CYP19A1基因多態(tài)性與老年乳腺癌患者遺傳易感性及臨床病理特征的相關(guān)性

張柯媛 陳基強 黃艷 盧庭婷

(廣西衛(wèi)生職業(yè)技術(shù)學院,廣西 南寧 530021)

乳腺癌是常見的女性惡性腫瘤,一項流行病學調(diào)查發(fā)現(xiàn),2009～2018年女性乳腺癌患病率逐年升高,患病年齡以45～49歲為高發(fā)〔1〕。目前乳腺癌常見治療方法包括手術(shù)治療、內(nèi)分泌治療及化療等,雖然具有一定療效,但仍有部分患者治療后發(fā)生腫瘤進展,預(yù)后不佳。研究證實,乳腺癌的發(fā)病與遺傳因素密切相關(guān)〔2〕。細胞色素氧化代謝酶系19A1亞族(CYP19A1)蛋白質(zhì)可催化雌激素生物合成,且有研究表明,女性乳腺癌患者外周血CYP19A1基因表達在疾病復(fù)發(fā)中起到重要作用〔3〕。初步推測CYP19A1基因多態(tài)性與乳腺癌發(fā)生、進展有關(guān)。本研究就CYP19A1基因上rs4646基因多態(tài)性與乳腺癌患者遺傳易感性、臨床病理特征的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2020年3月至2022年3月廣西醫(yī)科大學附屬腫瘤醫(yī)院收治的112例老年乳腺癌患者作為觀察組。納入標準:①乳腺癌符合《中國抗癌協(xié)會乳腺癌診治指南與規(guī)范(2015版)》〔4〕內(nèi)相關(guān)診斷標準;②接受手術(shù)治療,并經(jīng)病理性檢查明確診斷;③乳腺癌腫瘤淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(TNM)分期〔5〕Ⅰ～Ⅲ期。排除標準:①合并其他乳腺疾病;②合并其他惡性腫瘤;③接受過乳腺癌相關(guān)放化療治療;④合并內(nèi)分泌系統(tǒng)疾病或代謝性疾病;⑤合并高血壓、糖尿病等慢性疾病;⑥合并嚴重心腦、肝腎功能異常;⑦近期內(nèi)接受過激素類藥物治療。另選取112例老年乳腺良性病變患者作為對照組,其中包括乳房纖維腺瘤57例,乳腺內(nèi)乳頭狀瘤21例,乳腺脂肪瘤34例,均符合相關(guān)診斷〔6〕。全部患者簽署知情同意書。

1.2基線資料、臨床病理特征收集 于兩組入院當日收集其年齡、體質(zhì)量指數(shù)(BMI)、絕經(jīng)情況、大量飲酒(每日飲酒量超過20 g或2 w內(nèi)每日飲酒超過80 g)。經(jīng)手術(shù)及術(shù)后病理檢查評估乳腺癌患者臨床病理特征,包括病理類型(浸潤性導(dǎo)管癌、非浸潤性導(dǎo)管癌)、TNM分期(Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(陽性、陰性);行免疫組化檢驗,包括雌激素受體(ER)、孕激素(PR)、人表皮生長因子受體(HER)-2、增殖細胞相關(guān)抗原(Ki67),各項指標陽性判定依據(jù)參照2013年St Galllen共識〔7〕。

1.3CYP19A1基因多態(tài)性檢測 于患者入院當日或次日清晨,使用乙二胺四乙酸二鉀抗凝管采集空腹靜脈血5 ml,使用自動化核酸提取劑與儀器配套提取基因組DNA,采用Taqman探針實時熒光聚合酶鏈式反應(yīng)等位基因技術(shù)測定rs4646位點基因型,并用聚合酶鏈式反應(yīng)直接測序法測定CYP19A1 rs4646多態(tài)性,引物序列:正向:5′-CATGAAGTGTAGGGTCTATGTAAT-3′,反向:5′-GATCTTTACACACCTCTACACAGT-3′,擴增條件:94 ℃ 10 min初變性,95 ℃ 30 s、54.5 ℃ 30 s、72 ℃30 s、72 ℃延伸1 min,共36個循環(huán),隨后進行瓊脂糖凝膠電泳,并進行基因測序。

1.4統(tǒng)計學方法 采用SPSS25.0軟件進行t、χ2、秩和檢驗,Logistic回歸分析、χ2Phi系數(shù)檢驗。

2 結(jié) 果

2.1兩組一般資料、CYP19A1基因多態(tài)性比較 觀察組BMI、大量飲酒占比、CYP19A1 r4646位點基因C/C突變占比明顯高于對照組(P<0.01,P<0.001);組間年齡、絕經(jīng)情況比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。見表1。

表1 兩組一般資料、CYP19A1基因多態(tài)性比較

2.2CYP19A1基因多態(tài)性與老年乳腺癌患者遺傳易感性的關(guān)系分析 將疾病類型作為因變量(1=乳腺癌,0=乳腺良性病變),將BMI、大量飲酒(有=1,無=0)、CYP19A1基因多態(tài)性(A/A=1,A/C=2,C/C=3)作為自變量,經(jīng)Logistic回歸分析結(jié)果顯示,BMI偏高、大量飲酒、CYP19A1 r4646位點基因多態(tài)性與老年乳腺癌患者的遺傳易感性有關(guān)(OR>1,P<0.05)。見表2。

表2 CYP19A1基因多態(tài)性與老年乳腺癌患者遺傳易感性的關(guān)系

2.3不同病理特征乳腺癌患者CYP19A1基因多態(tài)性比較 不同TNM分期、ER、PR、HER-2、Ki67表達的乳腺癌患者CYP19A1基因多態(tài)性比較,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表3。

表3 不同病理特征患者CYP19A1基因多態(tài)性比較〔n(%)〕

2.4乳腺癌患者CYP19A1基因多態(tài)性與病理特征的相關(guān)性 CYP19A1基因多態(tài)性與乳腺癌患者TNM分期、ER陽性、PR陽性、HER-2陽性、Ki67陽性具有相關(guān)性(Phi=0.293、0.295、0.423、0.294、0.381,均P<0.05)。

3 討 論

乳腺癌發(fā)生于乳腺上皮細胞,發(fā)病與環(huán)境、生理、心理及基因等因素有關(guān),早期乳腺癌的臨床癥狀并不明顯,大部分患者確診時已進展至中晚期,治療效果及預(yù)后并不理想。弋振營等〔8〕研究中,200例乳腺癌患者隨訪3年,總生存率為90.50%,無病生存率為71.00%,乳腺癌患者的預(yù)后與不同臨床分期、浸潤性導(dǎo)管癌、絕經(jīng)情況及術(shù)后放化療等密切相關(guān)。

大量飲酒患者由于酒精在體內(nèi)代謝為乙醛,具有一定的致癌性,且酒精可引起機體葉酸缺乏,并導(dǎo)致脂質(zhì)過氧化,促進氧自由基產(chǎn)生,進而增加乳腺癌的患病風險〔9〕。BMI偏高的患者體內(nèi)脂質(zhì)會參與細胞膜的構(gòu)成及細胞膜信號傳導(dǎo),引起腫瘤相關(guān)的代謝反應(yīng),導(dǎo)致乳腺癌的發(fā)生風險增加〔10〕。因此,應(yīng)加強戒酒、控制體質(zhì)量管理等措施,降低乳腺癌的患病風險。但除了常見的增加乳腺癌患病風險的因素外,仍需要積極尋找乳腺癌的發(fā)病機制有關(guān)的遺傳因素,以進一步明確乳腺癌的發(fā)生、進展,有利于早期診斷、治療。

乳腺癌的發(fā)生機制與ER、PR密切相關(guān),由于受到ER、PR的DNA二倍體調(diào)控,可導(dǎo)致乳腺癌的發(fā)生,并促進腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移,影響乳腺癌患者預(yù)后〔11〕。位于染色體15q21.1上的CYP19A1基因是CYP450超家族成員之一,為激素代謝相關(guān)酶,其編碼的CYP450芳香化酶對雌激素合成具有重要作用,可將雌激素A環(huán)芳香化,將睪酮、雄烯二酮分別轉(zhuǎn)變?yōu)榇贫肌⒋仆?且CYP450數(shù)量活性直接影響雌激素水平〔12〕。因此,推測CYP19A1基因多態(tài)性可能與乳腺癌患者遺傳易感性有關(guān)。本研究經(jīng)Logistic回歸分析結(jié)果分析原因在于,CYP19A1基因可對CYP450芳香化酶進行編碼,基因的突變會直接影響該酶的活性與蛋白結(jié)構(gòu),導(dǎo)致CYP450芳香化酶失活,進而影響雌二醇分泌,進一步增加乳腺癌的患病風險〔13〕。一項文獻指出,CYP19A1基因表達或CYP450芳香化酶活性增強是增加乳腺癌腫瘤內(nèi)雌激素產(chǎn)生的重要途徑,可促進乳腺癌的患病風險及腫瘤的侵襲性〔14〕。

HER-2可調(diào)節(jié)細胞的增殖、凋亡,對腫瘤細胞轉(zhuǎn)化具有活性;Ki67是與細胞周期相關(guān)的增生細胞核抗原,是腫瘤細胞增殖的標志之一〔15〕。本研究結(jié)果說明,CYP19A1基因多態(tài)性與乳腺癌患者臨床病理特征有關(guān)。CYP19A1基因的C等位基因可增強芳香化酶活性,通過影響患者體內(nèi)雌激素水平及激素的動態(tài)平衡,引起正常乳腺上皮細胞轉(zhuǎn)化為癌細胞,并且可促進ER、PR陽性的乳腺癌細胞增殖、侵襲,導(dǎo)致腫瘤進展〔16,17〕。此外,有研究表明,CYP19A1基因rs4646位點的單核苷酸突變會影響基于芳香酶抑制劑治療的乳腺癌患者治療效果及不良反應(yīng)的易感性〔18〕。進一步說明CYP19A1基因多態(tài)性不僅與乳腺癌患者遺傳易感性、臨床病理特征有關(guān),也可作為預(yù)測乳腺癌患者治療效果、預(yù)后的重要標志物。因此,針對乳腺癌患病高風險人群,可早期檢測其CYP19A1基因,通過CYP19A1基因多態(tài)性,評估其乳腺癌的遺傳易感性,或?qū)YP19A1基因作為早期診斷乳腺癌、評估疾病進展及預(yù)后的重要標志物。

綜上,CYP19A1基因多態(tài)性與老年乳腺癌患者遺傳易感性及腫瘤分期、HER-2表達、Ki67表達有關(guān),臨床可根據(jù)CYP19A1基因多態(tài)性的分布作為女性乳腺癌的易感基因檢測位點,為早期診斷乳腺癌提供依據(jù)。本研究也存在不足,首先納入患者排除了晚期乳腺癌,且研究對象均來自同一醫(yī)院,結(jié)果可能存在偏倚;其次僅針對CYP19A1基因rs4646位點進行研究,未觀察其他基因位點與乳腺癌的關(guān)系;最后未對CYP19A1基因多態(tài)性與乳腺癌患者治療效果及預(yù)后的關(guān)系進行闡述,未來仍需要深入研究。