氣相色譜法測定代用茶中三氯殺螨醇殘留量的不確定度評定

原 超

（長治市綜合檢驗檢測中心，山西長治 046000）

近年來，代用茶因具有增強免疫力、改善睡眠等功效而在市場上熱銷，深受消費者喜愛。代用茶產(chǎn)品通常由藥食同源或保健品類中的一種或多種物質(zhì)組成，農(nóng)藥殘留與重金屬含量超標是市場監(jiān)管部門在代用茶產(chǎn)品抽檢監(jiān)測中最常見的問題[1-2]。《代用茶》（GH/T 1091—2014）[3]中規(guī)定，三氯殺螨醇等11 種農(nóng)藥殘留組分按《蔬菜和水果中有機磷、有機氯、擬除蟲菊酯和氨基甲酸酯類農(nóng)藥多殘留的測定》（NY/T 761—2008）中的方法測定，當檢測結(jié)果臨近最大殘留限量時，為獲得準確可靠的檢測數(shù)據(jù)，檢驗人員需要科學合理地進行測量不確定度評定。本研究依據(jù)《測量不確定度評定與表示》（JJF 1059.1—2012）[4]中的方法，評定氣相色譜法測定代用茶中三氯殺螨醇殘留量的測量不確定度。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

某品牌代用茶，購自金威超市；100 μg·mL-1三氯殺螨醇溶液標準樣品，農(nóng)業(yè)農(nóng)村部環(huán)境保護科研監(jiān)測所；乙腈，色譜純，德國默克公司；正己烷、丙酮，色譜純，美國賽默飛世爾公司。

1.2 儀器與設備

GC-2010 氣相色譜儀帶ECD 檢測器，日本島津公司；ME3002E 電子天平（精度0.01 g），瑞士梅特勒—托利多公司；HY-4A 數(shù)顯調(diào)速振蕩器，杰瑞爾電器公司；HSC-B 水浴氮吹儀，天津市恒奧科技公司；JL-SPE-12B 固相萃取裝置，上海靳瀾儀器公司；Mega BE-Fl 固相萃取柱（1 gm 6 mL），美國安捷倫公司。

1.3 試驗方法

參照《蔬菜和水果中有機磷、有機氯、擬除蟲菊酯和氨基甲酸酯類農(nóng)藥多殘留的測定》（NY/T 761—2008）第2 部分方法二進行測定[5]。

1.3.1 試樣制備凈化

準確稱取5.0 g 經(jīng)粉碎混勻的代用茶試樣，放入具塞三角瓶中，精確加入20.0 mL 超純水與50.0 mL乙腈，120 r·min-1的振蕩器中振蕩30 min，過濾，濾液收集于裝有約6 g氯化鈉的100 mL具塞比色管中，加塞劇烈振蕩1 min，靜置30 min。待分層后，準確吸取10.0 mL 上層乙腈溶液于50 mL 燒杯中，置于80 ℃水浴鍋中通氮氣蒸發(fā)至近干，加入2.0 mL 正己烷，蓋上鋁箔，待凈化。

將固相萃取柱依次用5.0 mL 丙酮+正己烷（1+9）、5.0 mL 正己烷預淋洗條件化，棄去淋洗液，當淋洗液流至吸附層時，迅速加入待凈化溶液，將洗脫液收集于15 mL 具塞刻度試管中，再用5.0 mL丙酮+正己烷（1+9）沖洗2 次燒杯，將洗滌液過柱并收集于上述試管中，置于50 ℃水浴氮吹儀中蒸發(fā)至小于5 mL，全部轉(zhuǎn)移至5 mL 容量瓶中，用正己烷定容，渦旋混勻，氣相色譜儀分析。

1.3.2 標準溶液配制

準確吸取0.5 mL 濃度為100 μg·mL-1的三氯殺螨醇溶液標準樣品于5 mL 容量瓶中，用正己烷稀釋定容至刻度，配制成10 μg·mL-1的三氯殺螨醇標準儲備液。再吸取0.5 mL 三氯殺螨醇標準儲備液于5 mL 容量瓶中，用正己烷稀釋定容至刻度，配制成1 μg·mL-1的三氯殺螨醇標準中間液。

分別吸取0.10 mL、0.25 mL、0.50 mL 三氯殺螨醇標準中間液，0.10 mL、0.25 mL、0.50 mL三氯殺螨醇標準儲備液于6 個10 mL 容量瓶中，用正己烷稀釋定容至刻度，配制成濃度為0.010 μg·mL-1、0.025 μg·mL-1、0.050 μg·mL-1、0.100 μg·mL-1、0.250 μg·mL-1和0.500 μg·mL-1的三氯殺螨醇標準系列溶液。

1.3.3 氣相色譜條件

色 譜 柱：DB-17 毛 細 管 柱（30 m×250 μm，0.25 μm）；載氣：高純N2；柱流速：1.0 mL·min-1；進樣口溫度：280 ℃；進樣方式：分流進樣，分流比10 ∶1；柱溫：初始溫度150 ℃，保持2 min，5 ℃·min-1升溫至280 ℃，保持20 min；檢測器ECD 溫度：300 ℃；尾吹氣N2流量：30 mL·min-1。保留時間定性，峰面積外標法定量。

2 結(jié)果與分析

2.1 不確定度分析

2.1.1 數(shù)學模型建立代用茶樣品中三氯殺螨醇殘留量的計算公式為

式中：X為代用茶樣品中三氯殺螨醇殘留量，mg·kg-1；m為稱取代用茶樣品質(zhì)量，g；C為上機試液中三氯殺螨醇的質(zhì)量濃度，μg·mL-1；V1為加入乙腈提取液體積，mL；V2為移取分層后乙腈層體積，mL；V3為試液最終定容體積，mL。

2.1.2 不確定度來源

試驗過程中測量不確定度的來源為樣品稱量過程、試液移取定容過程、標準溶液賦值、標準曲線擬合和測量重復性產(chǎn)生的分量。

2.2 測量不確定度分量評定

2.2.1 樣品稱量過程產(chǎn)生的不確定度分量urel(m)

使用ME3002E 電子天平稱取5.0 g 代用茶樣品，由檢定證書知，示值誤差為0.01 g，偏載誤差為0.03 g，重復性誤差為0.02 g，按正態(tài)分布考慮，則

2.2.2 試液移取定容產(chǎn)生的不確定度分量urel(V)

使用50 mL 單標線吸量管（A 級）移取50.0 mL乙腈提取液，使用10 mL 單標線吸量管（A 級）吸取10.0 mL 經(jīng)分層后的乙腈層溶液，試液最終使用5 mL單標線容量瓶（A級）用正己烷定容至5.0 mL，根據(jù)《常用玻璃量器》（JJG 196—2006）獲得各自容量允差，20 ℃時，玻璃量器的不確定度分量按矩形分布，取。假設實驗溫差為±5 ℃，乙腈、正己烷的膨脹系數(shù)均為1.37×10-3mL·℃-1，溫差引入的不確定度按照均勻分布計算，結(jié)果見表1。試液移取定容過程產(chǎn)生的不確定度分量為。

表1 玻璃量器引入的相對不確定度

2.2.3 標準溶液賦值的不確定度分量urel(cb)

三氯殺螨醇溶液標準樣品編號GSB05—2311—2016，批202209，標準樣品證書中的擴展不確定度為U=kurel(cb)=0.001（k=2），。

2.2.4 標準曲線擬合過程產(chǎn)生的不確定度分量urel(q)將配制的三氯殺螨醇標準系列溶液重復測定3 次，數(shù)據(jù)統(tǒng)計見表2，用最小二乘法擬合線性回歸方程，三氯殺螨醇濃度在0.010 ～0.500 μg·mL-1時，線性方程為Y=201 847.1C+392.2，其中b=201 847.1，a=392.2。該過程產(chǎn)生的標準不確定度計算為

表2 標準系列溶液的測定數(shù)據(jù)

式中：n為標準系列溶液測試次數(shù)，n=18；P為代用茶樣品測試次數(shù)，P=6；代用茶樣品測試的平均值為0.542 mg·kg-1，代入2.1.1 數(shù)學模型，計算得C=0.108 4 μg·mL-1，標準系列溶液各濃度點的平均值，相對標準不確定度為

2.2.5 測量重復性產(chǎn)生的不確定度分量urel(s)

將某品牌代用茶樣品在期間精密度條件下測試6 次，結(jié) 果 分 別 為0.532 mg·kg-1、0.545 mg·kg-1、0.529 mg·kg-1、0.548 mg·kg-1、0.536 mg·kg-1和0.562 mg·kg-1，平均值X—為0.542 mg·kg-1，標準偏差s為0.022 60，則標準不確定度為

2.3 合成與擴展不確定度評定

2.3.1 合成不確定度

5 個不確定度分量各不相關(guān)，按照公式計算相對合成不確定度為

標準合成不確定度為

u=0.542×0.080 8=0.014 7 mg·kg-1

2.3.2 擴展不確定度

取包含因子k=2，置信概率95%，代用茶樣品中三氯殺螨醇殘留量的測量擴展不確定度為U=ku=0.029 mg·kg-1。

2.4 測量不確定度結(jié)果

氣相色譜法測定代用茶中三氯殺螨醇殘留量為（0.542±0.029）mg·kg-1（k=2，P=95%）。

3 結(jié)論

分析評定氣相色譜法測定代用茶中三氯殺螨醇殘留量的不確定度，各不確定度分量對測量不確定度結(jié)果的相對貢獻大小依次為標準曲線擬合分量urel(q)、測量重復性分量urel(s)、試液移取定容分量urel(V)、樣品稱量分量urel(m)、標準溶液賦值分量urel(cb)，標準曲線擬合過程及人為操作因素對測量結(jié)果的影響較大，檢驗檢測機構(gòu)應重視儀器設備的維護保養(yǎng)和實驗人員的操作水平培訓，降低測量不確定度，使檢測結(jié)果更為準確可靠。