8q24.13q24.23微重復病兒1例的臨床及遺傳學分析

邱惠國，陳波

作者單位：廈門大學附屬第一醫(yī)院檢驗科/廈門市基因檢測重點實驗室，福建 廈門361001

目前國內外對8q24.13q24.23的微重復鮮見案例報道，對其影響尚不能確定。本研究中我們將對1例攜帶8q24.13q24.23微重復的胎兒及其母親、父親進行細胞遺傳學及分子方面進行分析，并對該胎兒做產前診斷。

1 資料與方法

1.1 一般資料 孕婦，40歲，身高167 cm，體質量67 kg，孕1產0。孕20周時至廈門大學附屬第一醫(yī)院行無創(chuàng)產前篩查。孕婦與丈夫否認近親結婚，否認家族遺傳病史，否認家族胎兒畸形史。唐氏篩查未檢查。

1.2 方法

1.2.1 外周血及羊水染色體核型分析 采集孕婦及其丈夫靜脈血3 mL，在超聲引導定位下無菌操作行經腹羊膜腔穿刺，采集孕婦羊水20 mL，常規(guī)的細胞接種，收獲，滴片，烤片，G顯帶及核型分析。采用德國萊卡公司生產的GSL-120全自動染色體分析系統(tǒng)。羊水細胞染色體、外周血染色體每例均計數20個核型，分析5個核型。核型描述按照《人類細胞遺傳學國際命名體制》（ISCN2016）標準描述。病人或其近親屬知情同意，本研究符合《世界醫(yī)學協會赫爾辛基宣言》相關要求。

1.2.2 無創(chuàng)產前篩查（NIPT） 采集孕婦外周血5～6 mL于EDTA抗凝管中，顛倒混勻，室溫放置，一般48 h內對標本進行提取，建庫，擴增，自檢，上機。在安諾優(yōu)達測序平臺（型號TPNB500151AR）中對擴增后的標本進行測序，所得序列與人類基因組數據庫進行比對，進而得到各條染色體的數目。

1.2.3 染色體微陣列分析（CMA）檢測 采用含有6萬個60 bp大小的寡核苷酸探針的Agilent CGH+SNP 8x60k芯片進行染色體微缺失/重復檢測。數據分析參考：ISCA、dbVar、Decipher、OMIM、PubMed、GHR、ClinGen等數據庫。拷貝數變異（copy number variations，CNV）致病性按美國醫(yī)學遺傳學會指南進行判讀［1］。對于判讀為臨床意義不明拷貝數變異（variants of unknown significance，VOUS），建議行父母驗證。若該CNV遺傳來自于表型正常的親代，根據指南可判讀為偏良性VOUS；若為新發(fā)突變，則判讀為偏致病性VOUS［2］。

1.2.4 B超檢查 行胎兒心臟彩超及常規(guī)產前超聲篩查（Ⅱ級）。

2 結果

2.1 染色體核型分析結果 胎兒羊水細胞染色體核型為：46，XX，dup（8）（8q24.13q24.23）（圖1）；病兒父親外周血染色體核型46，XY（圖2）；病兒母親外周血染色體核型為：46，XX，dup（8）（8q24.13q24.2 3）（圖3）。

圖1 胎兒核型46，XX，dup（8）（8q24.13q24.23）

圖2 病兒父親核型46，XY

圖3 病兒母親核型46，XX，dup（8）（8q24.13q24.23）

2.2 孕婦NIPT的檢測結果 胎兒“21-三體”“18-三體”“13-三體”均為低風險。但本次檢測還對其他染色體區(qū)域進行分析，結果顯示：8號染色體長臂8q24.13q24.23存在重復。

2.3 胎兒羊水細胞CMA的檢測結果 arr［grch37］8q24.13q24.23（126646442-137947833）x3。

2.4 B超檢查結果 胎兒心臟結構篩查及常規(guī)產前超聲篩查（Ⅱ級）均未見異常。

2.5 妊娠結局隨訪 孕婦2017年7月17日于外院孕41周剖宮產1名4.3 kg女嬰，電話回訪表示體檢未見異常。

3 討論

DNA芯片及細胞遺傳學分析顯示，該病人8號染色體q24.13 q24.23區(qū)域存在大小約為11.3 Mb的重復（chr8：126646442-137947833）。

目前8q重復的報道，在產前診斷中大部分是夫妻雙方中的一方8號染色體與其他染色體的易位，在胎兒中伴隨著其他的染色體片段缺失或以其他方式的染色體重排［3-10］，因此削弱這些病人之間的基因分型的相關性，而對于單純報道8號染色體長臂部分片段重復的報道比較少。Farcas等［11］報告了1例8q24.12q24.3單體8q24.12q24.3三體的嵌合體，產前超聲檢查顯示多處異常，但其父母決定繼續(xù)妊娠。嬰兒出生于妊娠38周，Apgar評分為2分，在出生后不到24 h內死亡。Concolino等［12］報告了1例8q22.2q24.3重復的病例，片段約為44.9 Mb，病人具有畸形特征、臍疝、隱睪、身材矮小、先天性心臟病和輕度精神發(fā)育遲滯等癥狀。我們所報告的片段dup（8）（8q24.13q24.23）與上述的病例均不相同，且片段遺傳于母親。ClinVar及Decipher數據庫雖有收錄幾個更大片段重復或僅有幾百個kb的小片段的致病案例，但未發(fā)現與本次所測得的片段重復一致的致病性報道。該8q24.13q24.23區(qū)域涉及KCNQ3、LRRC6、TG等OMIM基因。KCNQ3是鉀通道電壓門控家族的成員，該家族中最早發(fā)現的人類基因是KCNQ1和KCNQ2。KCNQ1在心臟和內耳表達；KCNQ2和KCNQ3在大腦中表達。M-通道是一種緩慢激活和失活的鉀電導，在決定神經元閾下電興奮性以及對突觸輸入的反應性方面起著關鍵作用。外周交感神經元中首次描述了M電流，這種電導的差異表達產生了具有不同放電模式的交感神經元亞型。M-通道也在中樞神經系統(tǒng)的許多神經元中表達。KCNQ2和KCNQ3通道亞單位可以共同組裝，形成一個對天然M通道具有基本相同的生物物理特性和藥理學敏感性的通道，KCNQ2和KCNQ3基因表達模式與這些編碼天然M通道的基因一致。KCNQ3通道是一種電壓門控、快速激活的K（+）選擇性通道，類似于KCNQ1。KCNQ2和KCNQ3的共表達導致電流振幅顯著協同增加，表明這兩個通道之間存在功能性相互作用。KCNQ2和KCNQ3也被發(fā)現與KCNE1相互作用。KCNQ3基因變異可能導致良性家族性新生兒癲癇發(fā)作-2型。良性家族性新生兒癲癇發(fā)作-2是一種常染色體顯性遺傳性神經系統(tǒng)疾病，其特征在于出生后最初幾天出現陣攣發(fā)作或強直陣攣發(fā)作。LRRC6為纖毛相關基因，在睪丸和鼻呼吸上皮細胞中的表達。LRRC6基因純合變異可能導致原發(fā)性睫狀體運動障礙-19型。原發(fā)性睫狀體運動障礙-19是一種常染色體隱性粒細胞病，其特征為慢性竇肺感染、軟骨癥和運動性纖毛。受影響個體的呼吸上皮細胞和精子鞭毛缺乏內側和外側動力臂。甲狀腺球蛋白TG是三碘甲狀腺激素（T3甲狀腺原氨酸）和四碘（T4甲狀腺原氨酸）的糖蛋白前體。它的分子量為660 kD，具有2個相同的亞基，但其完全水解僅產生2～4個T3和T4分子。甲狀腺球蛋白提供3種物質：甲狀腺激素前體，碘的儲存和甲狀腺激素的儲存。TG基因變異可能導致甲狀腺激素生成障礙3型或自身免疫性甲狀腺疾病，易感性，3型。以上3個基因均未見明確劑量效應證據。據美國醫(yī)學遺傳學會指南［1］，對于VOUS，建議行父母驗證。若該CNV遺傳自表型正常的親代，根據指南判讀為偏良性VOUS；若為新發(fā)突變，則判讀為偏致病性VOUS［2］。該例孕婦在我院4次B超均未見明顯異常；dup（8）（q24.13q24.23）片段臨床意義尚不明確；重復片段遺傳于母親；母親亦無明顯的臨床癥狀；高齡產婦。經充分遺傳咨詢后，孕婦愿意繼續(xù)妊娠。孕婦于外院產1名女嬰，電話回訪未見異常，持續(xù)隨訪中。

基因數據庫需不斷完善方能對臨床中出現罕見微缺失微重復的胎兒進行遺傳學評估，有助于評估他們的預后，為臨床診斷和遺傳咨詢提供科學依據。