基于文獻數據挖掘探析中醫藥治療肝豆狀核變性用藥規律研究

蔣真真 汪美霞 陶 莊 王 飛 孫 闊 韓 卉 蔡生興 楊文明

1.安徽中醫藥大學研究生院，安徽合肥 230038；2.安徽中醫藥大學第一附屬醫院腦病三科，安徽合肥 230031；3.中國中醫科學院中醫藥數據中心，北京 100700

肝豆狀核變性（hepatolenticular degeneration，HLD）又稱威爾遜病（Wilson disease，WD），是由P 型銅轉運ATP 酶基因突變引起的以銅藍蛋白合成障礙及膽道排銅障礙為特征的常染色體隱性遺傳疾病[1-3]。本病是為數不多的可有效治療的慢性神經系統遺傳性疾病，早期采取積極有效的治療手段可延緩疾病進展及改善預后[4-5]。中醫學對于HLD 病名未有明確記載，根據其不同臨床表現可歸屬于“肝風”“積聚”“鼓脹”“黃疸”等范疇。中醫藥防治HLD 研究工作已三十余年，在HLD 病因病機、診療思路、治則治法、療效評價和臨床經驗等方面取得的成果頗豐。本研究在運用數據挖掘技術對中醫藥治療HLD 臨床研究類文獻進行歸納匯總，旨在探討中醫藥治療HLD 的用藥規律，以期為HLD 的臨床治療提供新的診療思路。

1 資料與方法

1.1 文獻來源

以肝豆狀核變性、Wilson 病、WD、HLD、中醫、中藥為檢索詞，采用主題詞和自由詞方式檢索中國知網、萬方數據庫、維普網及PubMed、Cochrane 圖書館、EMBase 數據庫建庫至2022 年7 月中醫藥治療WD的臨床研究文獻。

1.2 納入標準

①符合《神經病學》[6]中HLD 的診斷標準；②采用中醫或中西醫結合療法治療的臨床研究文獻，樣本量≥30 例，治療結局判定有效；③方藥組成完整，且服用方法為內服；④處方名稱相同但組方中藥有差異的文獻。

1.3 排除標準

①綜述類、meta 分析、個案報道、經驗分享、動物實驗等；②重復發表的文獻取信息最全者；③無法獲取全文的文獻。

1.4 文獻篩選

由2 名研究者獨立將文獻檢索所得的研究報告導入NoteExpress 軟件剔除重復，通過閱讀題目和摘要進行初步篩選，交叉核對后下載文獻并逐篇篩查，最后確定本研究所納入的研究報告。

1.5 數據提取

將納入文獻基本信息、中藥處方等信息錄入Microsoft Excel 2019 建立數據庫，由2 名研究人員共同完成。

1.6 數據規范化處理

依據《中華人民共和國藥典》（2020 年版）[7]、《中華本草》[8]和《中藥學》[9]對處方涉及中藥的名稱、性味、歸經及功效類別進行規范，如“山萸肉”統一為“山茱萸”，“微寒”統計為“寒”等；中藥炮制后功效和性味等會發生改變，遂分開統計，如“白芍”與“炒白芍”。

1.7 數據分析

使用Microsoft Excel 2019 對處方涉及藥物及其藥性、藥味、歸經、功效類別進行藥物頻次分析；基于SPSS Modeler 18.0 軟件，通過Apriori 算法建模對處方所含中藥進行關聯規則分析；采用SPSS Statistics 26.0軟件對高頻中藥進行系統聚類分析；運用SPSS Modeler 18.1 和Cytoscape 3.9.1 軟件對處方所含中藥進行復雜網絡分析。

2 結果

2.1 檢索結果

共檢索文獻772 篇，整合剔重后得到385 篇，根據納排標準篩除307 篇，最終納入78 篇，包含中藥處方78 首。

2.2 用藥頻次分析

共78 首中藥處方，涉及中藥133 味，累計頻次734。其中頻次≥15 的中藥共13 味，累計使用頻次347，占47.28%；使用頻次排第1 位的中藥為大黃。見表1。

表1 高頻藥物頻次分析（頻次≥15）

2.3 藥性分析

藥性以寒性和溫性為主；藥味以苦味和甘味為主；歸經以肝經和脾經為主。見圖1～3。

圖1 藥性統計分布

圖2 藥味統計分布

圖3 歸經統計分布

2.4 功效分析

共涵蓋16 種中藥類別，其中排名前3 的類別為活血化瘀、補虛、清熱藥，累計頻率達56.27%。見表2。

表2 藥物功效類別分析

2.5 關聯規則分析

對133 味中藥進行關聯規則分析，設置最低支持度為30%、最低置信度為80%、最大前項為4，選取提升度≥1，按支持度高低排序，得到15 項藥物關聯關系。其中，使用頻次最高的藥對組合為大黃-黃連。見表3。

表3 中藥關聯規則分析

2.6 聚類分析

對使用頻次≥5 的前39 位中藥進行系統聚類分析，聚類方法選擇組間聯接，度量標準區間設置為皮爾遜相關性，得出譜系圖，見圖4。結合相關中醫理論知識可以看出，在皮爾遜相關性為23 位置，可聚為六類：①大黃、黃連、姜黃、莪術、丹參、郁金、雞血藤；②金錢草、茵陳、澤瀉；③半枝蓮、穿心蓮、萆薢、黃芩；④枸杞子、土茯苓、何首烏、柴胡、三七；⑤甘草、人參、黃芪、白術、茯苓、黨參、熟地黃、杜仲、當歸、川芎、紅花、陳皮；⑥鉤藤、天麻、白芍、山茱萸、石菖蒲、遠志、地黃、牡丹皮。

圖4 高頻中藥（前39 位）聚類分析

2.7 復雜網絡分析

對133 味中藥進行復雜網絡分析，設置強鏈接下限為20，弱鏈接上限為10，結果顯示，共有1 664 個藥物鏈接組合，鏈接數設置為6～42，可得到高頻中藥復雜網絡圖，見圖5。鏈接數設置為15～42，可得到核心處方（大黃、黃連、丹參、姜黃、莪術、郁金、澤瀉、金錢草、雞血藤、陳皮、萆薢）復雜網絡圖，見圖6。

圖5 高頻中藥復雜網絡

圖6 核心處方復雜網絡

3 討論

本研究從臨床研究文獻入手，挖掘中醫藥治療HLD 的方藥配伍規律，研究顯示，大黃是使用頻率最高的中藥；藥性以寒、溫性藥物為主，體現“熱者寒之”“寒熱平調”“虛實同治”之意，藥味以苦味居多，苦能泄熱、燥濕，苦寒清熱利濕以治療濕熱證，與本病主要病理因素正虛、濕熱、痰熱、火毒等相符[10]；歸經以肝、脾經為主，肝主疏泄，脾主運化，相互為用，暢達氣機，膽汁化生正常，排出通暢，有助于HLD 患者的治療和恢復。

藥物功效類別以活血化瘀、補虛、清熱藥為主。郁金、姜黃、莪術、川芎等常用活血化瘀藥均有行氣作用，合“治痰先治氣、氣順痰自消”之意，以藥測證，反推本病病理因素可能以銅毒所致的痰瘀、濕熱為重，與多位醫家主張本病銅毒蘊結阻滯氣機，津聚為痰、血滯為瘀，痰可致瘀，瘀又可生痰，日久化生濕熱，最終歸結于痰瘀相符[11-13]。補虛藥多為補肝腎、益氣、養血之品，提示HLD 的主要病因與先天稟賦不足，后天肝腎虧損相關[14-15]。

關聯規則分析顯示，大黃-黃連為治療HLD 的核心關聯配伍。對使用頻次≥5 的前39 位中藥進行系統聚類分析得到6 類，聚類1 為肝豆靈片加減，具有清熱解毒、化瘀軟堅、利膽排銅的功效，適用于HLD痰瘀互結證者。研究表明，其具有改善認知記憶損害，促進肝、腎、神經功能恢復的作用[16-17]。聚類2 具有清熱利濕、利膽退黃之功，以藥測證，反推本病伴有黃疸的患者中醫病機可能為濕熱瘀阻。聚類3 為肝豆湯加減，具有清熱化濕、通腑利尿作用，適用于HLD 濕熱內蘊證者，其能多層次、多靶點降低HLD 肝纖維化的病理損害過程，減輕銅對肝臟的損傷過程，也可阻斷高銅誘導的神經元損傷，發揮神經保護作用[18-20]。聚類4 為肝豆扶木湯加減，適用于HLD 肝纖維化患者，其不僅具有抗肝纖維化的作用，尚有抗凋亡、抗感染、調節脂代謝等生物學功能[21-22]。聚類5 為補中益氣湯合桃紅四物湯加減，多應用于HLD 脾功能亢進脾切除術后患者。研究發現，其可有效改善周圍血象、肝功能，降低門靜脈系統血栓的發生率[23-24]。聚類6 具有清熱平肝、育陰潛陽之功，用于銅毒所致肝脾腎等臟腑受累，濕熱內生，蘊久化風，陽亢氣逆，該類大多為中醫藥探索該病癥階段的組方診療思路[25]。復雜網絡分析結果顯示，大黃、郁金、萆薢、莪術、澤瀉、姜黃、金錢草、丹參、黃連、雞血藤、陳皮為網絡的核心節點，以核心處方隨證加減，可為中醫藥治療HLD 的進一步臨床應用和新藥研發提供思路。

綜合本研究結果可知，HLD 病位在肝，與脾相關，以正虛為其病因基礎，主要病機是本虛標實，虛實夾雜，治療應以化血瘀、祛痰濁、清濕熱、排銅毒為原則，臨證可以本研究得出的核心處方為基礎方，結合辨證加減，為臨床應用提供參考。不足之處在于，本研究僅納入了HLD 臨床研究類文獻，具有一定的局限性，在接下來的研究工作中應追本溯源，重視醫案古籍的文獻學研究，進一步驗證所得研究結果。