彩椒中克百威和烯酰嗎啉殘留量測定盲樣考核及結果分析

靳 藝，黎俊宏，石飛云

（常州市疾病預防控制中心，江蘇常州 213022）

蔬菜是人們普遍食用非常有營養的一種食品，然而為了控制蔬菜的各種病蟲害，在生產過程中不可避免地使用了農藥。農藥的超劑量、超范圍使用問題日趨嚴重，因此準確快速檢測出蔬菜中農藥殘留成為人們十分關心的問題[1]。盲樣考核是對未知樣品進行測定，是考核實驗室質量控制、組織管理和檢測能力的重要手段，能有效衡量整個實驗室的運作水平和質量控制。它是中國合格評定國家認可委員會（China National Accreditation Service for Conformity Assessment，CNAS）和中國計量認證（China Metrology Accreditation，CMA）認證評審的重要內容，能直接反映實驗室的儀器設備和技術素質的實際水平和出具報告能力[2]。本次盲樣評估是受國家食品安全風險評估中心委托，上海市疾病預防控制中心組織實施的2021年國家食品安全風險監測質量評估工作。目的是檢驗實驗室的農藥殘留檢測能力，提高實驗室在農藥檢測技術上的競爭力。本研究總結了該盲樣評估試驗的實驗過程及結果分析，以期為相關試驗提供科學參考。

1 材料與方法

1.1 試劑與儀器

甲醇、乙腈均為色譜純；水為高純水；烯酰嗎啉、克百威、烯酰嗎啉D6、克百威D3標準品（ANPEL）：100.0 μg·mL-1。

LCMS8060液相色譜質譜聯用儀，島津公司。

1.2 方法

1.2.1 色譜條件

色譜柱：ACQUITY UPLC HSS T3色譜柱（100 mm×2.1 mm，1.8 μm）；流動相：乙腈+含0.1%乙酸和20 mmol·L-1乙酸銨水溶液；梯度洗脫；流速：0.3 mL·min-1；柱溫：40 ℃；進樣量：5 μL。

1.2.2 工作曲線的制備

將克百威、烯酰嗎啉標準品用甲醇配制成濃度為1 μg·mL-1的混標作為儲備液，將克百威D3、烯酰嗎啉D6標準品用甲醇配制成濃度為1 μg·mL-1的混標，將2種農藥混合標準儲備液用甲醇逐級稀釋成0.01 μg·mL-1、0.10 μg·mL-1、0.20 μg·mL-1、0.40 μg·mL-1、0.80 μg·mL-1和1.00 μg·mL-1標準系列溶液。分別向6支50 mL離心管中加入約1 g基質、4 mL上述標準系列溶液、400 μL 1 μg·mL-1同位素混標和10 mL乙腈，以上標準系列隨樣品一起進行預處理。標準工作曲線的質量濃度系列分別為1 μg·L-1、10 μg·L-1、20 μg·L-1、40 μg·L-1、80 μg·L-1和100 μg·L-1，內標濃度為10 μg·L-1[3-4]。

1.2.3 樣品制備

稱約1 g樣品放入50 mL離心管中，加入內標400 μL，再加入乙腈10 mL，渦旋混合均勻后，超聲提取20 min，加入2.0 g氯化鈉和8.0 g無水硫酸鈉，渦旋后5 000 r·min-1離心5 min，取其上清液，用10 mL乙腈再重復提取一次，合并兩次提取的上層有機層，取2 mL加入0.25 g無水硫酸鈉和0.4 g PSA，渦旋后5 000 r·min-1離心2 min，取上清液0.5 mL，再用0.5 mL含0.1%乙酸和20 mmoL·L-1乙酸銨水溶液混勻，用0.22 μm濾膜過濾，最后取5 μL樣進儀器，分析[5-10]。

2 結果與分析

2.1 流動相的選擇

試驗以20 mmoL·L-1乙酸銨水溶液、0.1%乙酸和甲醇為流動相，以MS色譜圖為依據，考察了不同體積比的0.1%乙酸和20 mmoL·L-1乙酸銨水溶液和甲醇對試驗的影響，綜合考慮烯酰嗎啉和克百威出峰時間、峰形、峰面積和靈敏度等因素，選擇的流動相梯度比例如表1 所示，最終烯酰嗎啉、克百威的保留時間分別為10.57 min和6.59 min。其中烯酰嗎啉存在異構體，因此是雙峰，含量以峰面積之和算。克百威和烯酰嗎啉色譜圖如圖1所示。

圖1 克百威和烯酰嗎啉色譜圖

表1 流動相的梯度比例

2.2 質譜參數的選擇

電噴霧離子源（ESI）；正離子模式；碰撞氣為氬氣；霧化氣流量：3 L·min-1；加熱氣流量：10 L·min-1；干燥氣流量：10 L·min-1；接口溫度：300 ℃；脫溶劑溫度：526 ℃；脫溶劑管溫度：250 ℃；加熱塊溫度：400 ℃。克百威、烯酰嗎啉和其相應的內標克百威D3、烯酰嗎啉D6的質譜參數通過質譜Q3 SCAN掃描、產物離子掃描和碰撞能量優化，結果如表2所示。

表2 克百威和烯酰嗎啉及其內標的質譜參數

2.3 工作曲線和檢測限

運用優化后的條件，對不同濃度的克百威和烯酰嗎啉采用工作曲線內標法定量，結果表明其線性關系良好，以3倍的噪聲比確定最低檢測限如表3所示。

表3 克百威和烯酰嗎啉工作曲線及檢出限

2.4 方法應用

采用已建立的方法對盲樣彩椒粉進行檢測，測定結果分別為0.54 mg·kg-1、6.44 mg·kg-1，盲樣真值分別為0.62 mg·kg-1、6.39 mg·kg-1，回收率分別為87.1%、100.8%，Z值分別為-0.75和0.06，考核結果均為滿意。

3 結論

為檢驗實驗室的農藥殘留檢測能力，提高實驗室在農藥檢測技術上的競爭力，參加了2021年國家食品安全風險監測質量評估工作，采用高效液相色譜質譜聯用法檢測彩椒粉中農藥殘留質量。盲樣考核結果為滿意，表明本實驗室的農藥殘留檢測能力很好。