廣西血站獻(xiàn)血者RhD陰性稀有血型檢測(cè)、資料庫(kù)構(gòu)建及紅細(xì)胞實(shí)體庫(kù)運(yùn)行情況調(diào)查▲

李雄英 周 兵 劉振北 徐陽(yáng)曦 覃美健

(廣西血液中心輸血研究室,廣西柳州市 545005)

Rh血型系統(tǒng)是臨床輸血重要性僅次于ABO血型的第二大血型系統(tǒng),而D抗原是Rh抗原中免疫原性最強(qiáng)的抗原,也是最具有臨床意義的抗原。根據(jù)紅細(xì)胞上是否有RhD抗原,Rh血型系統(tǒng)可分為RhD陽(yáng)性和RhD陰性。RhD陰性在我國(guó)漢族人群中占比僅為0.2%～0.5%,屬于稀有血型[1]。由于血源稀缺,臨床上經(jīng)常遇到RhD陰性患者在急救時(shí)無(wú)法及時(shí)輸注RhD陰性血液的難題。血站是不以營(yíng)利為目的,采集、提供臨床用血的公益性衛(wèi)生機(jī)構(gòu),保障RhD陰性患者這一特殊群體安全、及時(shí)、有效輸血是血站重要的工作任務(wù)。本研究調(diào)查廣西血站獻(xiàn)血者Rh血型相關(guān)項(xiàng)目檢測(cè)、RhD陰性獻(xiàn)血者資料庫(kù)構(gòu)建及RhD陰性紅細(xì)胞實(shí)體保存庫(kù)運(yùn)行的情況,為提高廣西區(qū)內(nèi)血站RhD陰性稀有血型血液保障能力提出合理的建議和方案,現(xiàn)報(bào)告如下。

1 對(duì)象與方法

1.1 調(diào)查對(duì)象 于2020年11月對(duì)廣西14家血站展開(kāi)調(diào)查,包括1家血液中心和13家中心血站。

1.2 調(diào)查內(nèi)容 自制調(diào)查問(wèn)卷,內(nèi)容主要有:(1)開(kāi)展獻(xiàn)血者Rh血型相關(guān)項(xiàng)目檢測(cè)(RhD陰性初篩和確認(rèn)試驗(yàn)、不規(guī)則抗體篩查、Rh表型鑒定)、構(gòu)建RhD陰性獻(xiàn)血者資料庫(kù)(個(gè)人信息資料庫(kù)和Rh表型數(shù)據(jù)庫(kù))及RhD陰性紅細(xì)胞實(shí)體保存庫(kù)(冷藏庫(kù)和冷凍庫(kù))的情況;(2)RhD陰性初篩及確認(rèn)試驗(yàn)采用的方法和試劑;(3)近4年(2017—2020年,其中2020年為1—11月數(shù)據(jù))RhD陰性紅細(xì)胞采集、臨床供應(yīng)及各血站之間RhD陰性紅細(xì)胞調(diào)劑情況。本次調(diào)查的紅細(xì)胞類制劑包括全血、去白細(xì)胞懸浮紅細(xì)胞、洗滌紅細(xì)胞、冰凍解凍去甘油紅細(xì)胞等。紅細(xì)胞采集量、臨床供應(yīng)量、調(diào)劑量均以單位(U)計(jì)算,其中200 mL全血為1 U全血,200 mL全血制備的去白細(xì)胞懸浮紅細(xì)胞為1 U去白細(xì)胞懸浮紅細(xì)胞,1 U去白細(xì)胞懸浮紅細(xì)胞制備的洗滌紅細(xì)胞、冰凍解凍去甘油紅細(xì)胞分別為1 U洗滌紅細(xì)胞、1 U冰凍解凍去甘油紅細(xì)胞。

1.3 調(diào)查方法 將電子版問(wèn)卷通過(guò)電子郵箱發(fā)送至各血站,血站相關(guān)業(yè)務(wù)科室的人員填寫(xiě)完成后將問(wèn)卷發(fā)回至電子郵箱。對(duì)調(diào)查問(wèn)卷內(nèi)容填寫(xiě)不全或有疑問(wèn)之處,由本文作者通過(guò)電話方式詢問(wèn)確認(rèn)。最后對(duì)所有數(shù)據(jù)進(jìn)行匯總并進(jìn)行描述性統(tǒng)計(jì)。

2 結(jié) 果

2.1 14家血站開(kāi)展獻(xiàn)血者Rh血型相關(guān)項(xiàng)目檢測(cè)、構(gòu)建RhD陰性獻(xiàn)血者資料庫(kù)及紅細(xì)胞實(shí)體保存庫(kù)的情況 14家血站均開(kāi)展了RhD陰性初篩和確認(rèn)試驗(yàn),并構(gòu)建RhD陰性獻(xiàn)血者個(gè)人信息資料庫(kù)及RhD陰性紅細(xì)胞實(shí)體冷藏庫(kù);有6家(42.9%)血站開(kāi)展了不規(guī)則抗體篩查,7家(50.0%)血站開(kāi)展了Rh表型鑒定,6家(42.9%)血站構(gòu)建了RhD陰性獻(xiàn)血者Rh表型數(shù)據(jù)庫(kù),僅2家(14.3%)血站構(gòu)建了RhD陰性紅細(xì)胞實(shí)體冰凍庫(kù)。

2.2 14家血站開(kāi)展RhD陰性初篩試驗(yàn)所采用的方法和試劑 14家血站均采用全自動(dòng)微量板鹽水法,使用1個(gè)批次的單克隆IgM抗-D定型試劑進(jìn)行RhD陰性初篩試驗(yàn)。

2.3 14家血站開(kāi)展RhD陰性確認(rèn)試驗(yàn)所采用的方法和試劑 14家血站均采用血清學(xué)方法對(duì)初篩為RhD陰性的標(biāo)本進(jìn)行確認(rèn)試驗(yàn),大多數(shù)(11家)血站結(jié)合2種或3種方法進(jìn)行檢測(cè),見(jiàn)表1。14家血站進(jìn)行RhD陰性確認(rèn)試驗(yàn)時(shí)選用的試劑共有3種類型,包括IgM抗-D試劑、IgG抗-D試劑和IgM+IgG抗-D試劑,均為單克隆抗體。 有8家(57.1%)血站采用3～5個(gè)不同廠家或不同批次的抗-D試劑進(jìn)行RhD陰性確認(rèn)試驗(yàn);6家(42.9%)血站僅采用1～2個(gè)批次抗-D試劑進(jìn)行RhD陰性確認(rèn)試驗(yàn)。

表1 14家血站進(jìn)行RhD陰性確認(rèn)試驗(yàn)時(shí)采用的血清學(xué)方法

2.4 2017—2020年14家血站RhD陰性紅細(xì)胞采集及臨床供應(yīng)情況 2017—2020年,廣西全區(qū)RhD陰性紅細(xì)胞年總采集量和年總臨床供應(yīng)量呈波動(dòng)變化趨勢(shì),每年年總采集量均遠(yuǎn)大于年總臨床供應(yīng)量。不同血站的年總采集量和年總臨床供應(yīng)量變化趨勢(shì)不同,地區(qū)差異較大;大多數(shù)血站的年總采集量大于年總臨床供應(yīng)量。見(jiàn)表2。

表2 2017—2020年14家血站RhD陰性紅細(xì)胞采集及臨床供應(yīng)情況(U)

2.5 2017—2020年14家血站之間RhD陰性紅細(xì)胞調(diào)劑情況 2017—2020年,廣西全區(qū)RhD陰性紅細(xì)胞調(diào)劑總量(調(diào)入量與調(diào)出量之和)呈波動(dòng)變化趨勢(shì),總體調(diào)劑活動(dòng)較為活躍。各血站間具體調(diào)劑情況個(gè)體差異較大。見(jiàn)表3。

表3 2017—2020年14家血站之間RhD陰性紅細(xì)胞調(diào)劑情況(U)

3 討 論

我國(guó)《血站技術(shù)操作規(guī)程(2019版)》規(guī)定,當(dāng)獻(xiàn)血者初篩檢測(cè)為RhD陰性時(shí)需進(jìn)一步進(jìn)行陰性確認(rèn)試驗(yàn)以排除弱D型[2]。第4版《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》對(duì)弱D型鑒定試驗(yàn)的要求是使用單克隆或多克隆IgG抗-D試劑并采用抗人球蛋白試驗(yàn)法(試管抗人球蛋白法或微柱凝膠抗人球蛋白法)進(jìn)行確認(rèn)[3]。本調(diào)查結(jié)果顯示,針對(duì)初篩為RhD陰性的獻(xiàn)血者,廣西區(qū)內(nèi)14家血站均按照規(guī)定采用血清學(xué)方法進(jìn)行RhD陰性確認(rèn)試驗(yàn),但是各血站采用的方法和抗-D試劑批次有所不同。有13家血站采用抗人球蛋白試驗(yàn)法(12家采用試管抗人球蛋白法和1家采用微柱凝膠抗人球蛋白法)進(jìn)行RhD陰性確認(rèn)試驗(yàn),其中部分血站還聯(lián)合采用其他方法(試管鹽水法、酶法、聚凝胺法);有1家血站僅使用1個(gè)批次IgM+IgG抗-D試劑采用試管鹽水法進(jìn)行RhD陰性確認(rèn)試驗(yàn),并未進(jìn)一步采用抗人球蛋白試驗(yàn)法。弱D型紅細(xì)胞在鹽水介質(zhì)中與大多數(shù)IgM抗-D試劑不發(fā)生凝集,但是在抗人球蛋白試驗(yàn)中與IgG抗-D試劑發(fā)生凝集。有學(xué)者采用不同方法對(duì)96例初篩RhD陰性的樣本進(jìn)行確認(rèn)試驗(yàn),發(fā)現(xiàn)試管鹽水法未能檢出弱D型紅細(xì)胞,而其他方法(試管抗人球蛋白法、聚凝胺法、微柱凝膠抗人球蛋白法)對(duì)弱D型紅細(xì)胞的檢出率為12.5%～15.6%[4]。據(jù)此,筆者認(rèn)為僅僅采用試管鹽水法進(jìn)行RhD陰性確認(rèn)試驗(yàn)存在漏檢風(fēng)險(xiǎn),為輸血安全埋下隱患。另外,每個(gè)D抗原決定簇由30多個(gè)D抗原表位組成[5],通常1個(gè)批次的抗-D試劑只含有若干個(gè)D抗原位點(diǎn)相應(yīng)的抗體,不包含所有D抗原位點(diǎn)相應(yīng)的抗體。因此在RhD陰性確認(rèn)試驗(yàn)中,宜選用多個(gè)不同廠家或不同批次的 IgG抗-D試劑進(jìn)行檢測(cè),以盡可能多地識(shí)別不同D抗原表位。綜上所述,筆者建議,對(duì)于初篩RhD陰性的獻(xiàn)血者樣本,僅僅采用試管鹽水法進(jìn)行RhD陰性確認(rèn)試驗(yàn)的血站,應(yīng)進(jìn)一步采用含有IgG抗-D的試劑進(jìn)行抗人球蛋白試驗(yàn),以提高弱D型紅細(xì)胞的檢出率,且宜采用3～5個(gè)不同廠家或批次的IgG抗-D試劑及聯(lián)合應(yīng)用多種方法進(jìn)行確認(rèn),以保證結(jié)果的準(zhǔn)確性。

我國(guó)RhD陰性血源稀少,如何保障RhD陰性稀有血液供應(yīng),解決臨床上對(duì)稀有血型血液的迫切需求,減少輸血不良反應(yīng)的發(fā)生,提高輸血療效,一直是血站面臨的棘手難題,也備受社會(huì)關(guān)注。對(duì)于血站而言,目前保障稀有血型患者輸血的主要方法是應(yīng)用事先保存的稀有血型血液及緊急動(dòng)員稀有血型者獻(xiàn)血。因此,建立稀有血型庫(kù)是保證臨床稀有血型血液供應(yīng)的重要措施和手段。廣西區(qū)內(nèi)14家血站除了常規(guī)篩查RhD陰性獻(xiàn)血者,還利用血站信息管理系統(tǒng)建立了詳細(xì)的RhD陰性獻(xiàn)血者個(gè)人信息資料庫(kù)。這對(duì)于本地區(qū)RhD陰性血型分布情況的掌握、獻(xiàn)血者的招募、臨床供血的保障,都具有重要意義。廣西區(qū)內(nèi)部分血站在建立RhD陰性獻(xiàn)血者個(gè)人信息資料庫(kù)的基礎(chǔ)上,還開(kāi)展了不規(guī)則抗體篩查、Rh表型鑒定、RhD陰性獻(xiàn)血者Rh表型數(shù)據(jù)庫(kù)構(gòu)建、冰凍解凍去甘油紅細(xì)胞制備等工作。不規(guī)則抗體篩查可以有效避免溶血性輸血反應(yīng)和新生兒溶血病的發(fā)生;鑒定Rh表型、構(gòu)建RhD陰性獻(xiàn)血者Rh表型數(shù)據(jù)庫(kù),有利于為存在除抗-D以外其他Rh抗體的RhD陰性患者匹配Rh血型相合血液,為安全、及時(shí)、有效的臨床供血提供保障;開(kāi)展制備和保存RhD陰性冰凍紅細(xì)胞工作,可以將紅細(xì)胞保存期延長(zhǎng)至10年,既可以避免寶貴的RhD陰性血液資源的浪費(fèi),又可以應(yīng)對(duì)臨床緊急輸血,有利于解決血液供需矛盾。尚未開(kāi)展RhD陰性獻(xiàn)血者的不規(guī)則抗體篩查、Rh表型鑒定、紅細(xì)胞冰凍保存等工作的血站可根據(jù)自身?xiàng)l件和本地區(qū)臨床輸血需求開(kāi)展以上項(xiàng)目,以提高本地區(qū)的輸血安全保障能力,促進(jìn)輸血事業(yè)的發(fā)展。

進(jìn)一步對(duì)廣西全區(qū)2017—2020年RhD陰性紅細(xì)胞采集和臨床供應(yīng)情況進(jìn)行調(diào)查,結(jié)果顯示,全區(qū)年總采集量和年總臨床供應(yīng)量呈波動(dòng)變化趨勢(shì),全區(qū)每年年總采集量遠(yuǎn)大于年總臨床供應(yīng)量,總體呈現(xiàn)供大于求的狀態(tài)。而區(qū)內(nèi)不同血站的RhD陰性紅細(xì)胞年總采集量和年總臨床供應(yīng)量變化趨勢(shì)不盡相同:貴港市中心血站、欽州市中心血站的RhD陰性紅細(xì)胞年總采集量呈逐年上升趨勢(shì),梧州市中心血站、北海市中心血站的RhD陰性紅細(xì)胞年總采集量呈逐年下降趨勢(shì),其他10個(gè)血站的RhD陰性紅細(xì)胞年總采集量則呈起伏狀態(tài);貴港市中心血站、賀州市中心血站的RhD陰性紅細(xì)胞年總臨床供應(yīng)量呈逐年上升趨勢(shì),梧州市中心血站、河池市中心血站的RhD陰性紅細(xì)胞年總臨床供應(yīng)量呈逐年下降趨勢(shì),其他10個(gè)血站的RhD陰性紅細(xì)胞年總臨床供應(yīng)量則呈起伏狀態(tài)。廣西區(qū)內(nèi)大部分血站的RhD陰性紅細(xì)胞年總采集量和年總臨床供應(yīng)量均呈起伏狀態(tài),主要與臨床需求隨機(jī)性、突發(fā)性特點(diǎn)有關(guān)。

各血站之間血液的調(diào)劑方式包括調(diào)入和調(diào)出,血站內(nèi)血液調(diào)入量、調(diào)出量的總和即為總調(diào)劑量。總調(diào)劑量的大小可從整體反映出血液調(diào)劑活動(dòng)的活躍度和趨勢(shì),體現(xiàn)血液跨地區(qū)聯(lián)動(dòng)在保障應(yīng)急供血方面的作用,可為建立健全區(qū)域間血液聯(lián)動(dòng)保障機(jī)制和政策提供基礎(chǔ)依據(jù)。本研究結(jié)果顯示, 2017—2020年廣西區(qū)內(nèi)RhD陰性紅細(xì)胞調(diào)劑活動(dòng)較為活躍,且各血站間調(diào)劑情況個(gè)體差異較大:廣西壯族自治區(qū)血液中心、南寧市中心血站、桂林市中心血站、玉林市中心血站等血站的血液調(diào)劑以調(diào)出為主,表明這些血站RhD陰性血液供應(yīng)較為充足;梧州市中心血站、欽州市中心血站、河池市中心血站等血站的血液調(diào)劑以調(diào)入為主,表明這些血站的RhD陰性血液供應(yīng)較為緊缺;而區(qū)內(nèi)其他血站(除百色市中心血站外)在同一個(gè)年度內(nèi)既有調(diào)入也有調(diào)出,血液調(diào)劑較為頻繁,某一段時(shí)間內(nèi)采供不平衡的問(wèn)題突出,其主要原因是這些地區(qū)的城市人口相對(duì)較少,RhD陰性血液需求量小,血液的采供狀況更容易受到臨床稀有血型需求不確定性、突發(fā)性的影響。以上分析表明,廣西區(qū)內(nèi)RhD陰性血液采供存在地區(qū)間發(fā)展不平衡現(xiàn)象,全區(qū)范圍內(nèi)的跨地區(qū)血液調(diào)劑是臨床供血的重要應(yīng)急保障手段。

綜上所述,廣西各地區(qū)血站普遍存在RhD陰性稀有血液采集與供應(yīng)之間不平衡現(xiàn)象。RhD陰性稀有血液采供不平衡既會(huì)導(dǎo)致血站在某些特殊緊急情況下面臨不能滿足急救用血需求的困境,又會(huì)不可避免地出現(xiàn)將RhD陰性血液作為RhD陽(yáng)性血液使用或過(guò)期報(bào)廢的浪費(fèi)局面。雖然廣西各血站建有稀有血型獻(xiàn)血者資料庫(kù),但因目前資料庫(kù)大都存在庫(kù)容量小、資料不夠完整、區(qū)域性限制、共用性差等缺點(diǎn),仍然不能很好地滿足當(dāng)?shù)叵∮醒腿巳旱挠醚枨蟆?yīng)急血液保障的跨地域聯(lián)動(dòng),是政府、衛(wèi)生行政主管部門(mén)和輸血行業(yè)應(yīng)對(duì)突發(fā)公共事件的新課題,也是血站危機(jī)管理的重要內(nèi)容之一[6-10]。近年來(lái),我國(guó)已有跨省、跨區(qū)域緊急調(diào)運(yùn)稀有血型血液的研究報(bào)告[11]。通過(guò)建立共享信息的互助組織或網(wǎng)站,進(jìn)行跨區(qū)域乃至國(guó)際合作,已被證明是保障稀有血型輸血的有效途徑。因此,建立一個(gè)全區(qū)聯(lián)網(wǎng)的稀有血型資料管理平臺(tái),是進(jìn)一步提高各地稀有血型血液供應(yīng)保障能力的有效策略。通過(guò)區(qū)內(nèi)聯(lián)網(wǎng)的稀有血型資料管理平臺(tái)使區(qū)內(nèi)各血站共享全區(qū)的稀有血型資源,開(kāi)辟“一地庫(kù)存,多地使用”的良好格局,可以最大限度地使區(qū)域內(nèi)稀有血型血液資源得到充分利用和合理調(diào)配,能有效地保障臨床稀有血型急診用血和疑難配血應(yīng)用需求,提高血站在突發(fā)公共衛(wèi)生事件中特殊用血的保障能力。