發(fā)根農(nóng)桿菌介導(dǎo)的閩楠遺傳轉(zhuǎn)化體系構(gòu)建與優(yōu)化

吳夢潔 洪家都 李芳燕 周生財(cái) 林二培 程龍軍，*

（1浙江農(nóng)林大學(xué)林業(yè)與生物技術(shù)學(xué)院/亞熱帶森林培育國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，浙江 杭州 311300；2麗水職業(yè)技術(shù)學(xué)院，浙江 麗水 323000）

閩楠屬于樟科（Lauraceae）楠屬（Phoebe）植物，是我國重要的珍貴樹種［1］。閩楠的木材材質(zhì)堅(jiān)韌，是上等建筑和家具的優(yōu)良木材原料［2］；同時(shí)，其樹體高大通直，枝繁葉茂，樹形優(yōu)美，是優(yōu)良的園林綠化樹種。但由于氣候環(huán)境變化和人為砍伐等因素，閩楠資源大量減少，目前僅在江西、福建、浙江、廣東、廣西、湖南、湖北和貴州呈零星分布［3］，被列為國家二級(jí)珍稀漸危種［4］。

隨著國家對(duì)珍貴樹種種質(zhì)資源保護(hù)和栽培利用的重視，楠木人工培育及應(yīng)用推廣已進(jìn)入快速發(fā)展階段。生產(chǎn)中對(duì)楠木優(yōu)良品種的需求也越來越大，但木本植物傳統(tǒng)育種方式周期較長，應(yīng)用現(xiàn)代分子輔助育種技術(shù)成為了突破傳統(tǒng)林木育種瓶頸的一個(gè)重要手段［5］。目前，楠木中的閩楠基因組測序已經(jīng)完成，其研究開始邁入分子生物學(xué)水平［6］。但閩楠尚未建立完善的遺傳轉(zhuǎn)化體系，限制了其重要經(jīng)濟(jì)性狀相關(guān)的遺傳研究。建立一套穩(wěn)定的遺傳轉(zhuǎn)化體系對(duì)楠木的遺傳研究和育種工作具有重要意義。

發(fā)根農(nóng)桿菌（Agrobacteriumrhizogenes）是一類宿主范圍廣泛的革蘭氏陰性菌，屬根瘤菌科（Rhizobiaceae）農(nóng)桿菌屬（Agrobacterium）。其Ri 質(zhì)粒上的T-DNA 片段能在植物基因組中插入、整合并表達(dá)，誘導(dǎo)植物產(chǎn)生轉(zhuǎn)基因毛狀根［7］，是植物遺傳轉(zhuǎn)化的一種重要手段［8］。發(fā)根農(nóng)桿菌誘導(dǎo)產(chǎn)生的毛狀根具有生長速度快，生理生化和遺傳性穩(wěn)定等優(yōu)點(diǎn)［9］，遺傳轉(zhuǎn)化后的毛狀根可以進(jìn)行植物基因功能和次生代謝等方面的研究［10-11］，目前該技術(shù)已在多個(gè)物種中得到應(yīng)用［12-13］。……