血清α-syn、Sirtuin-1 水平與急性腔隙性腦梗死患者病情進展及腦白質病變的關系

任占霞，宋愛霞，梁盼盼，賀宏梅，武婧月，陳曉凡，張帆，張志偉

河北北方學院附屬第一醫院神經內科，河北張家口 075000

急性腔隙性腦梗死（ALCI）是腦梗死的一種亞型，因梗死部位直徑小，大部分患者的病情輕微，疾病轉歸良好，但有20%～30%的ALCI 患者可能在發病幾小時或幾天后出現病情進展，甚者死亡［1］。腦白質病變是ALCI患者的合并癥之一，是指白質部位的神經細胞發生髓鞘損害，可導致認知功能障礙、運動功能障礙、情緒異常等，嚴重影響患者生存質量［2］。因此，早期評估ALCI 患者的病情及腦白質病變可指導臨床治療方案的選擇，有利于改善疾病轉歸。α-突觸核蛋白（α-syn）是路易體重要的組成部分，廣泛表達于神經元，已有研究證實，血清α-syn水平異常與帕金森病發病有關［3］。沉默調節蛋白1（Sirtuin-1）是一種與煙酰胺腺苷二核苷酸相關的乙酰化酶，在機體能量代謝平衡、細胞損傷、炎癥應激等過程中發揮重要作用［4］。敲除缺血性腦卒中小鼠模型的Sirtuin-1 基因，可春季氧化應激，加重局灶性腦缺血/再灌注誘導的神經功能缺損［5］。但國內少有研究報道血清α-syn、Sirtuin-1與ALCI的關系。基于此，本研究探討ALCI 患者血清α-syn、Sirtuin-1 水平與病情進展、腦白質病變的關系。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選擇2021 年8 月—2023 年1 月本院收治的ALCI 患者130 例，男72 例、女58 例，年齡18～85（59.13 ± 8.24）歲。納入標準：①符合ALCI的診斷標準［6］，并完善影像學檢查；②年齡18～85歲；③均首次確診；④本人及監護人知情同意。排除標準：①合并顱腦外傷、腦膜炎、腦腫瘤等其他腦部疾病者；②由非缺血性病因誘發的腦白質病變者；③合并嚴重心、肺、肝等器官功能異常者；④存在精神或認知障礙者，無法配合診療工作者。本研究已經醫院醫學倫理委員會審核批準。

1.2 病情評估 分別于患者入院時、入院7 d 后采用美國國立衛生研究院卒中量表（NIHSS）［7］對ALCI患者的病情進行評估，量表包括9 個項目，總分42分，評分越高病情越嚴重，其中入院7 d 后較入院時NIHSS評分增加≥2分即可判斷為病情進展。根據病情是否進展分為進展組（n=32）和非進展組（n=98）。

1.3 腦白質病變程度評估 入院時采用Fazekas量表［8］對ALCI 患者腦白質病變程度進行評估，總分為各項評分之和。①腦室旁白質：0 級無病變（計0分）；1 級側腦室前后角出現帽狀高信號，或側腦室周圍出現較薄的暈圈（計1分）；2級病變呈光滑的暈圈（計2分）；3級出現不規則的腦室旁高信號，并延伸到深部白質（計3 分）。②深部白質：0 級無病變（計0分）；1級出現點狀病變（計1分）；2級病變開始融合（計2分）；3級病變大面積融合（計3分）。根據是否發生腦白質病變分為病變組（n=106）和非病變組（n=24），根據腦白質病病變程度可分為輕度病變組（Fazekas評分1 分，n=49）、中度病變組（Fazekas 評分2～3 分，n=36）、重度病變組（Fazekas評分4～6分，n=21）。

1.4 血清α-syn、Sirtuin-1 檢測 于患者入院第2 天清晨采集其空腹靜脈血樣4 mL，以3 000 r/min 離心15 min，離心半徑10 cm，分離血清，置于冰箱內保存，用酶聯免疫吸附法檢測血清α-syn、Sirtuin-1。α-syn 試劑盒購于上海一研生物科技有限公司，Sirtuin-1 試劑盒購于深圳中爍生物技術有限公司，檢測流程參考使用說明書。

1.5 統計學方法 采用SPSS23.0 統計軟件。符合正態分布的計量資料以±s表示，兩組比較采用t檢驗，多組比較采用方差分析，進一步兩兩比較采用SNK-q檢驗；用受試者工作特性（ROC）曲線評估血清α-syn、Sirtuin-1 對ALCI 病情進展的預測價值，曲線下面積比較采用Z檢驗；用Pearson 相關法分析血清α-syn、Sirtuin-1 與Fazekas 評分的關系。P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 血清α-syn、Sirtuin-1 水平與ALCI 患者病情進展的關系 非進展組和進展組血清α-syn、Sirtuin-1水平比較見表1。

表1 非進展組和進展組血清α-syn、Sirtuin-1水平比較（± s）

表1 非進展組和進展組血清α-syn、Sirtuin-1水平比較（± s）

組別非進展組進展組P n 98 32 α-syn（μg/L）19.27 ± 3.65 35.31 ± 4.45＜0.05 Sirtuin-1（ng/mL）14.24 ± 3.17 9.16 ± 2.04＜0.05

2.2 血清α-syn、Sirtuin-1 水平與ALCI 患者腦白質病變的關系

2.2.1 非病變組和病變組血清α-syn、Sirtuin-1 水平比較 見表2。

表2 非病變組和病變組血清α-syn、Sirtuin-1水平比較（± s）

表2 非病變組和病變組血清α-syn、Sirtuin-1水平比較（± s）

組別非病變組病變組P n 24 106 α-syn（μg/L）18.16 ± 3.47 24.36 ± 4.15＜0.05 Sirtuin-1（ng/mL）16.52 ± 3.65 10.94 ± 2.13＜0.05

2.2.2 輕度、中度、重度病變組血清α-syn、Sirtuin-1水平比較 見表3。

表3 輕度、中度、重度病變組血清α-syn、Sirtuin-1水平比較（-x ± s）

2.3 血清α-syn、Sirtuin-1 水平與腦白質病變ALCI患者Fazekas 評分的關系 Pearson 相關分析結果顯示，腦白質病變ALCI 患者血清α-syn 水平與Fazekas評分呈正相關（r=0.534，P＜0.05），血清Sirtuin-1 水平與Fazekas評分呈負相關（r=-0.526，P＜0.05）。

3 討論

ALCI屬于神經外科常見高發病，與其他類型腦梗死比較其致死和致殘風險低，但是易反復發作。ALCI發生后可引起腦小血管出現玻璃樣變性、纖維蛋白樣壞死，影響腦組織的血流灌注，進而誘發腦白質病變［9］。相關研究結果表明，腦白質病變不僅會造成不同程度的認知功能損害，增加老年癡呆的患病風險，而且與腦梗死合并出現時可加重患者病情，降低其生存質量［10］。現階段，如何早期判定ALCI患者的病情及腦白質病變是臨床研究關注的熱點。

α-syn 是一種存在于中樞神經系統的可溶性蛋白，在突觸形成、多巴胺合成、突觸前膜囊泡轉運等過程中扮演重要的角色［11］。KIM 等［12］研究對缺血性腦卒中小鼠模型注射了miR-7 模擬物，發現血清α-Syn 水平明顯下調，病變體積顯著降低。可推測α-Syn 水平升高可能與缺血性腦卒中發病有關。另一項研究發現，腦卒中后受α-Syn 誘導和積累可導致繼發性腦損傷［13］。本研究結果顯示，病情進展ALCI患者血清α-syn水平較病情未進展患者高。提示血清α-syn可能在ALCI患者的病情發展中發揮重要作用。原因是生理狀態下，血液中α-syn 含量較低，然而ALCI發生后α-syn異常聚集，并經受損的血腦屏障進入血液循環，故血清α-syn 水平升高。同時，α-syn 異常聚集可誘導線粒體發生去極化，產生大量的氧化應激產物，而氧化應激是ALCI發病的重要機制［14］。因此，可推測血清α-Syn水平上調與ALCI患者的病情發展有關。ROC 曲線結果顯示，血清α-syn 預測ALCI 患者病情的曲線下面積分別為0.831，特異度為66.05%。說明α-syn有望作為預測ALCI患者病情進展的血清標記物。血清α-syn水平在腦白質病變ALCI 患者中升高，且與Fazekas 評分呈正相關，提示血清α-syn 水平變化可反映ALCI 患者腦白質病變程度。這可能是因為α-syn 可激活炎癥小體，促使大量促炎因子釋放入血，導致腦血管動脈粥樣斑塊形成，血流灌注量降低，加重腦組織損害，促使神經細胞凋亡，進而損害腦白質功能［15］。

Sirtuin-1 是一種在哺乳動物腦組織中高度表達的沉默調節蛋白，其基因位于10q21.3，主要定位于細胞核和細胞質內，可通過激活內皮型一氧化氮合酶的活性，減輕血管內皮細胞損傷，進而發揮保護血管功能的作用［16］。有研究表明，Sirtuin-1 在神經膠質細胞中呈高表達，可通過抑制IL-6、腫瘤壞死因子α 等炎性因子的脫乙酰化和凋亡途徑，減輕神經炎癥，進而抑制神經元細胞凋亡［17］。ESMAYEL 等［18］研究結果顯示，急性卒中組血漿Sirtuin-1 水平低于健康組，可預測急性腦血管卒中發生的風險。本研究結果顯示，進展組Sirtuin-1 水平低于非進展組。提示血清Sirtuin-1 與ALCI 患者病情發展密切相關。原因是Sirtuin-1 被認為是血管內皮穩態的關鍵調節因子，其表達下調后可導致血管內炎癥介質水平升高及活性氧增加，誘發血管炎癥反應，進而導致局部腦組織的缺血缺氧加重，病情進一步惡化。ROC 曲線結果顯示，血清Sirtuin-1 對ALCI 患者病情進展具有較高的預測價值，檢測其水平變化可以篩查病情進展的高危患者。本研究結果顯示，血清Sirtuin-1水平在腦白質病變ALCI 患者中降低，且與Fazekas評分呈負相關。提示血清Sirtuin-1 可能參與了ALCI患者腦白質病變過程，且與腦白質病變程度有關。Sirtuin-1 對多種核轉錄因子具有調節作用，可通過影響緊密連接相關蛋白的活性，維持血腦屏障的穩定性［19］。有研究表明，在腦內皮細胞特異性Sirtuin-1 敲除小鼠實驗中，血腦屏障的完整性受損，通透性增加［20］。因此可推測Sirtuin-1 在衰老的血腦屏障通透性中起著重要作用。而血腦屏障破壞及通透性異常是導致腦白質病變的病理基礎，故認為Sirtuin-1表達下調與腦白質病變有關。

綜上所述，血清α-syn 水平升高、Sirtuin-1 水平降低與ALCI患者病情進展及腦白質病變加重有關，兩者有望作為預測ALCI 患者病情進展的血清標記物。