不孕癥患者生殖道支原體、衣原體感染及藥敏分析

姚觀昀 蔡麗萍 詹華深 楊川藝 劉媛娉 陳祖陣 黃海燕

生殖道感染是指生殖道受細菌、霉菌、衣原體、支原體等病原微生物感染的總稱。據統計, 我國常見的生殖道感染患病率為40.2%, 且患病率呈逐年遞增的趨勢［1］。生殖道感染中常見的病原體主要有支原體和衣原體, 且隨著抗菌藥物的濫用, 其病原體的耐藥性也發生了改變。支原體和衣原體感染可引起宮頸炎、尿道炎和前列腺炎等生殖道疾病, 這些疾病也是導致女性不孕、早產及流產的主要因素。而支原體感染是引起女性不孕的主要病原體, 支原體可寄生在人體各種細胞上, 如輸卵管細胞、泌尿生殖道、呼吸道等, 常見的衣原體和支原體類型包括沙眼衣原體、解脲支原體和人型支原體［2,3］。女性尿道炎、宮頸炎和盆腔炎常見的病原體為沙眼衣原體, 研究表明, 支原體耐藥性與抗菌藥物的濫用密切相關［4］。因此, 分析不孕癥患者生殖道衣原體、支原體的感染率, 并根據藥敏結果確定支原體敏感藥物, 對不孕癥患者生殖道感染的臨床治療、保障女性生殖健康具有重要意義。本研究選取福建省三明市中西醫結合醫院診治的130 例不孕癥患者為研究對象, 檢測患者生殖道支原體、衣原體感染率, 并分析支原體對常規抗菌類藥物的耐藥情況, 旨在為改善不孕癥患者生殖道感染的臨床癥狀, 合理使用抗菌類藥物提供參考依據, 現報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2020 年1 月～2021 年12 月福建省三明市中西醫結合醫院診治的130 例不孕癥患者為研究對象, 患者年齡22～41 歲, 平均年齡(30.56±3.48)歲；病程1～3 年, 平均病程(1.67±0.45)年。納入標準：①患者年齡≥22 歲；②符合世界衛生組織(WHO)制定的不孕癥的診斷標準［5］；③臨床資料完整,且依從性良好；④近1 個月內未使用過相關抗菌藥物進行治療。排除標準：①合并其他嚴重心臟、腎臟等重要器官功能障礙的患者；②合并嚴重感染性疾病或免疫缺陷類疾病的患者；③有嚴重精神疾病或精神病史的患者；④不能配合完整研究內容的患者。

1.2 方法 取樣：利用陰道擴張器擴張陰道, 使宮頸暴露, 先用無菌大棉簽擦拭陰道及宮頸分泌物, 再將無菌拭子插入子宮頸管內約2 cm 處, 旋轉無菌拭子至少30 s 后取出宮頸分泌物, 0.5 h 內送檢。采用支原體培養、鑒定藥敏試劑盒(改良肉湯稀釋法)(珠海浪峰生物技術有限公司生產), 沙眼衣原體抗原檢測試劑盒(乳膠法)(艾博生物醫藥有限公司生產)對130 例不孕癥患者的生殖道分泌樣本中的支原體進行篩查及藥敏分析, 將待測生殖道分泌物樣本接種于培養基中, 控制培養溫度在37℃左右, 培養時間48 h, 嚴格按照試劑盒說明書要求檢測藥物敏感性, 包括交沙霉素、克拉霉素、美滿霉素、多西環素、阿奇霉素等。按照衣原體抗原檢測說明書操作, 進行衣原體抗原檢測。

1.3 觀察指標 分析不孕癥患者基本情況, 生殖道支原體、衣原體感染率, 生殖道支原體藥敏結果；比較原發性不孕癥和繼發性不孕癥患者病原體感染情況。①衣原體感染：10～20 min 內, 檢測板僅出現1 條紅色質控線(C)表示衣原體陰性；同時出現1 條紅色檢測線(T)和1 條紅色質控線(C)表示衣原體陽性。②支原體感染：培養基持續48 h 不變色表示支原體陰性；培養基中解脲支原體鑒定孔在24 h 內由橙黃色變為紅色表示解脲支原體陽性；培養基中人型支原體鑒定孔在48 h 內由橙黃色變為紅色表示為人型支原體陽性。③單純衣原體感染：在解脲支原體和人型支原體感染均陰性情況下, 衣原體感染陽性；混合感染：解脲支原體感染陽性, 人型支原體感染陰性, 衣原體感染陽性。④單純支原體感染：在衣原體感染陰性情況下, 解脲支原體感染或解脲支原體與人型支原體感染。⑤藥敏分析：藥敏孔變紅, 表示孔中有支原體生長, 顯示支原體對該種抗生素耐藥或者中敏, 反之則為敏感。以An 表示高濃度藥敏孔, Bn 表示低濃度藥敏孔。敏感：An(-)Bn(-)；中敏：An(-)Bn(+)；耐藥：An(+)Bn(+)。

1.4 統計學方法 采用SPSS22.0 統計學軟件進行統計分析。計數資料以率(%)表示, 采用χ2檢驗。P＜0.05 表示差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 不孕癥患者基本情況分析 130 例不孕癥患者的平均年齡為(30.56±3.48)歲, 其中年齡＞35 歲的患者54 例, 占41.5%；居住在農村的患者79 例, 占比60.8%；平均病程為(1.67±0.45)年, 其中病程≥2 年的患者68 例, 占比52.3%；原發性不孕癥患者57 例, 占比43.8%。見表1。

表1 130 例不孕癥患者的基本情況分析 (n, %)

2.2 不孕癥患者生殖道支原體、衣原體感染率分析130 例不孕癥患者中檢出支原體、衣原體共62 例, 總感染率為47.7%, 主要為生殖道解脲支原體、人型支原體和沙眼衣原體, 其中單獨檢出解脲支原體28 例,感染率為45.1%, 單獨檢出人型支原體4 例, 感染率為6.5%, 單獨檢出沙眼衣原體14 例, 感染率為22.6%, 檢出解脲支原體+人型支原體8 例, 感染率為12.9%, 檢出解脲支原體+沙眼衣原體6 例, 感染率為9.7%, 檢出人型支原體+沙眼衣原體0 例, 感染率為0, 檢出解脲支原體+人型支原體+沙眼衣原體2 例, 感染率為3.2%。見表2。

表2 130 例不孕癥患者生殖道支原體、衣原體感染率分析 (n, %)

2.3 原發性不孕癥和繼發性不孕癥患者病原體感染情況比較 繼發性不孕癥患者生殖道解脲支原體、人型支原體、沙眼衣原體、解脲支原體+人型支原體、解脲支原體+沙眼衣原體、解脲支原體+人型支原體+沙眼支原體感染率與原發性不孕癥患者比較, 差異無統計學意義(P＞0.05)。見表3。

表3 原發性不孕癥和繼發性不孕癥患者病原體感染情況比較［n(%)］

2.4 不孕癥患者生殖道支原體藥敏結果分析 40 例支原體陽性菌株對交沙霉素、諾氟沙星、環丙沙星、羅紅霉素、多西環素、氧氟沙星、阿奇霉素、克拉霉素、美滿霉素、紅霉素等10 種抗菌藥物的藥敏試驗結果顯示, 支原體耐藥的藥物包括氧氟沙星、諾氟沙星、環丙沙星、羅紅霉素、阿奇霉素和美滿霉素, 其中單純解脲支原體耐藥性較高的有氧氟沙星、諾氟沙星、環丙沙星、羅紅霉素、阿奇霉素和美滿霉素, 單純人型支原體耐藥性較高的有氧氟沙星、諾氟沙星、環丙沙星、阿奇霉素和美滿霉素, 解脲支原體混合人型支原體耐藥性較高的有氧氟沙星、阿奇霉素。支原體敏感的藥物包括克拉霉素、交沙霉素、多西環素、紅霉素, 其中單純解脲支原體敏感性較高的藥物有多西環素、交沙霉素、紅霉素和克拉霉素, 單純人型支原體敏感性較高的藥物有多西環素和克拉霉素, 解脲支原體混合人型支原體敏感性較高的藥物有多西環素和克拉霉素。見表4。

表4 不孕癥患者生殖道支原體藥敏結果分析［n(%)］

3 討論

不孕癥分為原發性不孕和繼發性不孕, 導致不孕癥的原因為男性不育和女性不孕, 支原體、衣原體感染是引起男性不育或女性不孕的主要原因［6］。支原體是介于細菌和病毒間的原核微生物, 其可在男性或女性泌尿生殖道內繁殖, 當機體免疫能力下降或炎癥反應導致內環境紊亂后, 支原體會大量繁殖并造成生殖道感染, 從而影響男性生殖道功能與精子質量, 引起女性尿道炎、宮頸炎和盆腔炎, 甚至流產［7］。支原體通過在機體生殖道黏膜細胞表層粘附, 導致細胞損傷或死亡, 從而引起局部黏膜炎癥反應, 最終導致輸卵管功能障礙, 其還通過粘附在精子細胞表面, 阻撓精卵細胞結合, 發生不孕不育。解脲支原體、人型支原體在女性泌尿生殖道中較為常見, 是引起女性生殖道感染和不孕癥的主要病原體, 同時還與不良妊娠結局和新生兒慢性疾病有關［8］。沙眼衣原體屬革蘭陰性病原體,是一種含有脫氧核糖核酸和核糖核酸, 在細胞內寄生,能夠以二次分裂方式進行繁殖的原核細胞型微生物。沙眼衣原體與不良妊娠結局的相關性較高, 衣原體感染細胞使得細胞產生抗原, 誘導機體發生自身免疫反應, 惡化母胎耐受機制, 造成不良妊娠結局［9］。沙眼衣原體可寄生于機體黏膜上皮細胞中, 機體遭受感染后能夠生成特異性細胞免疫和體液免疫, 但通常免疫力不強, 且持續較短, 可使患者出現免疫病理損傷、隱性感染、反復感染［10,11］。沙眼衣原體可分為兩種形態, 即原體和始體, 原體具有高度傳染性且在細胞外呈孢子樣；而始體體積較大, 形狀不規則, 主要在細胞內進行復制, 代謝不活躍［12,13］。沙眼衣原體主要存在于陰道分泌物、精液中, 可通過親密接觸傳播。當女性患者遭受沙眼衣原體感染后, 沙眼衣原體可侵入子宮頸、輸卵管等柱狀上皮細胞, 使宮頸局部出現充血、腫大, 促使分泌物產生, 影響精子向子宮上行, 進而導致患者出現不孕不育, 此外患者經感染后還可出現盆腔炎、宮頸炎等疾病。解脲支原體是一種最小原核生物, 介于細菌與病毒之間, 是性傳播疾病的重要病原體之一。解脲支原體可定植于生殖道黏膜上皮細胞、尿道, 性接觸是感染解脲支原體的主要途徑, 此外接觸污染物也可導致感染［14,15］。解脲支原體在泌尿生殖道上皮細胞定植后, 通過釋放神經毒素、促使過氧化氫生成、吸收細胞膜上的脂質與膽固醇等, 造成細胞損傷。當女性患者遭受支原體感染后, 支原體能夠侵入患者輸卵管黏膜, 使黏膜上皮細胞凋亡, 導致輸卵管堵塞或粘連, 影響卵細胞進入子宮, 進而導致不孕不育［16,17］。此外, 支原體感染細胞后能夠激活機體免疫應答, 導致抗子宮內膜的抗體生成, 影響子宮內膜功能, 使受精卵難以著床, 進而誘發不孕不育。女性患者經支原體感染后還可出現宮頸炎、陰道炎、盆腔炎、子宮內膜炎等疾病。本研究收集130 例生殖道感染的不孕癥患者為研究對象, 檢測并分析支原體、衣原體在患者中的陽性感染率及對抗菌類藥物的耐藥性和敏感性。

蔡晶晶等［18］通過觀察育齡期不孕癥患者支原體、衣原體感染情況及藥敏結果發現, 育齡期不孕癥患者衣原體、支原體感染率較高, 耐藥譜也較復雜, 支原體對強力霉素和阿奇霉素的敏感性較高。萬優萍［19］通過觀察并分析沙眼衣原體和解脲支原體與不孕不育癥患者的關系發現, 生殖道感染沙眼衣原體和解脲支原體與不孕不育癥具有相關性, 藥敏結果發現, 解脲支原體對阿奇霉素、環酯紅霉素和強力霉素等抗菌藥物敏感性較高。本研究結果顯示, 130 例不孕癥患者中檢出支原體、衣原體共62 例, 總感染率為47.7%；感染類型主要為生殖道解脲支原體、人型支原體和沙眼衣原體。對支原體敏感的藥物包括克拉霉素、交沙霉素、多西環素、紅霉素, 其中單純解脲支原體敏感性較高的藥物有多西環素、交沙霉素、紅霉素和克拉霉素,單純人型支原體敏感性較高的藥物有多西環素和克拉霉素。與上述文獻研究結果相符, 結果提示, 諾氟沙星、氧氟沙星、環丙沙星等抗菌類藥物的長期不規范使用導致支原體染色體基因位點發生突變, 使得細胞膜通透性降低, 細胞內藥物積累濃度降低從而產生耐藥性。多西環素和克拉霉素的支原體敏感性均較高, 可將這兩種抗菌藥物作為不孕癥患者支原體感染的首選藥物,但需要根據臨床醫師建議進行用藥, 防止耐藥率升高,從而保障臨床療效。

綜上所述, 不孕癥患者生殖道支原體、衣原體感染率較高, 耐藥性和敏感性較為復雜, 建議臨床首選藥物為多西環素和克拉霉素, 降低不孕癥患者生殖道感染發生率, 保障女性生殖健康。同時, 本研究也存在不足之處, 本研究選取的樣本量為130 例, 樣本量需要增大, 對衣原體的耐藥性及敏感性需進一步研究。