高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測定草莓中4 種苯甲酰脲類農(nóng)藥殘留

王 妙，王秀麗，鄶 鵬，王振東

（威海市食品藥品檢驗檢測研究院，山東 威海 264210）

草莓是世界上用量最大的漿果之一，它富含氨基酸、維生素等多種營養(yǎng)物質(zhì)，其中含有的多酚類物質(zhì)不僅對人體生長發(fā)育有良好的促進作用[1-2]，還能起到消炎和抑制癌細胞生長的作用[3-4]。由于草莓以大棚種植為主，高溫高濕的大棚環(huán)境極易滋生病菌而使其受到害蟲侵害。為保證草莓的品質(zhì)和成果率，種植戶會在草莓種植過程中使用多種農(nóng)藥，導致草莓中農(nóng)藥殘留檢出種類繁多[5-6]，因此需要建立一種簡便快速的檢測方法，以便相關(guān)部門對草莓進行安全監(jiān)管。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

本地市場采購的甜寶草莓；乙腈，色譜純，賽默飛世爾科技（中國）有限公司；硫酸鎂（無水）、氯化鈉，均為分析純，天津市致遠化學試劑有限公司；氟苯脲、氟蟲脲、除蟲脲、滅幼脲，濃度均為100 μg·mL-1，TMstandard。

1.2 儀器與設(shè)備

Qtrap 6500 液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀，美國AB SCIEX；V4DS025 旋渦振蕩器，德國IKA 有限公司；G-16C 高速冷凍離心機、SQP PRACTUMl102-1CN 分析天平（感量0.01 g）、SQP QUINTIX224-1CN分析天平（感量0.000 1 g），均購自德國賽得利斯有限公司；MB550 組織搗碎機，德國WIGGENS 有限公司；GM300 刀式研磨儀，德國萊馳有限公司；MS-NANO-C NANO 凈化管，博納艾杰爾科技。

1.3 標準溶液配制

混合標準儲備溶液：準確量取氟苯脲、氟蟲脲、除蟲脲和滅幼脲標準品各1.00 mL 到10.00 mL 容量瓶內(nèi)，用乙腈定容至刻度，配制成濃度10 mg·L-1的混合標準儲備液，4 ℃冷藏避光保存，有效期3 個月。

混合標準工作溶液：分別準確吸取0.01 mL、0.02 mL、0.05 mL、0.10 mL、0.50 mL、1.00 mL和2.00 mL混合標準儲備液，然后用乙腈定容至10.00 mL，分別配制成質(zhì)量濃度是0.01 μg·mL-1、0.02 μg·mL-1、0.05 μg·mL-1、0.10 μg·mL-1、0.50 μg·mL-1、1.00 μg·mL-1和2.00 μg·mL-1的標準系列工作液，現(xiàn)配現(xiàn)用。

1.4 樣品前處理

1.4.1 制備樣品

稱取樣品500 g，切碎其可食用部分（不可用水洗），并用搗碎機把樣品加工成漿狀。

1.4.2 提取樣品

稱取勻漿試樣10.0 g（準確到0.1 mg），放到50.0 mL離心管內(nèi)，再加入10.0 mL 乙腈溶液，通過1 min 的渦旋振蕩，然后在高速冷凍離心機上5 000 r·min-1離心5 min，先加入氯化鈉1.0 g，經(jīng)過1 min 渦旋振蕩，再加入無水硫酸鎂3.0 g，再經(jīng)過1 min 渦旋振蕩，然后在高速冷凍離心機上6 000 r·min-1離心10 min，留取上清液待測。

1.4.3 凈化樣品

量取上清液1.0 mL，加入到博納艾杰爾MSNANO-C 凈化管中，渦旋振蕩1 min，于高速冷凍離心機中8 000 r·min-1離心5 min，將上清液經(jīng)過0.22 μm有機相濾膜過濾，以待上機測定。

1.5 儀器條件

1.5.1 液相色譜條件

色譜柱：C18柱，Kinetex?（100 mm×2.1 mm，2.6 μm 或1.8 μm）；柱溫：30 ℃；流速：0.3 mL·min-1；進樣量：5 μL；流動相：A（1%甲酸水溶液）、B（乙腈），梯度洗脫詳情見表1。

表1 液相色譜的梯度洗脫條件表

1.5.2 質(zhì)譜條件

離子源：電噴霧源；掃描方式：負離子模式；分辨率：單位分辨率；電噴霧電壓：5 500.0 V；離子源溫度：550 ℃；霧化氣壓力：50.00 psi；輔助氣壓力：50.00 psi；氣簾氣壓力：35.00 psi。其他質(zhì)譜條件見表2。

表2 4 種苯甲酰脲農(nóng)藥質(zhì)譜多反應(yīng)監(jiān)測情況表

2 結(jié)果與分析

2.1 標準品色譜圖

在上述色譜、質(zhì)譜條件下，對氟苯脲、氟蟲脲、除蟲脲和滅幼脲標準品進行上機測定，色譜圖見圖1。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，4 種苯甲酰脲類農(nóng)藥的保留時間分別為氟蟲脲（9.27 min）、氟苯脲（8.67 min）、除蟲脲（7.81 min）和滅幼脲（7.98 min）。

圖1 4 種苯甲酰脲類農(nóng)藥標準品色譜圖

2.2 線性方程和相關(guān)性

按照1.3 配制的混合標準工作溶液進行線性回歸分析，用所得結(jié)果繪制農(nóng)藥標準曲線，最終通過空白基質(zhì)加標的方式，確定4 種物質(zhì)的方法檢出限（以S/N≥3）為0.01～0.02 mg·kg-1。4 種農(nóng)藥在0.05～2.00 μg·mL-1時，濃度與峰面積呈現(xiàn)出良好的線性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)均在0.999 以上，詳見表3。

表3 線性回歸方程和相關(guān)性表

2.3 回收率和精密度

分別向空白樣品中添加濃度為0.01 mg·kg-1、0.02 mg·kg-1的4 種苯甲酰脲類農(nóng)藥，進行6 次平行測定，按照1.4 前處理方法提取，1.5 儀器條件測定加標后樣品含量并計算加標回收率，結(jié)果見表4。結(jié)果發(fā)現(xiàn)平均回收率為85.2%～92.5%，相對標準偏差為2.2%～7.9%。

表4 4 種苯甲酰脲類農(nóng)藥的加標回收率表

3 結(jié)論

本文以高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法為基礎(chǔ)，建立了草莓中苯甲酰脲類農(nóng)藥殘留快速測定的方法，平均回收率為85.2%～92.5%，相對標準偏差為2.2%～7.9%，能夠滿足草莓等果蔬質(zhì)量安全監(jiān)測量大和高頻的檢測需求，為有效控制草莓質(zhì)量安全提供了可靠的技術(shù)保障。