多重PCR快速檢測檳榔黃化植原體和檳榔隱癥病毒1體系的建立

彭春霖，黃麗云，朱 輝，魏紅宇，鄭 馨，趙正武*，劉立云*

多重PCR快速檢測檳榔黃化植原體和檳榔隱癥病毒1體系的建立

彭春霖1, 2，黃麗云2，朱 輝2，魏紅宇1，鄭 馨2，趙正武1*，劉立云2*

(1. 重慶師范大學生命科學學院，重慶 401331；2. 中國熱帶農業(yè)科學院椰子研究所，文昌 571339)

由檳榔黃化植原體(areca palm yellow leaf phytoplasma, AYLP)引起的黃化病和檳榔隱癥病毒1(, APV1)引起的黃葉病毒病是危害檳榔樹最嚴重的兩種病害，對海南檳榔產業(yè)造成了巨大的經濟損失，建立快速的檢測技術對于兩種病害的預警防控具有重要意義。利用多重PCR(Multiplex PCR)技術同時檢測AYLP和APV1，即AYLP巢式PCR第一輪結束后，再使用一次多重PCR對兩種病原同時進行擴增，最后進行電泳觀察結果。結果顯示，通過對多重PCR濃度體系和退火溫度進行優(yōu)化，在一個體系中成功擴增出AYLP和APV1，得到525和311 bp 兩條特異性大小條帶。多重PCR檢測與單一PCR檢測結果完全一致，并且與單一PCR檢測方法比較，多重PCR方法精簡了操作步驟，提高了檢測效率，顯著降低了檢測成本，為檳榔黃化病和黃葉病毒病的常規(guī)診斷提供了新方法。因此，該技術在AYLP和APV1常規(guī)檢測中具有重要的應用價值。

檳榔黃化病；植原體；APV1；多重PCR；新方法

檳榔(L.)是我國“四大南藥”(檳榔、砂仁、益智、巴戟)之首，藥用價值很高。據有關報道，檳榔原產于馬來西亞或菲律賓，主要種植于熱帶太平洋、亞洲和東非的大部分地區(qū)，中國95%的檳榔樹都種植在海南省，是海南農民主要的經濟來源之一，檳榔種植國中印度的產量居世界首位。在印度，檳榔主要分布于卡納塔克邦等地方[1-5]。……