基于斑馬魚模型的中藥抗骨質疏松的研究進展

王 璇，陳林珍，林瑞超，陶曉宇，于 雪，張淑靜，范琦琦，李芝奇，戴勝云，李向日*，趙崇軍*

基于斑馬魚模型的中藥抗骨質疏松的研究進展

王 璇1，陳林珍1，林瑞超1，陶曉宇1，于 雪2，張淑靜2，范琦琦1，李芝奇1，戴勝云3，李向日1*，趙崇軍1*

1. 北京中醫藥大學 中藥品質評價北京市重點實驗室，北京 102488 2. 北京中醫藥大學，北京 102488 3. 中國食品藥品檢定研究院，北京 102629

骨質疏松癥（osteoporosis，OP）是一種以骨密度降低、骨骼微結構改變和骨質脆弱增加為特征的骨骼疾病。由于老齡化問題的逐漸加重，OP的發病率在全球范圍內迅速增加。中藥在預防和治療OP中表現出極好的前景和臨床效果，然而傳統動物模型具有耗時長、費用昂貴、無法準確概括骨疾病復雜性等缺點，很大程度上限制了臨床前OP疾病的研究進程。而斑馬魚模型可有效模擬人類骨質減少和OP表型，通過對斑馬魚模型在治療OP研究中的優勢和適用性及該模型在中藥抗OP的研究進展進行綜述，為斑馬魚模型的廣泛使用及中藥新藥研發提供參考。

斑馬魚；骨質疏松；中藥；藥對；中藥復方；藥物篩選

骨質疏松癥（osteoporosis，OP）是常見的骨骼疾病，也是現代社會長期困擾患者的基礎疾病之一。近年來，中醫藥治療OP已顯現出巨大優勢。然而，中藥化學成分復雜，不同化學成分的活性、靶點及作用途徑往往各不相同，因此在中藥抗OP的研究中，亟需一種新的動物模型研究中藥調控骨合成代謝或抗再吸收化合物的發現和篩選。斑馬魚因其早期發育的光學透明性、與人類在生理學和遺傳學的相似性及高通量優勢，成為骨骼研究的模式生物，并隨著深入研究表現出愈發明顯的優勢。本文主要對近年來斑馬魚在中藥抗OP方面的研究進展進行綜述，為完善基于斑馬魚模型的中藥OP評價技術與方法，進一步促進斑馬魚在中藥研究中的廣泛應用提供參考。

1 OP的流行病學及治療策略

OP是老年人群中常見的骨骼代謝性疾病，其特征是骨密度低、骨結構惡化，致使意外骨折頻率增加。作為一種高患病率疾病，隨著老齡化人口的增加，OP的流行性逐步增加，預計2040年，將有超過3.2億人處于高骨折風險狀態；到2050年，全世界男性髖部骨折的發病率將增加310%，女性將增加240%[1-2]。盡管飲食、運動、藥物等在內的一系列可調節因素均可導致年齡相關性骨質丟失，但原發性骨質丟失往往由遺傳因素介導。由于OP相關性狀的遺傳度變化范圍較大，使得對該層面的研究存在較大難度，進而導致OP的分子機制目前尚未明確。

OP主要是由成骨細胞相關的骨形成活性和破骨細胞相關的骨吸收活性間的穩態失衡引起的[3]。目前常用的治療OP的藥物主要包括骨吸收抑制藥物、促進骨形成藥物及具有補鈣、多靶點的生物制劑。但大多數化學藥長期服用療效有限，且易引發不良反應，因此，在臨床使用過程中要嚴格控制用藥量和用藥時長[4]。中藥在臨床上主要是從健脾補腎的角度出發，基于復方中多成分、多途徑、多靶點的特征提升骨密度，在保證用藥安全的前提下，達到較好的療效。因此，基于傳統中醫藥理論，開發新的具有顯著療效且安全的中藥治療，并基于現代技術明確其物質基礎和作用機制，對于促進中藥在臨床治療OP方面具有重要意義。目前只有少數高等脊椎動物的體內模型可用于骨衰老的致病和治療研究，如去卵巢嚙齒類動物已經成為OP研究和化合物早期測試的參考模型[5]，但高成本和低通量篩查相關問題限制了其在OP研究特定領域的應用。而體外細胞模型在一定程度上無法準確反映OP疾病的真實特征。基于此，尋找可替代的動物模型用于解決OP的病理生理學機制，探討經典抗OP藥物的作用內涵，對于加速骨骼研究及測試、確定OP治療的新藥物尤為重要[6-7]。

2 斑馬魚研究OP的適用性

近些年，斑馬魚已成為骨骼研究的模式生物，在早期發育過程中具光學透明性，使用細胞特異性細胞可以在體內輕松、非侵入性地監測魚類的成骨細胞和破骨細胞，從而實現細胞追蹤[8-10]。此外，斑馬魚骨和軟骨特征的分析最早可以在受精后3 d開始，期間可通過觀察骨和軟骨的發育狀況進行藥物篩選[11]。同時斑馬魚每周產卵量大，滿足了多元化設置實驗條件及優化實驗方案的需求[12]。其他特征如體外發育快、操作簡單等也增強了斑馬魚在骨骼研究中的受歡迎程度，是基因功能發現和進行變異體功能分析的首選模型，為小鼠致死等位基因研究提供了可行的替代方案。

相似的生理、遺傳學和與人類共享的藥物反應突出了斑馬魚作為藥物發現新模型的優勢[13]。其中70%的人類基因在斑馬魚基因組中至少有一個同源基因[14]。此外，斑馬魚和哺乳動物中幾乎所有的骨骼都是匹配的，控制骨骼發生的基因、細胞和機制及骨骼發育相關過程都是高度保守的[15]。斑馬魚模型對基因操作/編輯的適應性，如鋅指核酸酶[16]、嗎啉反義寡核苷酸[17]等，使基于斑馬魚的OP模型快速研究變得可行。成簇的規律間隔的短回文重復序列系統基因組編輯技術可徹底改變斑馬魚基因功能測試的方式，能模擬人類骨骼疾病的突變系，重現性好、效率高，可實現對敲除表型的快速分析，進而確認相關基因的主要功能[18-19]，為OP提供了新的治療方法。斑馬魚還可以作為測試OP候選藥物的工具，并幫助評估針對OP癥狀的藥物。目前，基于斑馬魚表型藥物篩選鑒定出的多種化合物正在進行臨床研究，如抗破骨細胞分化因子（receptor activator of nuclear factor-κB ligand，RANKL）單克隆抗體地諾單抗[20]和抗Wnt抑制劑結合硬化蛋白的單克隆抗體羅莫單抗[21]。此外，骨形態發生蛋白（bone morphogenetic protein，BMP）信號的小分子抑制劑多索嗎啡是利用斑馬魚進行化學篩選發現的首批化合物之一[22]，且多索嗎啡衍生物（間變性淋巴瘤激酶2抑制劑）正在進行治療性骨化性纖維發育不良異位骨化的臨床試驗。

隨著斑馬魚發育過程中透明度逐漸喪失，成年斑馬魚內骨骼被肌肉組織和礦化鱗片覆蓋，但仍可運用體內成像技術檢測骨性元素（顱骨、鰭、島蓋、頜和鱗片），且其他技術（類似于在小鼠中使用的技術）在斑馬魚中同樣適用。如茜素紅染色被用于顯示礦化骨，小動物計算機體層顯像儀可以進行3D形態分析和精確的骨密度測量。與傳統嚙齒類動物模型相比，基于斑馬魚幼魚和成魚模型進行OP相關評價，均可以向系統水或胚胎培養基中添加化學試劑進行暴露操作后通過骨骼表型研究來進行檢測[23-24]，操作簡單。同時，對于某些藥物，斑馬魚比小鼠模型更能重現特定藥物在人類臨床使用中觀察到的效果。沙利度胺不會引起出生小鼠出現與人類相似的出生缺陷，但是斑馬魚能夠再現沙利度胺對肢體的致畸性[25-26]，表明基于斑馬魚模型在骨相關遺傳疾病研究中的重要性。

3 斑馬魚OP模型的造模方法

3.1 糖皮質激素（glucocorticoid，GC）誘導的OP

GC是一種有效的免疫抑制藥物，長期使用會通過減少骨/血管形成及增加骨吸收影響骨代謝[27]，進而導致復雜的不良反應，包括繼發性OP。由于GC誘導斑馬魚幼魚模型的造模方法簡便易實施，因此被作為一種常用的OP模型[28]。研究表明，潑尼松龍可通過改變參與成骨細胞和破骨細胞信號通路關鍵基因的表達水平，降低成骨細胞的增殖活性和數量，誘導細胞凋亡，而促進破骨細胞的增殖和活性，進而引起斑馬魚幼魚組織骨化減少，與人類OP存在相似之處[29]，證明潑尼松龍誘導的斑馬魚OP模型的準確性[30]。

在OP相關研究中，常以斑馬魚鱗片作為研究部位，這種鱗片是由磷酸鈣和羥基磷灰石晶體構成的，其結構與人類編織骨非常相似，具有相同的細胞類型和與人體組織沉積和吸收相似的調節機制[31-32]。潑尼松龍可通過增強破骨細胞活性，增加基質吸收，降低膠原編碼基因表達，誘導成骨細胞和破骨細胞的OP基因表達譜，使礦物質含量減少和引起吸收陷窩，進而誘導OP表型[33]。此外，潑尼松龍還可誘導骨標志物的改變，如抗酒石酸酸性磷酸酶活性（tartrate-resistant acid phosphatase activity，TRAP）增加和堿性磷酸酶（alkaline phosphatase activity，ALP）活性降低[34]。Carnovali等[35]基于茜素紅S、骨基質中的鈣和乙二胺四乙酸間的特異性結合水平量化礦物質的含量。此外，地塞米松誘導的鱗片再生畸形模型[36]和斑馬魚鱗片OP模型[37]也被用于抗OP藥物的篩選和評價。為基于斑馬魚成魚鱗片進行OP治療藥物篩選的提供理論依據。也有研究表明潑尼松龍可誘導老化魚鱗出現骨吸收，降低ALP/TRAP的值，為預防年齡相關骨改變提供新的治療策略[38]。同時，斑馬魚尾鰭也常作為研究部位探究抗礦化和促礦化化合物對骨骼元素、結構和力學特性的影響。潑尼松龍可通過影響成骨細胞和破骨細胞的數量、活性和分化，改變關鍵生物過程相關基因的表達，惡化再生鰭的細胞運輸，干擾骨組織恢復，從而延遲鰭條新生形成過程中的骨生長和受損骨再生過程[39-40]。而阿侖膦酸鹽可拮抗潑尼松龍對鰭條礦化和鈣/磷水平的影響，恢復骨彈性系數和硬度水平等生物力學性能[41]。進一步證實了該模型的適用性。

3.2 高糖、高脂誘導的OP

糖尿病是一種慢性代謝性疾病，能夠引發或加劇OP發展。當前，糖尿病和OP是臨床常見的并發癥[42]。而斑馬魚已成為研究病理條件下高血糖/肥胖和骨骼相互作用的模型選擇[43]。研究表明在高血糖狀態下，糖尿病斑馬魚模型幼魚成骨和尾鰭鰭條的再生能力均受損，而維生素D類似物（帕立骨化醇）和擬鈣劑（西那卡塞）可逆轉該現象的發生[44]。Carnovali等[45]發現葡萄糖暴露可引起成年斑馬魚鱗片基質礦化減少，誘導強烈的破骨細胞活性相關的骨吸收陷窩，改變骨調節基因的表達，且與糖尿病嚙齒類動物骨骼情況類似[46]。此外，高脂飲食喂養且出現肥胖跡象的成年斑馬魚鱗片也發現類似的表型結果[47]。

3.3 鐵過載/缺鐵誘導的OP

鐵作為一種輔助因子，在參與關鍵代謝功能的生化反應中具有重要作用。過量鐵會促進破骨細胞分化并增加骨吸收[48]。在斑馬魚幼魚中，鐵過載可抑制骨形成，降低成骨細胞標志基因的表達。膜鐵轉運蛋白1表達缺陷的斑馬魚突變體表現出明顯的骨形成缺陷，包括鈣化椎骨數量減少和成骨細胞基因的異常表達[49]。高鐵應激也被用于促進斑馬魚OP表型，幼魚和成魚都顯示出骨礦化顯著減少和軟骨形成發育缺陷，而阿侖膦酸鹽作為靶向BMP信號通路和促進成骨細胞分化的藥物，可顯著逆轉缺陷骨的生成[50-51]。

3.4 基因編輯技術誘導的OP

基因編輯技術能夠獲得部分模擬OP表型特征的突變體。這些模型是研究OP相關基因功能和發病機制的潛在工具，如ATP酶H+轉運V1亞基H（ATPase H+transporting V1 subunit H，ATP6V1H）、G蛋白偶聯受體137b（G protein coupled receptor 137b，GPR137B）、葡萄糖神經酰胺酶1（glucosylceramidase beta 1，GBA1）、Sp7轉錄因子（Sp7 transcription factor，SP7）突變體皆表現骨表型異常[52-55]。

3.5 其他方式誘導的OP

骨量減少的特征是骨密度輕度降低，長時間不糾正會導致OP，而該過程可能涉及GC的作用和神經內分泌軸的激活[56]。甲狀旁腺激素持續暴露可誘導斑馬魚幼魚骨礦化顯著減少[11]。14 d以上活動受限可誘導成年斑馬魚骨量減少的穩定模型。研究發現在運動受限和機械負荷減少的情況下，斑馬魚的椎體形狀和椎間隙骨骼參數發生顯著改變，骨體積和密度顯著降低[57]。此外，在適當的應激條件下（如禁食），魚類可能發展出與人類疾病相似的OP表型[58]。注射肉毒桿菌毒素后斑馬魚肌肉的短暫麻痹能夠通過減少機械負荷和破壞神經功能，進而損害尾鰭再生過程中的膜內骨化[59]。

斑馬魚OP模型的造模方法見表1，基因編輯技術誘導斑馬魚OP模型見表2。

4 基于斑馬魚模型抗OP藥物的篩選和評價

斑馬魚OP模型已被研究者廣泛應用于探索疾病機制，篩選新的治療靶點和潛在治療藥物。目前，綠色生活的理念促使人們不斷嘗試從植物中篩選提取物和化學成分作為營養物質，進一步促進了傳統中藥被大量開發。事實上，中藥在臨床治療OP方面具有顯著優勢，其中一些天然提取物/化學成分具有抗骨吸收和骨合成代謝活性，但缺乏強有力的科學數據?；诖?，研究者使用斑馬魚模型對經典復方、中藥藥對及單味中藥進行藥效學評價，篩選其主要活性物質基礎，闡釋其主要活性機制，并取得了顯著的研究成果。

表1 斑馬魚OP模型的造模方法

RUNX2-成骨細胞特異性轉錄因子2 COL1a1-I型膠原蛋白α1鏈

RUNX2-Runt-related transcription factor 2 COL1a1-collagen type I α1 chain

表2 基因編輯技術誘導斑馬魚OP模型

LRP5-低密度脂蛋白受體相關蛋白5 EGR1-早期生長反應1 NR3C1-核受體亞家族3 C組成員1 MMP-基質金屬蛋白酶 ACP5a-酸性磷酸酶5a

LRP5-low density lipoprotein receptor related protein 5 EGR1-early growth response 1 NR3C1-nuclear receptor subfamily 3 group C member 1 MMP-matrix metalloproteinase ACP5a-acid phosphatase 5a

4.1 在經典復方藥效學評價中的應用

目前斑馬魚OP模型主要被用于經典復方、中藥藥對及單味藥的藥效學評價，如基于斑馬魚顱骨染色面積、骨礦化面積、累積光密度等不同指標發現仙靈骨葆[67]、二仙湯[73]、二至丸[74]和左歸丸[75]等具有顯著的抗OP活性，且與傳統的經典動物模型具有較高的一致性，一方面揭示斑馬魚模型在復雜化學體系中藥復方抗OP藥效評價中的適用性，同時也揭示了經典復方在對抗繼發OP方面的潛力。然而，目前中藥復方的主要物質基礎和作用機制缺乏深入研究。因此，借助于斑馬魚的高通量優勢、現代生物信息方法的聯合優勢，為系統闡釋中藥多成分、多靶點、多途徑的作用特點提供參考。Zhong等[74]結合網絡藥理學預測和斑馬魚的實驗驗證，發現二至丸中的槲皮素為重要代表性成分。

4.2 在中藥藥對藥效學評價中的應用

在中藥藥對抗糖尿病OP研究方面，Xu等[76]基于高通量的斑馬魚OP幼魚、成魚模型發現知母-黃柏（1∶1）對糖尿病-OP的治療效果最佳，可顯著抑制TRAP和促進ALP活性，上調成骨基因、下調破骨相關基因的表達水平。Lee等[77]發現牛膝-杜仲（1∶1）聯合使用治療OP的效果顯著優于單藥處理，能夠通過改善成骨、破骨蛋白、基因的表達水平緩解OP的發展。這種模式對于基于中醫藥理論和臨床使用環境來進行中藥藥對的進一步新藥開發具有重要的指導意義。

4.3 在單味中藥藥效學評價中的應用

在單味藥藥效學評價方面，Peng等[78]基于斑馬魚模型發現骨碎補可顯著逆轉OP模型斑馬魚幼魚鈣化延遲，通過增加膠原I、骨橋蛋白（osteopontin，OPN）和骨連接蛋白的表達增加成骨細胞的活性，并通過減少MMP9和MMP13a的表達抑制骨吸收。牡蠣通過上調成骨細胞標志物（ALP、RUNX2和osterix），減少鈣化水平，進而恢復成骨活性[79]。青風藤提取物及其所含生物堿可以通過調節絲裂原活化蛋白激酶14（mitogen-activated protein kinase 14，MAPK14）、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3、CXC基序趨化因子配體8、白細胞介素-1β（nterleukin-1β，IL-1β）、IL-6等表達促進斑馬魚骨質形成，并能有效降低OP中TRAP含量[80]。淫羊藿中的淫羊藿素、淫羊藿苷和寶藿苷I可顯著增加斑馬魚OP模型的骨染色面積、累積光密度和Ca的含量[81]，且淫羊藿素C可通過激活磷脂酰肌醇3-激酶和蛋白激酶B信號通路，減輕地塞米松對斑馬魚幼魚細胞成骨的抑制作用[82]。生姜的正己烷提取物及其所含的10-姜酚可顯著抑制潑尼松龍誘導的OP再生鱗片中的破骨細胞生成以促進正常再生，而該過程與破骨細胞特異性組織蛋白酶K（cathepsin K，CTSK）、MMP2、MMP9表達水平變化相關[83]。木槿中的多酚類化合物能夠通過抑制糖原合成酶激酶-3β（glycogen synthase kinase-3β，GSK-3β）進而激活β-catenin，促進成骨活性，發揮抗OP作用[84]。黃酮類化合物黃芩苷可通過調節RANK/RANKL/骨保護素（osteoprotegerin，OPG）[85]致使破骨細胞活性受損和骨吸收減少。其他酚類化合物，如丹參素[86]和丹酚酸B[65]被證明具有骨合成代謝特性。漆黃素可通過GSK-3β/β-catenin信號通路[87]、羥基紅花黃色素A[88]具有骨合成代謝和抗吸收特性。大黃酸通過腺苷酸活化蛋白激酶/Smad（small mothers against decapentaplegic）1/5/9表達[89]、環黃芪醇通過靶向端粒體酶促進成骨細胞分化[90]。槲皮素和異槲皮素分別通過腫瘤壞死因子（tumor necrosis factor，TNF）、Kelch樣環氧氯丙烷相關蛋白-1/核因子E2相關因子2/抗氧化反應元件信號通路緩解斑馬魚的OP癥狀[91-92]。當歸中的藁本內脂通過GPR30/表皮生長因子受體途徑促進骨形成[93]，吳茱萸堿可通過MMP3/OPN/MAPK促進骨重建[61]，知母中天麻皂苷AIII可通過抑制晚期糖基化終產物特異性受體/ MAPK信號通路減輕糖尿病-OP[94]等。此外，菟絲子及其所含的金絲桃素、對羥基肉桂酸等[95]、甘草中甘草苷[96]、馬齒莧中多聚糖[97]、牛膝中低聚果糖[98]、白藜蘆中白藜蘆醇[62]被證實均具有顯著的抗OP活性。

表3 中藥抗斑馬魚OP模型的作用機制

續表3

NFATC-1-活化T細胞核因子1 TGF-β-轉化生長因子-β Bcl-2-B淋巴細胞瘤-2

NFATC-1-nuclear factor of activated T cells 1 TGF-β-transforming growth factor-β Bcl-2-B-cell lymphoma-2

綜上，天然提取物富含很有前景的骨活性化合物，有望開發為治療OP的下一代藥物。而斑馬魚具有基因高度保守、生長周期短和高通量等特征，為繁瑣的藥效物質篩選提供了明顯的技術優勢，當前斑馬魚OP模型已被首選作為對中藥潛在抗OP活性成分進行篩選的一線模型。中藥抗OP具體作用機制見表3。

5 結語與展望

5.1 斑馬魚模型逐步成為OP的替代模型

斑馬魚作為OP研究的主要替代模型，具光學透明性、體積小、發育快等優勢，同時因其與人類骨骼結構、功能和調控機制等方面的高度同源性、光學透明性、體積小、發育快和轉基因技術的不斷發展促使斑馬魚被廣泛用于骨生理病理過程研究、人類骨骼疾病模型的模擬和構建、高通量生物活性化合物篩選等。另一方面，成年斑馬魚的一些功能也為成人骨骼疾病如骨轉換、修復、退行性變的治療研究提供了一種新型的強大資源?；诖耍唏R魚模型被廣泛應用于經典抗OP復方、補肝腎中藥的藥效學評價[112-113]，且大多數研究采用斑馬魚、傳統動物聯合評價，進一步證實了斑馬魚模型的可靠性。目前，斑馬魚模型還被廣泛用于天然化合物庫活性成分[114]、動物（海洋生物）活性大分子的篩選[115-116]及功能食品的制備[117-118]、老藥新用的發現等。

5.2 斑馬魚OP模型的參照標準亟需建立

目前，研究者常用GC誘導的斑馬魚OP模型進行中藥藥效評價及活性成分篩選，但是在不同研究者構建模型的方法（包括暴露濃度、暴露時間、魚齡的選擇）及藥效評價的基準不同。因此，筆者建議相關研究領域應盡快完善斑馬魚OP模型的標準參數，為治療OP篩選候選藥物和開展新藥研發奠定基礎。

5.3 斑馬魚OP模型應綜合考慮機體其他并發癥對研究結果的影響

OP是一種代謝性疾病，具有明顯的年齡相關性，往往伴隨著激素降低，糖尿病、高血壓和老年癡呆等[119]。目前建立的斑馬魚OP相關模型及基于該模型進行的藥物篩選過程大多數只是針對機體單一的骨骼生理病理過程進行的篩選和評價，不能完全反映大多數OP患者臨床狀態。因此，基于臨床疾病狀態，建議重點關注和構建以年齡為核心、不同并發癥同時存在的OP模型，準確反映藥物的臨床治療效果。同時，在研究中要關注遺傳性疾病，如成骨不全、糖尿病和肥胖等遺傳性疾病對模型和藥效的影響。

5.4 斑馬魚OP模型結果向臨床研究結果轉化存在的問題

基于斑馬魚模型進行OP相關研究，須考慮斑馬魚模型與哺乳動物、人類在骨骼組成和功能方面的差異性。如雖然斑馬魚與哺乳動物細胞的重吸收活性和分子途徑高度保守，但是不同時期斑馬魚成骨細胞、破骨細胞的存在狀態和比例與哺乳動物存在差異，如斑馬魚破骨細胞通常是單核細胞，而哺乳動物大多為多核細胞。因此，欲將斑馬魚系統評價結果擴展到臨床研究結果或應用時應謹慎。未來仍需系統評價基于斑馬魚不同細胞類型、細胞生物過程及特定靶點的評價結果與對應傳統哺乳動物評價模型結果間的一致性，進一步確認斑馬魚模型在OP疾病機制研究、藥物評價中的地位和作用。

利益沖突 所有作者均聲明不存在利益沖突

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Research progress on anti-osteoporosis of traditional Chinese medicine based on zebrafish model

WANG Xuan1, CHEN Lin-zhen1, LIN Rui-chao1, TAO Xiao-yu1, YU Xue2, ZHANG Shu-jing2, FAN Qi-qi1, LI Zhi-qi1, DAI Sheng-yun3, LI Xiang-ri1, ZHAO Chong-jun1

1. Beijing Key Laboratory for Quality Evaluation of Chinese Materia Medica, Beijing University of Chinese Medicine, Beijing 102488, China 2. Beijing University of Chinese Medicine, Beijing 102488, China 3. National Institutes for Food and Drug Control, Beijing 102629, China

Osteoporosis is a bone disease characterized by decreased bone density, changes in bone microstructure, and increased bone fragility. Due to the increasing aging problem, the incidence of osteoporosis is increasing rapidly around the world. Traditional Chinese medicine has shown excellent prospects and clinical effects in the prevention and treatment of osteoporosis. However, traditional animal models have disadvantages of time-consuming, high cost and inability to accurately summarize the complexity of bone diseases, which greatly limits the research process of preclinical osteoporosis diseases. The zebrafish model can effectively simulate the human osteopenia and osteoporosis phenotype. The advantages and applicability of zebrafish model in the treatment of osteoporosis and the research progress of this model in the anti-osteoporosis of Chinese medicine were reviewed, with view to providing references for the widespread use of zebrafish model and the development of new Chinese medicine drugs.

zebrafish; osteoporosis; traditional Chinese medicine; herb pair; traditional Chinese medicine compound; drug screening

R285

A

0253 - 2670(2023)15 - 5088 - 13

10.7501/j.issn.0253-2670.2023.15.032

2023-02-09

國家自然科學基金資助項目（82204753）；國家科技重大專項（2018ZX09735005）；國家中醫藥管理局公益性中醫藥行業科研專項（201507004）

王 璇（2000—），女，碩士研究生，研究方向為中藥安全性評價及主要活性/毒性物質基礎篩選。E-mail: wangxuan9962@163.com

通信作者：李向日（1972—），女，教授，博士生導師，從事中藥炮制、質量控制及藥效物質基礎研究。E-mail: lixiangri@sina.com

趙崇軍（1988—），男，助理研究員，從事中藥安全性評價及主要活性/毒性物質基礎篩選。E-mail: 1014256537@qq.com

[責任編輯 趙慧亮]