩后以10 000 r·min-1離心5 min；吸取6 mL 上清液至15 mL離心管中，加入QuEChERS 凈化鹽包，渦旋分散后，振蕩30 min，5 000 r·min-1離心5 min，準確吸取2 mL上清液置于10 mL 玻璃試管，采用氮吹儀吹至近干，用乙酸乙酯渦旋溶解后定容至1 mL。吸取20 μL 環氧七氯B（5 mg·L-1）內標溶液加入上述溶液中，渦旋2 min，轉移至微量離心管中，以10 000 r·min-1離心5 min，吸取上清液轉移至進樣瓶。

1.3.2 儀器條件

（1）色譜條件。Rtx-5MS 色譜柱（30 m×0.25 mm，0.25 μm）；載氣：氦氣；不分流進樣；柱流量：1.0 mL·min-1；進樣量：1.0 μL；進樣口溫度：280 ℃。程序升溫條件：初始溫度50 ℃，保持1 min；以40 ℃·min-1升溫至120 ℃，保持1 min；以5 ℃·min-1升溫至240 ℃，保持1 min；以12 ℃·min-1升溫至300 ℃，保持7 min。

（2）質譜條件。離子源模式：EI 源；離子化能量：70 eV；接口溫度：280 ℃；離子源溫度240 ℃；溶劑延遲時間：3 min。

1.3.3 標準溶液配制

用乙酸乙酯將10 mg·L-1標準儲備液配制濃度為0.025 mg·L-1、0.050 mg·L-1、0.100 mg·L-1、0.250 mg·L-1、0.500 mg·L-1和1.00 mg·L-1的混合系列標準溶液。分別吸取1 mL 標準系列溶液，加入20 μL 內標儲備液，使每個標準系列內標濃度為0.100 mg·L-1。

2 結果與分析

2.1 氣質聯用法建立

選用正構烷烴標準溶液C7～C40，進樣濃度為5 μg·mL-1，識別C7～C40各個峰，并導入數據庫中，系統將自動計算并生成包含目標化合物的方法文件。選用1.3.3 項混合標準溶液曲線點250 μg·L-1，按方法進行檢測。結果顯示，10 種農藥殘留的實測保留時間和軟件給定的保留時間基本吻合，時間差均小于0.05 min。10 種農藥殘留方法參數及保留時間見表1。

表1 10 種農藥質譜參數、保留時間表

2.2 樣品前處理方法選擇

根據文獻報道，食品及中草藥中農藥殘留提取及凈化方法主要有液液萃取、快速溶劑萃取、固相萃取法以及色譜凝膠等，這些前處理方法具有操作復雜、有機溶劑用量大、成本高、不利于人體健康以及污染環境等不足[10]。隨著各項吸附材料的研發，QuEChERS 法被逐漸運用到農藥殘留前處理中。該方法使用商業化的試劑包提取樣品，然后將一部分清液用凈化包處理，最后直接上樣分析。QuEChERS 具有方便快捷、經濟實用、使用的有機試劑較少等優點，同時還具有環保高效的特點，能夠簡化實驗流程，提高工作效率，可滿足日常農藥殘留殘檢測中的檢出限、重復性、回收率等相關技術要求。

2.3 線性范圍和定量限

按照上文建立的方法對10 種農藥殘留進行定量分析，結果顯示在0.025～1.000 mg·L-1，10 種農藥的線性關系均良好，相關系數（R2）大于0.997。本方法檢出限采用3 倍信噪比（S/N≥3）計算，為0.001～0.002 mg·kg-1；方法的定量限采用10 倍信噪比（S/N≥10）計算，為0.002 5～0.006 0 mg·kg-1，可滿足樣品中農藥殘留檢測的要求。詳見表2。

表2 10 種農藥相關系數、檢出限、定量限、回收率及相對標準偏差表（n=6）

2.4 準確度

將3個水平標準溶液50 μg·L-1、100 μg·L-1、500 μ·L-1添加到空白樣品中進行加標回收率實驗。如表2 所示，50 μg·L-1、100 μg·L-1、500 μ·L-13 個加標水平對應的回收率分別為87.5%～109.3%、91.3%～108.2%、91.2%～108.5%，相對標準偏差分別1.05%～6.35%、0.85%～6.28%、0.62%～5.68%，表明該方法的準確度能夠滿足農藥檢測需求。

2.5 樣品測定

分別于藥店、超市、網購不同渠道采購鐵皮石斛、靈芝、黃芪樣品，共10 份，按照1.3.1 項方法處理，然后使用本文建立的方法進行上機測試。其中5 份鐵皮石斛樣品中檢出苯醚甲環唑，含量在0.293～0.598 mg·kg-1，未超過《食品安全國家標準 食品中農藥最大殘留限量》（GB 2763—2021）中規定藥用植物鐵皮石斛（干基）中苯醚甲環唑的最大殘留限量（2 mg·kg-1）。樣品測定結果見表3。

表3 樣品中農藥殘留檢測結果表 單位：mg·kg-1

3 結論

本文結合氣相色譜保留指數法和QuEChERS 前處理方法，成功建立了采用氣相色譜-三重四極桿質譜聯用法測定藥食同源物質中10種農藥殘留的分析方法。該方法準確度高，精密度良好，操作簡便，重復性好，非常適用于食藥同源樣品中農藥殘留的測定。