東?？h小規(guī)模蛋雞養(yǎng)殖場(chǎng)高致病性禽流感抗體檢測(cè)與分析

閆穎穎，陳士星，胡傳利，李艷陽，陳新華

（1.江蘇省東海縣畜牧獸醫(yī)站，江蘇 東海 222300；2.江蘇省東?？h石榴街道農(nóng)村經(jīng)濟(jì)和農(nóng)業(yè)技術(shù)服務(wù)中心，江蘇 東海）

禽流感是嚴(yán)重危害養(yǎng)禽業(yè)發(fā)展的烈性傳染病，尤其是高致病性禽流感的發(fā)病率和致死率均較高，一旦發(fā)生，對(duì)養(yǎng)殖業(yè)造成巨大的危害和經(jīng)濟(jì)損失，被世界動(dòng)物衛(wèi)生組織認(rèn)定為A 類動(dòng)物疫病，我國也將其列為一類動(dòng)物疫病[1]。目前，我國對(duì)高致病性禽流感采取強(qiáng)制免疫的方式進(jìn)行防控。東?？h是傳統(tǒng)的蛋雞養(yǎng)殖縣，蛋雞養(yǎng)殖多為存欄1～3 萬羽的小規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)。為全面評(píng)估東?？h小規(guī)模蛋雞養(yǎng)殖場(chǎng)高致病性禽流感免疫效果，本研究收集了47 個(gè)小規(guī)模蛋雞養(yǎng)殖場(chǎng)在不同時(shí)間的血清樣本共計(jì)1 460 份，并進(jìn)行了檢測(cè)分析，以期為本地區(qū)更好地防控高致病性禽流感提供理論依據(jù)和參考。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 血清采集 血清樣本來源轄區(qū)內(nèi)的小規(guī)模蛋雞養(yǎng)殖場(chǎng)，免疫注射的高致病性禽流感疫苗均為政府采購疫苗（青島易邦、吉林冠界、哈藥），分別于于4 月、8 月、12 月采集血清樣本1 460 份，見表1。

表1 采樣情況

1.1.2 器材 采血器、離心機(jī)、2 mL 離心管、微量移液器、96 孔V 型微量凝集試驗(yàn)板、微量振蕩器等。

1.1.3 試劑 高致病性禽流感H5N6 Re-13、H5N8 Re-14、H7N9 Re-4 血凝抑制試驗(yàn)抗原及陰陽性血清。

1.2 方法

抗體檢測(cè)參照《高致病性禽流感診斷技術(shù)》（GB/T 18936-2020），采用血凝與血凝抑制試驗(yàn)（HA/HI）對(duì)血清樣品進(jìn)行禽流感抗體檢測(cè)?？贵w效價(jià)≥24（4log2）判定為免疫合格，標(biāo)準(zhǔn)差與平均值的比值（變異系數(shù)）可反映出抗體效價(jià)的離散度。

2 結(jié)果

2.1 不同時(shí)間高致病性禽流感抗體檢測(cè)合格率

東?？h小規(guī)模蛋雞養(yǎng)殖場(chǎng)不同時(shí)間高致病性禽流感抗體檢測(cè)合格率見表2。

表2 高致病性禽流感不同時(shí)間檢測(cè)合格率

由表2 可知，東?？h小規(guī)模蛋雞場(chǎng)4 月檢測(cè)高致病性禽流感487 份，H5N6 Re-13 抗體合格數(shù)為452 份，抗體合格率為92.81%，H5N8 Re-14抗體合格數(shù)為446 份，抗體合格率為91.58%，H7N9 Re-4 抗體合格數(shù)為441 份，抗體合格率為90.55%；8 月檢測(cè)462 份，H5N6 Re-13 抗體合格數(shù)為395 份，抗體合格率為85.50%，H5N8 Re-14 抗體合格數(shù)為 382 份，抗體合格率為82.68%，H7N9 Re-4 抗體合格數(shù)為394 份，抗體合格率為85.28%；12 月檢測(cè)511 份，H5N6 Re-13 抗體合格數(shù)為 497 份，抗體合格率為97.26%，H5N8 Re-14 抗體合格數(shù)為505 份，抗體合格率為98.93%，H7N9 Re-4 抗體合格數(shù)為495 份，抗體合格率為96.87%。

由圖1 可知，12 月高致病性禽流感免疫抗體合格率最高，平均97.65%，8 月高致病性禽流感免疫抗體合格率最低，平均84.49%。

圖1 不同時(shí)間段禽流感抗體檢測(cè)結(jié)果

2.2 高致病性禽流感抗體滴度

東?？h小規(guī)模蛋雞養(yǎng)殖場(chǎng)高致病性禽流感抗體滴度見表3。

表3 高致病性禽流感檢測(cè)抗體滴度

由表3 可知，東?？h小規(guī)模蛋雞養(yǎng)殖場(chǎng)高致病性禽流感抗體合格率均達(dá)到了農(nóng)業(yè)部規(guī)定（≥70%）的標(biāo)準(zhǔn)，但是整個(gè)群體的抗體滴度不整齊，存在較大差異。12 月的樣品抗體滴度最高，H5N6 Re-13、H5N8 Re-14、H7N9 Re-4 的抗體滴度平均值達(dá)到了8.23、8.46、8.35。從全年的情況來看，8 月的抗體滴度平均值最低，與12 月的抗體滴度平均值相比，兩者差異顯著（P＜0.01）。

2.3 不同廠家高致病性禽流感抗體檢測(cè)合格率

東?？h小規(guī)模蛋雞養(yǎng)殖場(chǎng)不同廠家高致病性禽流感抗體檢測(cè)合格率見表4。

表4 不同廠家高致病性禽流感抗體檢測(cè)合格率

由表4 可知，不同疫苗廠家高致病性禽流感抗體合格率均超過農(nóng)業(yè)部規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)，差異不明顯（P＞0.05）。

3 討論

高致病性禽流感是影響?zhàn)B禽業(yè)健康發(fā)展的一個(gè)重要因素，并且對(duì)公共衛(wèi)生安全產(chǎn)生很大的威脅，強(qiáng)制免疫工作是避免和減少疫情發(fā)生的關(guān)鍵[2]。動(dòng)物免疫抗體監(jiān)測(cè)是疫病監(jiān)測(cè)、免疫質(zhì)量評(píng)估、疫情預(yù)警、疫病控制等工作的重中之重[3]。

從檢測(cè)結(jié)果來看，東海縣小規(guī)模蛋雞養(yǎng)殖場(chǎng)4 月、8 月和12 月高致病性禽流感的免疫抗體合格率都比較高，免疫應(yīng)答效果顯著，群體合格率超過國家規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)防控高致病性禽流感提供有效的免疫保護(hù)作用[4]。其中8 月高致病性禽流感免疫抗體合格率較低為84.49%，這可能是由于8 月的時(shí)候天氣炎熱，養(yǎng)殖場(chǎng)的免疫人員將疫苗從冰箱里拿出后直接免疫，導(dǎo)致雞體免疫應(yīng)答效果不好而導(dǎo)致免疫失敗，建議在夏季進(jìn)行疫苗免疫接種應(yīng)選擇早晚氣溫較低時(shí)進(jìn)行。12 月抗體合格率較高，這可能是由于下半年天氣寒冷，是禽流感的高發(fā)期，養(yǎng)殖戶比較重視免疫接種工作。

小規(guī)模蛋雞養(yǎng)殖場(chǎng)的飼養(yǎng)管理、免疫接種工作主要由養(yǎng)殖場(chǎng)主自己進(jìn)行，很少請(qǐng)專業(yè)的防疫人員和技術(shù)人員，因此，受免疫注射規(guī)范性、接種劑量以及雞體的個(gè)體差異，雞群高致病禽流感抗體滴度高低不齊，群體免疫抗體狀況不均勻。

從對(duì)不同廠家的樣品檢測(cè)結(jié)果來看，三個(gè)廠家的高致病性禽流感免疫抗體合格率沒有明顯差異，表明強(qiáng)制免疫政府采購疫苗免疫抗體均能達(dá)到農(nóng)業(yè)部規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)，免疫效果較好，可以防控禽流感的侵襲。

4 結(jié)論

東?？h小規(guī)模蛋雞養(yǎng)殖場(chǎng)高致病性禽流感免疫抗體合格率已經(jīng)達(dá)到國家標(biāo)準(zhǔn)，同時(shí)，應(yīng)對(duì)小規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)戶開展技術(shù)培訓(xùn)和指導(dǎo)，規(guī)范其免疫操作。定期開展采樣檢測(cè)活動(dòng)，開展高致病性禽流感免疫抗體效價(jià)評(píng)估，提高防疫密度和防疫質(zhì)量，筑牢免疫屏障，有效控制禽流感疫情的發(fā)生[5]。