徐偉風,蔡東森,陳海軍*
( 1. 南京市畜牧家禽科學研究所,江蘇 南京 210036 ; 2. 南京市畜牧技術推廣站,江蘇 南京 210036 )
自2020 年飼料端全面禁抗,養殖端也進入減抗、限抗時代,“替抗”產品迎來歷史機遇,尋找替抗產品成為養殖行業迫在眉睫的關鍵之舉。半胱胺和甜菜堿作為安全、無毒的功能性飼料添加劑具有多種生物學作用,目前已廣泛應用于動物的生產養殖環節[1]。半胱胺作為生長抑素的抑制劑,在脂質代謝、胴體品質等方面發揮重要的生物學功能[2]。研究發現,在寧鄉豬育肥豬日糧中添加半胱胺,其肝臟中DHA 含量顯著提高[3]。包被半胱胺鹽可改善生長育肥豬胴體瘦肉率和眼肌面積,皮下脂肪中與脂質分解代謝相關的酶活性以及飼料效率均得到提升[4]。甜菜堿可促進三元育肥豬蛋白質合成代謝、提高機體免疫力[5]。妊娠巴馬香豬及其子代日糧添加甜菜堿,可影響血液中嗜酸性粒細胞數、嗜堿性粒細胞百分比和平均血小板體積,增加體重,促進器官生長[6]。甜菜堿可誘導育肥豬生長激素分泌,并通過生長激素誘導影響脂質代謝,通過減少脂肪生成和增加脂肪分解減少胴體脂肪沉積[7]。
半胱胺和甜菜堿作為安全可靠和無公害的新型飼料添加劑,可改善肥育豬胴體[8],促進豬生長,改善肉質,但有關地方豬的應用研究很少。山豬是南京市地區本土地方豬種,半胱胺和甜菜堿對地方豬種生長性能及血清相關指標的研究仍屬未知。本試驗以育肥期山豬雜交豬為試驗對象,研究日糧中添加半胱胺和甜菜堿對生長性能、體尺指標、抗氧化性能及免疫功能的影響,以期為禁抗后半胱胺和甜菜堿在地方豬生產應用提供參考。
本試驗所使用的半胱胺鹽酸鹽和甜菜堿鹽酸鹽(純度98%)購自河南卓紐生物科技有限公司。
試驗選取體重接近的45頭育肥期山豬雜交豬,體重平均值為(70.55±2.36)kg,隨機原則分為3 組,每組5 個重復,每個重復3 頭豬。對照組(CT 組)豬飼喂基礎日糧,兩個試驗組分別在日糧中添加200 mg/kg 半胱胺鹽酸鹽(T1 組)和1.25 g/kg 甜菜堿鹽酸鹽(T2 組)。試驗期共48 d,其中預飼期3 d,正式試驗期45 d。基礎日糧組成及營養水平見表1。

表1 基礎日糧組成及營養水平Tab.1 Basic diet composition and nutrient level
試驗正式啟動前,對豬舍墻面、地面、屋頂等位置清洗消毒,豬舍自然通風,晾干靜置一周后,將試驗豬轉入豬舍。試驗期間,育肥試驗豬自由采食,飲用干凈自來水,清糞頻次為一天一次。
待試驗期結束時,試驗豬提前12 h 禁食,于結束當天8:00前腔靜脈法采血15 mL,室溫靜置10 min,3 500 r/min離心10 min,用移液槍吸取上層血清注入離心管,儲存于-20 ℃冰箱,做好標記。
1.5.1 生長性能
試驗開始及結束時,所有試驗豬于8:00 空腹稱重,稱重前育肥豬禁食12 h,記錄試驗前后育肥豬體重變化,計算平均日增重;準確記錄所有試驗豬的飼料消耗量,計算平均日采食量和料重比。
1.5.2 體尺指標
體高采用硬尺測量,為試驗豬自髻甲骨最高點至地面的垂直高度;胸圍為沿試驗豬肩胛后緣繞胸的周徑;體長為試驗豬自枕骨至尾根的長度,用軟尺沿背中線緊貼體表量取;管圍為試驗豬左前肢末端最細處的周徑。
1.5.3 血清抗氧化指標
血清樣本從-20 ℃冰箱取出,室溫狀態下自然解凍,測定血清的總抗氧化能力(T-AOC)與谷胱甘肽(GSH)的含量以及谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)與總超氧化物歧化酶(T-SOD)的活性。血清抗氧化指標的測定嚴格按照試劑盒說明書操作,所有檢測試劑盒均由南京建成生物工程研究所提供。
1.5.4 血清免疫指標
血清樣本從-20 ℃冰箱取出,室溫狀態下自然解凍,測定血清的免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白G(IgG)和免疫球蛋白M(IgM)含量。血清免疫指標的測定嚴格按照試劑盒說明書操作,所有檢測試劑盒均由南京建成生物工程研究所提供。
試驗數據采用Excel 2015 軟件進行統計與整理,Graphpad Prism 5軟件進行單因素分析和多重比較。結果以“平均值±標準誤”表示,P<0.05表示差異顯著。

表2 半胱胺鹽酸鹽和甜菜堿鹽酸鹽對育肥期山豬雜交豬生長性能的影響Tab.2 Effects of cysteamine and betaine on growth performance of finishing hybrid shan pigs
由表2可知,各試驗組育肥豬初重、末重差異均不顯著(P>0.05),但與CT 組相比,T1 組和T2 組末重分別提高5.16%和5.84%(P>0.05)。與CT 組相比,T1 組和T2 組的平均日增重分別顯著增加11.39%和10.51%(P<0.05),平均日采食量提高3.48%和4.29%(P<0.05),料重比降低7.21%和5.58%(P<0.05)。兩試驗組育肥豬平均日增重、平均日采食量和料重比差異不顯著(P>0.05)。結果表明,育肥階段的地方豬日糧中添加適量的半胱胺鹽酸鹽和甜菜堿鹽酸鹽對其生長性能的改善效果較好。

表3 半胱胺鹽酸鹽和甜菜堿鹽酸鹽對育肥期山豬雜交豬體尺指標的影響Tab.3 Effects of cysteamine and betaine on body size parameters of finishing hybrid shan pigs單位:cm
由表3可知,試驗初,各試驗組間體高、體長、胸圍和管圍等指標差異均不顯著(P>0.05);試驗末,T1組和T2組育肥豬的體高、體長、胸圍和管圍等體尺指標均未發生顯著變化(P>0.05)。試驗結果表明,育肥階段的地方豬日糧中添加適量的半胱胺鹽酸鹽和甜菜堿鹽酸鹽對其體尺指標未起到改善作用。

表4 半胱胺鹽酸鹽和甜菜堿鹽酸鹽對育肥期山豬雜交豬血清抗氧化能力的影響Tab.4 Effects of cysteamine and betaine on serum antioxidant capacity of finishing hybrid shan pigs
由表4 可知,與CT 組相比,T1 組和T2 組育肥豬血清T-SOD 活性分別顯著提高25.09%和19.73%(P<0.05),T-AOC 分別顯著增加15.34%和14.72%(P<0.05);GSH 含量和GSH-Px活性差異均不顯著(P>0.05)。兩試驗組育肥豬血清T-SOD 和GSH-Px 的活性、T-AOC 及GSH 含量差異均不顯著(P>0.05)。試驗結果表明,育肥階段的地方豬日糧中添加適量的半胱胺鹽酸鹽和甜菜堿鹽酸鹽可提高其血清抗氧化能力。

表5 半胱胺鹽酸鹽和甜菜堿鹽酸鹽對育肥期山豬雜交豬血清免疫功能的影響Tab.5 Effects of cysteamine and betaine on serum immune function of finishing hybrid shan pigs單位:mg/L
由表5 可知,與CT 組相比,T1 組和T2 的育肥豬血清IgG 含量分別提高53.69%和91.56%(P<0.05),IgM 含量提高40.77% 和28.36%(P<0.05),IgA 含量差異不顯著(P>0.05)。與T1組相比,T2組肥豬血清IgG含量顯著增高(P<0.05),IgM 和IgA 含量差異不顯著(P>0.05)。試驗結果表明,育肥階段的地方豬日糧中添加適量的半胱胺鹽酸鹽和甜菜堿鹽酸鹽可提高其血清免疫功能。
半胱胺鹽酸鹽和甜菜堿鹽酸鹽作為功能性飼料添加劑,目前關于二者是否具有促進動物生長的功能仍存在一定爭議。王中華等[8]研究發現,在育肥階段,日糧中添加不同濃度的甜菜堿能夠提高育肥豬的生長性能,當添加量達1 500、2 000 mg/kg 時效果顯著,此報道與吳昊等[9]研究結果類似,即日糧中添加1 750 mg/kg 甜菜堿能夠促進豬群生長。但也有不同的研究結果表明,日糧中添加甜菜堿對肥育豬的平均日增重、平均日采食量和料重比均無顯著影響[7]。有研究指出,半胱胺可顯著提高育肥豬日增重,降低料重比[10]。沈順新等[11]研究發現,包膜半胱胺對肥育豬平均日增重、平均日采食量和料重比無顯著影響,以100 mg/kg 組生長性能指標相對最佳。本研究結果顯示,日糧中添加半胱胺鹽酸鹽和甜菜堿鹽酸鹽可提高山豬雜交豬育肥豬平均日增重、平均日采食量,降低料重比,對體高、體長、胸圍和管圍體尺指標無顯著影響,表明在育肥豬中添加適宜濃度的半胱胺鹽酸鹽和甜菜堿鹽酸鹽,在某種程度上對其生長性能具有一定的促進作用。
在養豬生產中,許多因素均可誘導機體產生大量自由基,進而引起豬的氧化損傷,導致腸道結構破壞、微生物干擾和養分吸收障礙,最終導致豬采食量下降、體重增長減緩或負增長,嚴重影響養豬業的經濟效益[12]。現有研究表明,半胱胺鹽酸鹽和甜菜堿能夠降低丙二醛(MDA)的含量,有效減少氧自由基的產生,在改善動物機體的抗氧化能力起到很好的效果[13-14]。本試驗結果發現,適量的半胱胺鹽酸鹽和甜菜堿鹽酸鹽提高了育肥豬血清T-AOC 及T-SOD含量。蘇斌朝等[15]研究表明,玉米DDGS型日糧中添加甜菜堿可顯著提高肥育豬血清和肌肉中T-SOD、GSH-Px的活性以及T-AOC;日糧添加半胱胺顯著提高了生長豬十二指腸黏膜中的T-AOC 及GSH-Px 活性[16]。該研究結論與本試驗結果相似,表明在育肥豬中添加適宜濃度的半胱胺鹽酸鹽和甜菜堿鹽酸鹽,在某種程度上對動物機體的抗氧化功能具有改善作用。
免疫球蛋白是具有抗體活性的動物蛋白,主要存在于血液和組織液中,可分為IgG、IgA、IgM、IgD、IgE 等五類。動物機體內的IgA是機體黏膜防御系統的主要成分,能夠抑制微生物在呼吸道上皮附著,減緩病毒繁殖,是黏膜重要屏障,對某些病毒、細菌和—般抗原具有抗體活性,也是防止病原體入侵機體的第一道防線[17]。IgG是初級免疫應答中最持久、最重要的抗體,在抗感染中起到主力軍作用,具有中和病毒的作用[18]。IgM是抗原刺激誘導體液免疫應答中最先產生的免疫球蛋白,可結合補體,是高效能的抗生物抗體,殺菌、溶菌、促吞噬和凝集作用強,在機體的早期防御中起到重要作用[19]。沈順新等[11]研究發現,日糧添加不同劑量的包膜半胱胺可提高育肥豬血清IgM 和補體C3的含量,C3含量隨著添加劑量的提高呈線性上升,包膜半胱胺有提高血清IgG含量的趨勢,并呈二次升高。本試驗結果顯示,半胱胺鹽酸鹽和甜菜堿鹽酸鹽組育肥豬血清IgG含量分別顯著提高53.69%和91.56%,IgM含量分別顯著提高40.77%和28.36%,表明添加適宜劑量的半胱胺鹽酸鹽和甜菜堿鹽酸鹽可提高育肥豬機體的體液免疫功能。
本研究結果顯示,日糧中添加半胱胺鹽酸鹽和甜菜堿鹽酸鹽能夠提高山豬雜交豬育肥豬的生長性能,改善其抗氧化能力及免疫功能,表明其對地方豬的營養研究具有推廣使用價值。