電針預處理對老齡大鼠長期術(shù)后認知功能障礙影響及相關(guān)機制

王志剛, 苑進革, 徐朋, 張輝, 劉盼盼, 王曉茹, 陳永學, 王秋筠

(1.邯鄲市中心醫(yī)院麻醉科, 邯鄲 056008; 2.河北醫(yī)科大學附屬第三醫(yī)院日間手術(shù)部; 石家莊 050051)

術(shù)后認知功能障礙(postoperative cognitive dysfunction,POCD)是一種常見的術(shù)后并發(fā)癥,嚴重威脅著患者尤其是老年人的生活質(zhì)量。有報道稱,術(shù)后認知功能障礙對老年患者有著長期的影響,長期的術(shù)后認知功能障礙可發(fā)展為不可逆的癡呆[1]。有統(tǒng)計數(shù)據(jù)顯示老年患者接受外科手術(shù)后,33.6% 的患者持續(xù)1年以上的長期的認知功能障礙[2]。目前,術(shù)后認知功能障礙的發(fā)生機制尚未清楚,但神經(jīng)炎癥起著關(guān)鍵作用已被證實[1]。小膠質(zhì)細胞是腦內(nèi)主要常駐免疫細胞,無菌損傷引起海馬中小膠質(zhì)細胞進一步被激活,釋放促炎因子,加劇神經(jīng)炎癥并最終導致認知功能的下降[3]。小膠質(zhì)細胞-神經(jīng)炎癥-認知功能障礙通路成為研究的熱點。

有研究報道,電針(electroacupuncture)可以減輕偏頭痛模型中大鼠的面部異常疼痛,其機制可能與抑制小膠質(zhì)細胞活化有關(guān)[4]。電針可以減輕神經(jīng)炎癥,改善老齡大鼠術(shù)后認知功能障礙[5]。目前關(guān)于電針改善術(shù)后認知功能障礙的相關(guān)機制仍不明確,并且相關(guān)基礎研究大多在對術(shù)后早期認知功能障礙的觀察,對于術(shù)后長期認知功能障礙的研究還未見報道。鑒于此,選擇電針預處理作為干預手段,以脛骨骨折內(nèi)固定術(shù)作為手術(shù)方式,建立大鼠的長期POCD模型,探討電針預處理、神經(jīng)炎癥、長期術(shù)后認知功能障礙的關(guān)系以及其可能機制,并為臨床麻醉實施提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實驗動物和分組

20月齡的SD(Sprague-Dawley)雄性大鼠(SPF級),質(zhì)量 400～500 g,共60只,購于河北醫(yī)科大學動物飼養(yǎng)中心。所有動物實驗過程均按照中國實驗動物操作規(guī)范進行操作。維持飼養(yǎng)環(huán)境干凈衛(wèi)生,溫度保持在約22 ℃,相對濕度50%,保持每日 12 h 光照,晝夜循環(huán)(光照時間每日6:00—18:00),提供充足的食物和水。保持飼養(yǎng)環(huán)境干凈衛(wèi)生,墊料干燥。為避免環(huán)境影響,適應一周后開始實驗。隨機分為以下5組(n=12):假手術(shù)組(S組)、模型組(M組)、電針組(EA組)、銀環(huán)蛇毒+電針組(Y+EA組)、銀環(huán)蛇毒+模型組(Y+M組)。

1.2 主要試劑與儀器

尼氏染色液(碧云天,上海),山羊抗Iba1抗體(Abcam公司,英國),兔抗鼠GAPDH 抗(北京索萊寶科技,北京),小鼠抗IL-6抗體 (碧云天,上海),兔抗鼠 IL-1β抗體( 北京索萊寶科技,北京),ECL發(fā)光試劑盒 (吉賽生物科技,廣州),兔抗NF-κB抗體( Affinity Bioscience公司,美國)。G6805電針儀(華宜醫(yī)用儀器,上海),熒光顯微鏡( 明美光電技術(shù)公司,廣州),光顯微鏡(奧林巴斯 Olympus,日本),電泳儀及電泳槽(伯樂biorad,美國),轉(zhuǎn)膜儀(北京六一儀器,北京),Image Pro Plus 6.0 圖像 分析系統(tǒng)(美國 Media Cybernetics 公司)。

1.3 模型建立

(1)模型組(M組)。參照文獻[6]建立POCD模型。大鼠進行稱重后,放入麻醉誘導箱中,打開氧氣至2 L/min,同時打開七氟烷揮發(fā)罐至7%刻度,向麻醉箱中輸入七氟烷和氧氣。待大鼠翻正反射消失,取出麻醉箱中的大鼠,并置于帶有加熱板的手術(shù)臺上,保持仰臥體位,麻醉機螺紋管連接大鼠麻醉面罩,將麻醉面罩扣住大鼠鼻部并固定,維持4%七氟烷保持大鼠自主呼吸,觀察大鼠呼吸頻率、鼻唇顏色。選取左側(cè)后肢,于前外側(cè)脛骨骨干中上1/3交界處去毛備皮,碘伏消毒后鋪單,在前外側(cè)脛骨骨干中上1/3交界處注射1%利多卡因后,切開皮膚1.5～2 cm,暴露脛骨骨干,從脛骨平臺前緣插入5 mL注射器針頭并旋轉(zhuǎn)打入脛骨骨干,使用手術(shù)刀在脛骨骨干中1/3交界處截斷脛骨造成骨折,碘伏沖洗消毒,縫合皮膚。手術(shù)結(jié)束關(guān)閉七氟烷,放回籠中觀察,至完全清醒并能活動。手術(shù)操作由同一人完成,整個手術(shù)過程耗時約30 min。

(2)假手術(shù)組(S組)。麻醉過程同模型組完全一致,對照組僅在局麻下切開皮膚后縫合,不進行脛骨骨折內(nèi)固定的手術(shù)操作,待麻醉達到30 min后,關(guān)閉七氟烷,放回籠中觀察,至完全清醒并能活動。

(3)電針組(EA組)。7%七氟醚麻醉誘導后,選取大鼠右側(cè)足三里(ST36)、合谷(LI4)、內(nèi)關(guān)(PC6)進行電針預處理。參照文獻[7]實施電針預處理,選用30號毫針(直徑約0.3 mm),疏密波,頻率 2 Hz/15 Hz,強度 1 mA,持續(xù) 30 min,1次/d,連續(xù)5 d。有效標志為以周圍肌肉輕微收縮為有效。合谷(LI4)位于第1掌骨和第2掌骨之間,直刺1 mm;內(nèi)關(guān)(PC6)位于前肢內(nèi)側(cè)、左右的尺橈骨間、距腕關(guān)節(jié)約3 mm,直刺1 mm;足三里(ST36)位于膝關(guān)節(jié)后外側(cè),脛、腓骨間,距離腓骨小頭約5 mm,垂直刺入5 mm。 第6天進行手術(shù)處理。余同M組。

(4)銀環(huán)蛇毒+電針組(Y+EA組)。實施方法同EA組,但在每次電針預處理刺激前30 min通過腹腔注射α7-nAChR拮抗劑α銀環(huán)蛇毒素(α-BGT)(1 μg/kg溶于1 mL的生理鹽水中)。

(5)銀環(huán)蛇毒+模型組(Y+M組)。在手術(shù)前5 d,每次麻醉后僅腹腔給予1 μg/kg α-BGT,余同模型組。

1.4 取材和指標檢測

1.4.1 新物體識別實驗

參照文獻[8]進行新物體識別實驗。適應階段:在開始訓練之前3 d,每天對將要實驗的大鼠撫摸1 min,避免刺激大鼠,使其對測試者的陌生恐懼感降低,然后放到空測試箱中適應環(huán)境。熟悉階段:在術(shù)后第30天進行, 將A、B兩個物體置于箱體一側(cè)的左右兩側(cè),背朝兩物體,使大鼠鼻尖距離兩物的距離一致。放下大鼠后,開啟錄像迅速撤離房間,觀察10 min。記錄老鼠接觸兩個物體的次數(shù)(用鼻子或嘴接觸物體的次數(shù))和在距離物體2～3 cm范圍內(nèi)探索物體的時間(前爪貼在物體上、用鼻子聞物體、舔物體等)。記錄探索A和B物體時間。位置偏好指數(shù)=探索A物體時間/(探索A+B物體時間)

1.4.2 測試階段

大鼠在測試房休息1 h后開始試驗,物體B被物體C取代,將大鼠放入場地,放入方式同熟悉階段一樣,開啟錄像設備并立即離開,觀察10 min。記錄新物體探索時間、熟悉物體探索時間、大鼠活動總路程和大鼠的活動平均速度。識別系數(shù)=新物體探索時間/(新物體探索時間+熟悉物體探索時間)。

1.4.3 尼氏染色法檢測海馬區(qū)神經(jīng)元形態(tài)及數(shù)目

行為學實驗結(jié)束后,隨機抽取6只大鼠,對大鼠腹腔注射10%水合氯醛(0.35 mL/100 g)麻醉后,使用剪刀剪開胸腔,暴露心臟,插入灌注針。從左心室快速灌注4 ℃的0.9%生理鹽水,待右心耳處流出的液體變?yōu)闊o色后,繼以4 ℃的4%多聚甲醛灌注,灌注完成后,用剪刀快速斷頭取出大腦,模具將腦組織前后切開,浸泡在4%多聚甲醛中4 ℃冰箱中過夜,然后石蠟包埋切片(厚度為 5 μm)。然后進行尼氏染色,室溫下保持干燥一周,在光學顯微鏡(BX51,Olympus) ×400下觀察海馬區(qū)神經(jīng)元尼氏體形態(tài)并計數(shù)。

1.4.4 免疫熒光法觀察小膠質(zhì)細胞激活情況

取出制備好的腦切片組織,脫蠟、抗原修復、一抗孵育,二抗孵育,染核和封片。熒光顯微鏡(MF31;Mshot,廣州)用于觀察切片的病理,采用Image-Pro Plus 6.0 (NIH, Bethesda,MD)分析Iba1-陽性細胞數(shù)量。Sholl analysis用于對MG的Iba1陽性細胞分支長度進行分析。

1.4.5 蛋白質(zhì)印跡法檢測大鼠海馬區(qū)p-NF-κB、IL-6、和IL-1β及受體的蛋白表達情況

大鼠新物體識別試驗測試后,剩余6只大鼠使用10%水合氯醛,進行腹腔注射,麻醉起效后,迅速斷頭開顱取出腦組織,將取出的腦組織放在冰塊上,迅速分離海馬組織,過液氮冷凍后放入標本袋,標記后保存至-80 ℃冰箱存放。從冰箱中取出海馬組織,放置在冰塊上融化。使用顯微手術(shù)剪剪取組織100 mg,放置玻璃勻漿器,加入裂解液。手充分勻漿后移至離心管,冰上30 min裂解。離心,小心抽取上清液到EP管, 二辛可酸(BCA)蛋白濃度測定實驗檢測蛋白濃度, 電泳、轉(zhuǎn)膜、封閉、加入一抗: phospho-NF-κB(1∶1 000 稀釋液),t-NF-κB (1∶1 000 稀釋液)、IL-6 (1∶1 000 稀釋液)、IL-1β (1∶500 稀釋液)、GAPDH(甘油醛-3-磷酸脫氫酶)(1∶1 000稀釋液)孵育,4 ℃冰箱中過夜。加入二抗:羊抗兔(1∶1 000)和羊抗鼠(1∶1 000)室溫下孵育 1 h。增強化學發(fā)光法(ECL)ECL顯色/顯影:將ECL試劑A和B以1∶1混合后均勻涂在聚偏二氟乙烯膜(PVDF)PVDF膜,避光2 min,置入自動顯影儀進行蛋白顯影。數(shù)據(jù)分析,底片掃描后Image-Pro Plus 6.0軟件定量PVDF膜上的蛋白條帶。

1.5 統(tǒng)計分析

2 結(jié)果

2.1 新物體識別實驗

在熟悉階段,五組大鼠位置偏好指數(shù)無顯著差異(P>0.05)。在測試階段,與S組相比較,M組大鼠、EA組、Y+EA組和Y +M組的認知指數(shù)(RI)均明顯降低,且差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05),表明脛骨骨折手術(shù)導致了大鼠的記憶能力的下降;與EA組比較,M組大鼠的認知指數(shù)(RI)同樣明顯降低,且差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05),表明電針預處理降低了手術(shù)導致的認知記憶能力的下降,保護了大鼠的記憶功能;但是Y+EA組與EA組比較,認知指數(shù)(RI)明顯降低(P<0.05),表明α-BGT逆轉(zhuǎn)了電針保護大鼠記憶功能的作用。M組、Y+EA組、Y+M組三組間的認知指數(shù)(RI)并沒有明顯差異(P>0.05)。此外,上述5組大鼠的在測試階段總距離和平均速度無統(tǒng)計學差異,表明大鼠的運動能力并未受到脛骨骨折內(nèi)固定手術(shù)的影響,如圖1所示。

與假手術(shù)組比較,*P<0.05;與電針組比較,12只鼠/組圖1 各組大鼠新物體識別認知指數(shù)比較Fig.1 Comparison of cognition index of new object recognition in each group

2.2 Nissl染色檢測海馬神經(jīng)元數(shù)量

尼氏小體染色形態(tài)學比較:在海馬齒狀回,S組神經(jīng)元細胞形態(tài)正常,排列整齊規(guī)則。M組細胞排列紊亂,部分胞體形狀改變,細胞連續(xù)性中斷,出現(xiàn)明顯間隙。EA組形態(tài)較M組正常,排列較規(guī)則,連續(xù)性較好。Y+EA、Y+M組形態(tài)和排列與M組相似,細胞排列紊亂,部分胞體形狀改變,細胞出現(xiàn)明顯間隙,如圖2所示。

圖2 各組大鼠海馬齒狀回尼氏染色尼氏染色的代表性顯微照片F(xiàn)ig.2 Representative photomicrograph of the dentate gyrus of hippocampi in each group

尼氏小體染色數(shù)目比較:與S組比較,其他4組(M組、EA組、Y+EA組、Y+M組)的尼氏體染色數(shù)目均明顯減少(P<0.05),表明脛骨骨折手術(shù)后導致神經(jīng)元損傷。與EA組比較,M組尼氏染色數(shù)目顯著減少(P<0.05),表明電針預處理降低了脛骨骨折手術(shù)對大鼠神經(jīng)元的損傷。但是受α-BGT干預的Y+EA組的染色數(shù)目也明顯較電針組減少(P<0.05),表明α-BGT部分逆轉(zhuǎn)了電針對神經(jīng)元的保護作用。同時,M組、Y+EA組、Y +M組三組大鼠的尼氏小體染色數(shù)目無明顯差異(P>0.05),如圖3所示。

與假手術(shù)組比較,*P<0.05;與電針組比較,6只鼠/組圖3 各組大鼠尼氏小體數(shù)目比較Fig.3 Comparison of the number of Nissl bodies in each group

2.3 海馬齒狀回激活小膠質(zhì)細胞比較

激活的小膠質(zhì)細胞胞體增大、突起變短反映小膠質(zhì)細胞的活化狀態(tài)。通過免疫熒光染色,觀察海馬齒狀回中激活的小膠質(zhì)細胞的狀態(tài),以Iba1抗體著色(紅色)為陽性指標,如圖4所示。

圖4 各組大鼠齒狀回Iba1染色的代表性顯微照片。Fig.4 Representative micrograph of Iba1 staining in dentate gyrus of rats in each group

使用ImageJ軟件對Iba1陽性細胞進行分析。Iba1陽性細胞數(shù)量比較:與S組相比較,其余4組(M組、EA組、Y+EA組、Y+M組)數(shù)目均增多(P<0.05)。與EA組比較,M組、Y+EA組、Y +M組數(shù)目較多(P<0.05)。M組、Y+EA組、Y +M組3組陽性細胞數(shù)目無明顯差異(P>0.05),如圖5所示。

與假手術(shù)組比較,*P<0.05;與電針組比較,只鼠/組圖5 各組免疫熒光法定量Iba1陽性細胞的數(shù)量比較Fig.5 Comparison of the number of Iba1-positive cells in each group by immunofluorescence assay

利用Sholl Analysis分析Iba1陽性細胞的最長分支長度。Iba1陽性細胞分支長度比較:與S組比較,M組、Y+EA組、Y+M組分支長度均明顯縮短(P<0.05), EA組分支長度與S組無明顯差異;與EA組比較,M組、Y+EA組、Y +M組分支長度均明顯縮短(P<0.05);M組、Y+EA組、Y+M組3組分支長度無明顯差異(P>0.05),如圖6所示。

與假手術(shù)組比較,*P<0.05;與電針組比較,只鼠/組圖6 各組免疫熒光法定量測定Iba1陽性細胞中分支的長度Fig.6 Comparison of branch length of Iba1-positive cells in each group by quantitative immunofluorescence assay

2.4 大鼠海馬區(qū)phosphor-NF-κB,IL-6,和IL-1β蛋白表達情況

phosphor-NF-κB以標準化(phosphor-NF-κB/total NF-κB比值)做比較,IL-6、IL-1β以標準化(IL-6/GAPDH、IL-1β/GADPH比值)做比較。與S組相比較,M組、Y+EA組、Y+M組phosphor-NF-κB、IL-6和 IL-1β蛋白在海馬組織的表達均升高(P<0.05),EA組無顯著差異(P>0.05);與EA組比較,M組、Y+EA組、Y+M組phosphor-NF-κB、IL-6和 IL-1β在海馬組織的表達均升高(P<0.05);M組、Y+EA組、Y+M組phosphor-NF-κB, IL-6, 和 IL-1β在海馬組織的表達均無顯著差異(P>0.05)。phosphor-NF-κB以總NF-κB為內(nèi)參,IL-6和 IL-1β以GAPDH為內(nèi)參,如圖7、圖8所示。

與假手術(shù)組比較,*P<0.05;與電針組比較,6只鼠/組圖7 各組大鼠海馬組織phosphor-NF-κB蛋白表達比較Fig.7 Comparison of phosphor-NF-κB protein expression in hippocampal of rats in each group

與假手術(shù)組比較,*P<0.05;與電針組比較,6只鼠/組圖8 各組大鼠海馬組織IL-6和IL-1β蛋白表達比較Fig.8 Comparison of IL-6 and IL-1β expression in hippocampal of rats in each group

3 討論

研究表明,大鼠的脛骨骨折內(nèi)固定手術(shù)可以啟動POCD的進程,并對認知功能障礙產(chǎn)生顯著的長期影響[9]。同時脛骨骨折內(nèi)固定手術(shù)造模相對簡單,創(chuàng)傷較小,術(shù)后并發(fā)癥較少,存活率較高,已是經(jīng)典的用于誘發(fā)術(shù)后認知功能障礙的模型[10]。手術(shù)后30 d進行的新物體識別實驗顯示,經(jīng)過脛骨骨折內(nèi)固定手術(shù)的老齡大鼠探索新物體的行為明顯減少,表明手術(shù)成功誘導了認知功能障礙。研究發(fā)現(xiàn),脛骨骨折內(nèi)固定術(shù)后小鼠的活動能力隨時間逐漸增強,約在術(shù)后15 d小鼠的活動能力達到術(shù)前水平,而骨痂完全骨化形成在術(shù)后28 d[11]。術(shù)后認知功能障礙影響是一個長期的過程,有研究以術(shù)后7 d(作為短期)和30 d(作為長期)的認知功能障礙的研究[12]。因此,選擇手術(shù)后30 d實施新物體識別實驗來觀察老齡大鼠的認知功能,從而排除脛骨骨折內(nèi)固定手術(shù)對大鼠活動能力的影響。研究結(jié)果表明,術(shù)后30 d大鼠仍存在認知功能減退,表明脛骨骨折內(nèi)固定手術(shù)對術(shù)后認知功能的影響是長期的。結(jié)果顯示,經(jīng)過電針預處理的大鼠盡管與對照組相比,認知指數(shù)仍然發(fā)生了下降,但相較M組,認知指數(shù)仍得到了提高,表明電針預處理部分改善了手術(shù)誘導的認知功能障礙。

基礎實驗證實,手術(shù)能導致術(shù)后中樞的神經(jīng)炎癥,并且其與術(shù)后認知功能障礙有密切的關(guān)系[13]。先前研究表明接受手術(shù)的老齡小鼠海馬中IL-1β表達增加與認知功能下降有關(guān),認知功能下降的老年小鼠海馬IL-6表達明顯升高[12]。接受脛骨骨折手術(shù)的M組大鼠海馬組織中炎癥因子phosphor-NF-κB,IL-β、IL-6蛋白表達明顯升高,表明外周手術(shù)導致了大鼠海馬炎癥的發(fā)生,而手術(shù)前經(jīng)過電針預處理的大鼠海馬組織中炎癥因子IL-β、IL-6、和phosphor-NF-κB的表達均明顯降低,表明電針預處理降低了手術(shù)導致的海馬的神經(jīng)炎癥,這也同之前研究結(jié)果一致[7]。

小膠質(zhì)細胞功能的衰老被認為在神經(jīng)退行性疾病中起著基礎作用[14]。大腦中參與固有免疫的主要是小膠質(zhì)細胞,也是中樞分泌促炎因子的主要來源[15]。小膠質(zhì)細胞在非病理條件下表現(xiàn)為靜止監(jiān)視表型,一旦檢測到病原體或內(nèi)源性危險信號,小膠質(zhì)細胞就會發(fā)生快速的形態(tài)和功能改變,從而引發(fā)炎癥反應[16]。老齡大鼠在遭遇外周免疫刺激后的長期神經(jīng)炎癥反應主要是由海馬小膠質(zhì)細胞介導的[17]。在感知促炎因子和異常蛋白的變化時,小膠質(zhì)細胞表型從靜止狀態(tài)轉(zhuǎn)變?yōu)榉磻獱顟B(tài),在激活過程中,小膠質(zhì)細胞在形態(tài)和功能上都發(fā)生了典型的構(gòu)象變化[18]。結(jié)果表明,術(shù)后大鼠海馬齒狀回Iba1陽性細胞數(shù)目明顯增多,且小膠質(zhì)細胞突起的最長分支長度顯著縮短,體積變的矮胖。然而,術(shù)前經(jīng)過電針預處理后的大鼠海馬齒狀回激活的Iba1陽性細胞數(shù)目顯著降低,并且小膠質(zhì)細胞形態(tài)未發(fā)生顯著改變,表明電針預處理抑制了小膠質(zhì)細胞的激活。研究表明,由小膠質(zhì)細胞激活引起的炎癥反應導致細胞核微環(huán)境發(fā)生顯著改變,從而導致神經(jīng)元變性和數(shù)量減少[19]。尼氏染色結(jié)果也顯示脛骨骨折內(nèi)固定手術(shù)后大鼠海馬神經(jīng)元數(shù)量減少,而電針預處理恢復了手術(shù)創(chuàng)傷導致的神經(jīng)元數(shù)量的減少。

用特異性α7nAChR阻滯劑α銀環(huán)蛇毒素(α-BGT)阻斷α7nAChR 或?qū)⑿∈?α7nAChR 亞基基因敲除,結(jié)果顯示小鼠對炎癥均表現(xiàn)出高度敏感,同時外周血促炎因子水平均顯著升高,表明 α7nAChR 是介導膽堿能抗炎通路上的核心分子[20]。使用α7nAChR激動劑后顯示免疫細胞產(chǎn)生的 TNF-α、IL-1、HMGB1 等促炎因子明顯抑制,這可能是α7nAChR 介導抗炎作用的機制之一。已有研究證實電針可能激活大鼠膽堿能抗炎通路,抑制炎癥反應[21]。為了觀察電針是否通過膽堿能抗炎通路抑制脛骨骨折術(shù)后的神經(jīng)炎癥和認知功能,使用了α7nAChR的拮抗劑α銀環(huán)蛇毒素(α-BGT),行為學測試和病理學觀察都證實使用α-BGT逆轉(zhuǎn)了電針預處理的保護作用。表明電針預處理可能是通過激活α7nAChR介導的膽堿能抗炎通路而降低老齡大鼠脛骨骨折術(shù)后神經(jīng)炎癥反應。在單純給予α-BGT的Y+M組,其并沒有表現(xiàn)出比M組更壞的結(jié)果,這可能是術(shù)前應用α7nAChR阻滯劑并沒有影響手術(shù)導致的膽堿能抗炎系統(tǒng)抑制。

足三里、合谷、內(nèi)關(guān)穴都與腦有著密切關(guān)系。電針內(nèi)關(guān)穴、足三里可通過抑制腦缺血再灌注大鼠海馬區(qū)神經(jīng)元的炎癥和壞死,改善腦缺血再灌注大鼠的神經(jīng)損傷[22]。有研究利用fMRI成像顯示,針刺合谷穴可改變輕度認知障礙或阿爾茨海默病患者顳葉和額葉的活動,而這些區(qū)域與記憶和認知有關(guān)[23]。圍術(shù)期穴位電刺激合谷、內(nèi)關(guān)顯著緩解了老年腔隙性梗死患者手術(shù)后譫妄發(fā)生率[24]。針灸足三里改善阿爾茨海默病小鼠的神經(jīng)元軸突結(jié)構(gòu)并改善空間學習記憶能力[25]。研究證實刺激足三里能激活迷走神經(jīng)-腎上腺通路,使身體釋放抗炎物質(zhì)[26]。選擇這3個穴位進行電針預處理,結(jié)果表明,其能改善脛骨骨折內(nèi)固定術(shù)后大鼠的認知功能。

4 結(jié)論

(1)大鼠脛骨骨折手術(shù)模型可以導致術(shù)后海馬神經(jīng)炎癥,并造成老齡大鼠長期術(shù)后認知功能障礙。

(2)電針預處理能夠減弱脛骨骨折術(shù)后大鼠腦內(nèi)神經(jīng)炎癥反應并改善長期術(shù)后認知功能障礙。

(3)電針改善大鼠脛骨骨折手術(shù)后長期認知功能障礙的機制可能是通過激活α7nAChR介導的膽堿能 抗炎通路。