首農豬場生物安全體系防控非洲豬瘟的實踐效果

許光勇

(1.北京奶牛中心 , 北京 朝陽 100192 ; 2.中國農業科學院北京畜牧獸醫研究所 , 北京 海淀 100193 ;3.北京中育種豬有限責任公司 , 北京 海淀 100194)

非洲豬瘟(African swine fever,ASF)是由非洲豬瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)感染豬引起的一種熱性、出血性和高度接觸性傳染病,感染后豬群可能出現精神萎靡、采食量下降、全身性出血、體溫升高和母豬流產等典型特征[1]。世界動物衛生組織將ASF規定為法定報告動物疫病,我國將其列為一類傳染病。ASF在我國已然存在近4年時間,其對生豬養殖行業發展影響巨大,同時造成了生豬價格的大幅波動。截至目前,沒有任何有效的疫苗和藥物可以控制ASF,生物安全是當前最有效的防控措施。自2018年以來,首農集團北京中育種豬有限責任公司發揮科技型人才團隊優勢,積極探索高效規模化豬場生物安全防控措施以阻止ASF的傳入,經3年養豬現場實踐,基本形成了以“五級分區 三級管理 二級洗烘”為標準的首農規模化豬場生物安全體系,該體系能夠有效地防控以ASF為代表的豬場常見重要疾病,為保障首農集團生豬養殖高質量健康發展提供強而有力的技術支撐。

1 材料與方法

1.1 主要試劑 ZTLYB-Y64 Ex-DNA/RNA病毒核酸提取試劑盒(磁珠法),西安天隆科技有限公司;ASFV核酸定量PCR檢測試劑盒,北京明日達科技發展有限責任公司。

1.2 主要儀器 NP968-C全自動核酸提取儀、96R實時熒光定量PCR儀和PANA9600S全自動核酸工作站,西安天隆科技有限公司。

1.3 采樣方法 首農規模化豬場生物安全體系構建和運行過程中,圍繞車輛、人員、物資、豬群和環境五大關鍵要素開展樣品采集工作,分為定期和即時采樣2種方式,其中車輛、人員和物資為隨時發生隨時采樣,各個關口、飼養區域、生活辦公區域等環境為每周定時采樣,豬群根據疾病發生狀況靈活安排采樣。使用長棉簽、紗布擦拭和紗布滾輪等方法進行樣品采集操作。

1.4 ASFV核酸檢測 按照ZTLYB-Y64 Ex-DNA/RNA病毒核酸提取試劑盒說明書步驟提取ASFV核酸。按照ASFV核酸定量PCR檢測試劑盒說明書步驟應用熒光定量PCR檢測ASFV核酸。熒光定量PCR反應條件:50 ℃ 2 min;95 ℃ 3 min;95 ℃ 10 s,60 ℃ 20 s,40個循環。試驗成立條件:陽性對照Ct值≤30,有明顯指數增長,呈典型S型曲線;陰性對照無Ct值,無明顯指數增長期和平臺期。結果判定:檢測樣品Ct值≤40,有明顯指數增長,則測定為ASFV核酸陽性;無Ct值判定為陰性。

2 結果

2.1 首農豬場生物安全體系構建 通過3年豬場實踐,已經形成了以“五級分區 三級管理 二級洗烘”為標準的首農規模化豬場生物安全體系,對首農集團規模化豬場的日常運營起到保駕護航的重要作用。

2.1.1 五級分區 將公司與豬場和周邊環境人為劃定為5個不同等級的生物安全區域,分別采用紅色、橙色、黃色、藍色和綠色表示(圖1)。紅區表示公司與豬場外部不可控區域,一般是指社會公共區域;橙區表示公司與豬場辦公區域、洗消烘中心、豬場圍墻周邊的可控區域,該區域通常與外部頻繁對接,是阻止外源性風險傳入的第一道屏障;黃區表示豬場內部生產人員的生活區域,該區域主要包括生產人員宿舍、員工食堂、娛樂場所;藍色表示豬場內除去生活區和豬舍的場內其他作業區域,包含場內道路、料塔、車輛洗消點、電工房和出豬臺等;綠區表示豬舍、豬舍連廊和轉豬連廊內部區域。每跨過一個區域即為一個關口,分別為一、二、三、四和五級關口,經過每個關口必須執行有效控制措施,并且遵循單向流動不可逆原則。

圖1 生物安全五級分區示意圖Fig.1 Schematic diagram of biosafety at 5 levels

2.1.2 三級管理 基于ASF防控需求,結合北京中育種豬有限責任公司實際管理狀況,提煉出三級管理的創新理念,即公司總部統一管理為第一級管理、豬場后勤運營保障管理為第二級管理和豬場內部生產運營管理為第三級管理,各級具有明確分工,各司其職。一級管理職責為推行公司各項標準和管理措施,是阻止外源性風險的第一道防線,設有辦公、初級隔離、初級洗消烘和物資配送等功能;二級管理職責為對應豬場的管理,對接公司總部的各項措施落地,阻止外源性風險直接傳入豬場內,是阻止外源性風險的第二道防線,設有豬場辦公、二次隔離、二次洗消烘、物資接收消毒和配送、待售豬只中轉銷售等功能;三級管理主要職責為生產,即保證生產正常穩定運營。

2.1.3 二級洗烘 根據當前ASF流行態勢和大環境影響,北京中育種豬有限責任公司建立了2個等級洗消中心,分別為社會(一級)洗消中心和內部(二級)洗消中心,其功能主要為社會車輛和豬場內部車輛提供清洗、消毒和烘干。通過二級洗消烘操作,可以阻止前往中轉區域的社會車輛攜帶ASFV,以及切斷豬場內部車輛將外部風險傳入場內的途徑。

2.2 建立生物安全管理團隊 良好的豬場生物安全體系需要人員執行,中育種豬公司組建了一支專業化獸醫技術團隊,設立了生物安全總督導、生物安全督導員、生物安全員和檢測專員的崗位,分別負責公司策略落地和推廣、漏洞排查和改進、生物安全運行效果審計等工作,整個團隊保證了生物安全體系在豬場的高效運轉。

2.3 生物安全體系運行效果 2019—2021年,已構建的高級別生物安全體系的各項防控措施在北京中育種豬有限責任公司下屬規模化豬場落地執行。為評估生物安全體系對ASF的防控效果,按制定計劃進行樣品采集和ASFV核酸檢測工作,結果如表1所示,2019—2021年共收集樣品120 919份,車輛、人員、物資和環境樣品均能檢出ASFV核酸陽性,對比發現車輛是檢出ASFV核酸陽性率最高的環節,豬群均為ASFV核酸陰性。結合豬場2019—2021年生產成績和穩定狀況,表明生物安全體系的執行能夠有效阻止車輛、人員、物資和環境等載體攜帶外源性ASFV傳入豬場感染豬群,生物安全體系為保障豬群健康發揮了重要作用。

表1 非洲豬瘟病毒核酸檢測Table 1 Nucleic acid detection of African swine fever virus [%(n/n)]

3 討論

北京中育種豬有限責任公司構建的高級別規模化豬場生物安全體系在本公司下屬豬場實踐成果顯著,較大程度上阻止了外源性ASFV的傳入,確保了豬群的健康穩定。生物安全五級分區明確了5個不同等級風險,劃定了作業區域界線,設立了關口,以提醒員工開展物資消毒等各項操作,切斷各類疾病傳入和循環傳播的途徑。生物安全三級管理涵蓋了北京中育種豬有限責任公司總部、豬場外勤和豬場內部共3個維度的管理,重點針對物資周轉和消毒、返場人員隔離和檢測等方面開展工作,使進入豬場生產區的物資和人員所攜帶的病原風險逐漸減小。生物安全二級洗烘重點管控拉豬車輛,已建成2個功能性洗消中心,分別服務于社會車輛和內部車輛的清洗、消毒和烘干,以確保全部車輛ASFV攜帶零風險。2018年8月ASF首次在我國出現[2],短期內對生豬養殖行業造成巨大損失,部分豬場按照發病清群的思路防控ASF,導致全國生豬存欄量有所下降。鑒于無有效的疫苗和藥物來防控ASF,以及二次復養失敗的慘痛教訓,致使部分養殖公司產生“提非色變”的心理陰影。2019年,由牧原食品股份有限公司等集團化生豬養殖企業牽頭,其他規模化生豬養殖公司共同參與,進行了ASF防控技術研討會,探索生物安全對ASF防控的效果,經實踐證明生物安全能夠有效地防控ASF,同時也是最有效的控制措施。同期,北京中育種豬有限責任公司也參與到全國的豬場生物安全體系研究和推廣工作中,并形成了以“五級分區、三級管理和二級洗烘”為標準的首農豬場生物安全體系,歷經3年多現場實踐,豬場生產始終保持穩定狀態,表明構建的首農豬場生物安全體系在防控ASF方面比較科學和高效。

良好的生物安全體系最終靠專業化的獸醫技術團隊來執行與監督,因此組建生物安全管理團隊十分必要,北京中育種豬有限責任公司分別設立了生物安全總督導、生物安全督導員、生物安全員和檢測專員相關崗位來保障公司各項生物安全措施的落地,以及生物安全體系的不斷升級。2019年,牧原食品股份有限公司等公司將具備碩士研究生及以上學歷的技術人員安排在豬場門衛等生物安全崗位,開展進入豬場的物資、人員和車輛等關鍵環節的周轉、消毒和管控工作,由此可見,生物安全工作在豬場得到前所未有的重視,也進一步說明生物安全對ASF防控的重要性,甚至可以決定生豬養殖公司生產經營的成敗。

在生物安全管理團隊的精準實施下,首農規模化豬場生物安全體系保持高效運行狀態,2019—2021年日常采集和監測樣品數量分別為30 779、36 826和53 314份,主動識別出ASFV核酸陽性事件達60、112和48次,通過采取車輛棄用或二次消毒、人員管控、物資再處理、環境消殺和豬群淘汰等關鍵措施,有效阻止了ASFV傳入豬場及在豬群內循環傳播,在一定程度上降低豬場疫情的發生,為企業穩定生產經營作出巨大貢獻。從生物安全防控五大要素分析發現,車輛仍然是ASFV攜帶風險最高的載體,核酸陽性率達3.52%,其次是人員為1.39%,物資和環境分別為0.52%和0.02%,此結果與現場實際情況較為符合。眾所周知,拉豬車輛尤其是社會拉豬車輛運輸范圍廣,可能裝運各類豬群,檢出ASFV核酸陽性的概率較大,因此車輛尤其是拉豬車輛務必應做到百分之百檢測,合格后方可使用。人員因休假前往集貿市場或超市等,或是新招聘其他豬場離職員工,被動污染攜帶是存在的,因此,休假返場或新招聘進場人員需開展流行病學調查、隔離和檢測處理,2次檢測ASF呈陰性方可進入生產區。物資包括獸藥、疫苗、袋裝飼料、食材、五金耗材和勞保用品等,是進入豬場或豬舍內數量最多或頻次最高的,近年來隨著公共區域環境被污染面積逐漸增加,外包裝通過運輸等環節交叉污染也逐漸嚴重,故嚴格控制物資周轉和消毒等流程十分必要,豬場現場采取了“采樣—消毒—拆除外包裝—再消毒”的處理辦法,以確保進舍物資的絕對安全。2019—2021年,北京中育種豬有限責任公司所屬豬場的豬群未檢出ASFV核酸陽性,說明豬群沒有感染ASFV,間接表明首農豬場生物安全體系在防控ASF方面卓有成效。