急性淡水脅迫對四指馬鲅幼魚鰓、心臟、脾臟和肝臟組織結構的影響

徐淑玉，區又君，溫久福，林欣，4，李加兒

（1.中國水產科學研究院南海水產研究所/農業農村部南海漁業資源開發利用重點實驗室，廣東 廣州 510300；2.上海海洋大學水產與生命學院，上海 201306；3.嶺南現代農業科學與技術廣東省實驗室茂名分中心，廣東 茂名 525000；4.大連海洋大學水產與生命學院，遼寧 大連 116000）

【研究意義】四指馬鲅（Eleutheronema tetradactylum）具有肉嫩味美、生長速度快、適應范圍廣等特點［1］，且其生長周期短，經濟回報高，因此深受漁民喜愛。四指馬鲅是一種廣鹽性魚類，當水體滲透壓變低時，機體會產生一系列應激反應來適應環境變化，當鹽度超過其耐受范圍時就會造成死亡，從而導致養殖效益下降。魚類的鰓組織不僅是主要的呼吸器官［2］，還參與滲透壓調節、離子平衡及體液pH 調節等［3］，在鹽度適應過程中發揮至關重要的作用。心臟是最重要的能量供應器官，與物質的運輸、內部環境的穩定和魚類的防御功能密切相關［4］。脾臟是最大的周圍淋巴器官，有過濾血液和對侵入血內的抗原產生免疫應答等重要功能。肝臟是人體最大的消化腺，除分泌膽汁參與消化機能外，還有貯藏養分、代謝和解毒等作用。因此，研究四指馬鲅幼魚鰓、心臟、脾臟和肝臟在急性淡水脅迫下的變化，對探討四指馬鲅低鹽度養殖具有積極意義?！厩叭搜芯窟M展】目前已有鹽度脅迫相關養殖研究，如鹽度脅迫對斑點叉尾鮰（Ictalurus punctatus）應答基因的分析［5］、鹽度脅迫對細鱗鮭幼魚酶活的影響［6］、鹽度驟降對大黃魚的影響［7］等。王雯等［8］研究顯示，斜帶石斑魚幼魚在急性淡水脅迫下不能長期存活。牛瑩月等［9］研究發現，四指馬鲅幼魚在不同鹽度條件下的存活率和鰓組織形態有較大差異。急性淡水脅迫對四指馬鲅幼魚的影響研究較少，尤其是急性淡水脅迫對魚類心臟影響的研究鮮有報道，Morgenroth等［10］指出鹽度脅迫對黃尾鰤（Seriola lalandi）的心肺功能和生長性能無實質影響。【本研究切入點】魚類的滲透壓調節通過水和離子的運輸來實現［11］，是鰓、腎臟和腸道等水和離子運輸的結果［12］。不同海洋生物對鹽度變化的適應機制不相同。本研究以四指馬鲅幼魚為研究對象，分析四指馬鲅幼魚鰓、心臟、脾臟和肝臟在鹽度0 和9 下的反應?！緮M解決的關鍵問題】利用掃描電子顯微鏡技術和組織石蠟切片，分析四指馬鲅幼魚鰓、心臟、脾臟和肝臟對急性淡水脅迫的適應性，為四指馬鲅的低鹽度養殖及良種選育提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

四指馬鲅為中國水產科學研究院南海水產研究所中山科技成果轉化基地自繁自育，14 日齡，平均全長2.31 cm，平均體質量3.81 g。試驗所用水族箱長58 cm、寬48 cm、高45 cm，水位28 cm。試驗開始日期為2021 年7 月，開始前于室內暫養7 d，暫養鹽度為9.0±0.5，水溫28（±1）℃，期間每天換水1 次，每次換水1/3 并連續24 h 充氣增氧。暫養期結束時隨機挑選體色正常、體格均勻且健康的魚進行正式試驗。

1.2 試驗方法

1.2.1 試驗設計 試驗共設淡水脅迫（鹽度為0）2、6、12、24、48、72 h 共6 個處理，未受淡水脅迫的正常鹽度（鹽度為9）處理為對照，每個處理設3 個平行，每個平行30 尾魚。將暫養于鹽度9 水體中的四指馬鲅幼魚放入鹽度0 的水體中。試驗期間水溫控制在26～28 ℃之間，連續充氣增氧，每天換水1 次，每次換水1/3，調節鹽度，誤差不超過0.5。每天9:00 和17:00 各投喂1 次，喂食1 h 后將殘餌及糞便用虹吸法吸出。

1.2.2 樣品采集與處理 在2、6、12、24、48、72 h 時，從相應處理中隨機選取3 尾魚，活體取魚鰓、心臟、脾臟和肝臟組織，分別切成小塊，用4%多聚甲醛溶液固定。固定后將樣品在流水中沖洗12 h，在50%～100%的乙醇梯度中脫水（50%乙醇2 h，70%乙醇4 h，80%乙醇2 h，85%乙醇2 h，95%乙醇45 min×2 次，100%乙醇45 min×2 次）；用二甲苯進行透明處理（1/2 無水乙醇+1/2二甲苯混合物1 h，二甲苯15 min×2次）；浸蠟（石蠟2 h×2 次），石蠟包埋、切片（厚度5～6 μm），蘇木精-曙紅（HE）染色，用中性樹脂密封；在光學顯微鏡（MZDR0850）下觀察和拍照。

2 結果與分析

2.1 急性淡水脅迫對四指馬鲅幼魚鰓組織結構的影響

由表1 可知，淡水脅迫2～72 h 對四指馬鲅幼魚鰓小片長度、寬度和間距的影響不同，鰓小片長度出現逐漸增長的趨勢，寬度先縮小后逐漸增大，鰓小片間距則先增大后有回落。由圖1 可見，對照（圖1a）四指馬鲅幼魚未受到脅迫，細胞具有正常的生理形態，鰓絲整齊致密，兩側鰓小片對稱完整，上皮細胞排列有序，線粒體細胞呈橢圓形。淡水脅迫2 h 時（圖1b），線粒體豐富細胞數量增加，血細胞數量變多，鰓小片的表皮輕微剝落，鰓細胞末端輕微腫脹。淡水脅迫6 h 時（圖1c），線粒體豐富細胞數量明顯增多，血細胞數量增多，表皮脫落明顯增多。淡水脅迫12 h 時（圖1d），線粒體豐富細胞數量與淡水脅迫6 h 相比沒有明顯變化，但體積增大，并出現向上蔓延的趨勢；血細胞數量減少，表皮脫落情況與淡水脅迫6 h 沒有明顯差別，鰓小片末端變小。淡水脅迫24 h 時（圖1e），鰓絲和鰓小片基部線粒體豐富細胞數量變多，體積變大，繼續呈向上蔓延趨勢；血細胞數量增多，表皮脫落情況與淡水脅迫6 h 沒有明顯差別，鰓小片末端明顯變小。淡水脅迫48 h 時（圖1f），鰓小片上（非基部）的線粒體豐富細胞數量增多，鰓小片末端表皮出現小范圍脫落，紅細胞吸水漲破。淡水脅迫72 h 時（圖1g），鰓小片上（非基部）線粒體豐富細胞數量明顯增多，位置進一步上升；鰓小片末端的表皮大量脫落，血細胞數量比淡水脅迫48 h 時減少，鰓小片形狀不規則。

圖1 急性淡水脅迫對四指馬鲅幼魚鰓組織結構的影響Fig.1 Effect of acute freshwater stress on the tissue structure of the gill of juvenile Eleutheronema tetradactylum

表1 急性淡水脅迫對四指馬鲅幼魚鰓小片長度、寬度和間距的影響Table 1 Effects of acute freshwater stress on the length,width and spacing of gill lamella of juvenile Eleutheronema tetradactylum

2.2 急性淡水脅迫對四指馬鲅幼魚心臟組織結構的影響

由圖2a 可見，對照四指馬鲅幼魚未受到脅迫，心肌橫紋肌明顯，細胞核清晰，間質血管大小適中，肌細胞束間界限明顯。淡水脅迫2 h 時（圖2b），心肌橫紋肌、心肌細胞間隙略有變大，間質血管也稍微變大。淡水脅迫6 h 時（圖2c），心肌橫紋肌逐漸膨脹，心肌細胞間隙、間質血管逐漸變大。淡水脅迫12 h 時（圖2d），心肌橫紋肌達到最大值，心肌細胞間隙和間質血管大小明顯變大。淡水脅迫24 h 時（圖2e），心肌橫紋肌開始縮小，心肌細胞間隙和間質血管達到最大值。淡水脅迫48 h 后（圖2f），心肌細胞間隙逐漸變小，并且心肌間質血管也逐漸變小，心肌橫紋肌較為明顯。淡水脅迫72 h 時（圖2g），心肌橫紋肌略模糊，心肌細胞間隙、間質血管變得更小，肌細胞束間界限不明顯，細胞核沒有之前清晰?？傮w來說，心肌橫紋肌大小、心肌細胞間隙大小和間質血管大小均呈現先增后減的趨勢。心肌橫紋肌大小的峰值出現在淡水脅迫12 h 時，心肌細胞間隙和間質血管大小的峰值則出現在淡水脅迫24 h 時。

圖2 急性淡水脅迫對四指馬鲅幼魚心臟組織結構的影響Fig.2 Effect of acute freshwater stress on the tissue structure of the heart of juvenile Eleutheronema tetradactylum

2.3 急性淡水脅迫對四指馬鲅幼魚脾臟組織結構的影響

由圖3a 可見，對照四指馬鲅幼魚脾臟最外層被膜較厚，表面覆有間皮，被膜結締組織伸入脾內形成許多小梁，小梁和被膜內的平滑肌細胞較為規整。被膜以下由紅髓、邊緣區和白髓組成，白髓區域面積相對紅髓區域明顯小很多，黑色素巨噬細胞顏色較淺。與對照相比較，淡水脅迫2 h 時（圖3b），白髓面積和邊緣區面積增加，黑色素巨噬細胞顏色也略有加深。淡水脅迫6 h 時（圖3c），白髓和邊緣區面積進一步擴大，黑色素巨噬細胞的顏色進一步加深。淡水脅迫12 h 時（圖3d），白髓面積增大，組織中紅細胞數量增多，邊緣區面積增大，黑色素巨噬細胞顏色變深。淡水脅迫24 h 時（圖3e），白髓和邊緣區面積達到峰值，黑色素巨噬細胞顏色也達到峰值。淡水脅迫48 h 時（圖3f），白髓和邊緣區面積減小，黑色素巨噬細胞顏色變淺。淡水脅迫72 h 時（圖3g），紅髓、邊緣區、白髓和黑色素巨噬細胞基本恢復至對照水平。

圖3 急性淡水脅迫對四指馬鲅幼魚脾臟組織結構的影響Fig.3 Effect of acute freshwater stress on the tissue structure of the spleen of juvenile Eleutheronema tetradactylum

2.4 急性淡水脅迫對四指馬鲅幼魚肝臟組織結構的影響

由圖4a 可見，未受到脅迫的對照肝細胞體積較大，呈多面體，細胞核呈圓球形且位于中央，部分肝細胞具有2～3 個核；肝板結構清晰；肝血竇形態正常，分布于肝細胞之間。淡水脅迫2 h時（圖4b），肝板結構變得模糊，肝小葉空泡相對增大，肝血竇間隙增寬，部分細胞核向肝外側遷移。淡水脅迫6 h 時（圖4c），肝板結構更模糊，肝小葉空泡繼續增大，肝血竇間隙增寬，更多細胞核向肝外側遷移。淡水脅迫12 h 時（圖4d），肝板結構進一步模糊，肝小葉空泡繼續增大，肝血竇間隙增寬，絕大部分細胞核位于細胞邊緣，同時血管形狀變得不規則。淡水脅迫24 h 時（圖4e），肝板結構的模糊程度達到頂峰，肝血竇間隙寬度也達到頂峰，肝小葉空泡繼續增大；大部分肝細胞核失去原有形態，多數細胞核變形呈紡錘形或圓形。淡水脅迫48 h 時（圖4f），細胞空泡持續增大，細胞著色較淺，肝小板結構變得清晰，肝血竇間隙寬度縮小，一些細胞核失去固有形態。淡水脅迫72 h 時（圖4g），細胞空泡繼續增大，肝小板結構清晰，肝血竇間隙寬度繼續縮小，大部分細胞核失去固有形態且位于細胞邊緣。

圖4 急性淡水脅迫對四指馬鲅幼魚肝臟組織結構的影響Fig.4 Effect of acute freshwater stress on the tissue structure of the liver of juvenile Eleutheronema tetradactylum

3 討論

3.1 急性淡水脅迫對四指馬鲅幼魚鰓組織結構的影響

鰓是多數水生動物的呼吸器官，用來吸收溶解在水中的氧。急性鹽度脅迫可以影響魚類的滲透壓平衡及細胞膜的通透性［13］。魚類鰓組織的線粒體豐富細胞主要負責離子的攝取和分泌［14-16］。牛瑩月等［17］研究發現，與對照鹽度10 處理相比，生活在鹽度5 低鹽度水體中的四指馬鲅幼魚的鰓小片變細變長，向外延伸。本研究也發現隨著淡水脅迫時間的延長，鰓小片長度呈現逐漸增長的趨勢。鰓小片通過增加長度的方式以增加與水體的接觸面，從而攝取水環境中的無機離子以適應在低滲環境中生存。研究發現，不同魚類還可以通過改變鰓絲上皮結構來適應環境中的鹽度變化。當對幼年鱸魚（Lateolabrax japonicus）［18］施加不同的鹽度壓力時，淡水處理鱸魚的鰓片排列緊密，只有少量的氯細胞（即線粒體豐富細胞）分布，而暴露在鹽度15 的幼年鱸魚，其鰓片上的氯細胞增加并含有大量的粘液細胞。本研究滲透壓的突變使得淡水脅迫2 h 時四指馬鲅幼魚鰓的扁平上皮細胞出現輕微脫落，并在48 h 時出現大量脫落，這可能是由于長期淡水脅迫導致鰓的滲透壓紊亂。維持滲透壓和劇烈運動都會導致細胞呼吸增加，從而導致耗氧量增加，這就需要更多的紅細胞來運輸氧氣，從而使鰓片中出現更多紅細胞，但低水溫導致鰓血管收縮，導致紅細胞分布不均，局部出現大量血細胞堆積。這與陳彩芳等［19］對泥蚶（Tegillarca granosa）的研究結果相似。本研究中，淡水脅迫72 h 時四指馬鲅幼魚鰓血細胞數量出現回落，推測四指馬鲅幼魚已經適應了淡水環境。

增加尿液排泄也是維持魚體內滲透壓的一種方式，多余的水通過尿液從體內排出，從而使滲透壓恢復穩定。鰓小片末端變細可能與魚體大量排水有關。郭印等［20］將美洲鰣（Alosa sapidissims）幼魚投入淡水及鹽度5、10、20 的環境下96 h，結果發現，24 h 后各處理幼魚的滲透壓隨時間變化均呈下降趨勢并逐漸穩定。本研究中，四指馬鲅幼魚鰓絲的形態在淡水脅迫24 h內仍完整，此時它們可能處于積極恢復滲透調節的階段；而淡水脅迫24 h后，鰓小片末端明顯變細，表明四指馬鲅幼魚通過調節體內含水量來適應急性淡水脅迫。

鰓至少負責兩個重要功能，攝取氧氣和離子-水平衡［20］。維持溫帶海洋魚類的離子平衡，主要取決于鰓上皮的線粒體豐富細胞水平［21］。大量的線粒體分布在線粒體豐富細胞內、核上和基底層［22-23］。線粒體豐富細胞適應外部水環境鹽度的變化，主要通過細胞結構、形態和功能變化，以及結構變化導致亞型之間發生可逆的轉變來維持其生存。線粒體豐富細胞通過主動運輸來加強水氧的交換量，使其能更好地適應低鹽環境［24］。線粒體豐富細胞主要分布在鰓小葉的基部，其頂端小窩開口于鰓的表面，與外界環境直接接觸。線粒體豐富細胞在鰓上皮中所占比例雖然不高，僅約為8%，但在物質交換的過程中發揮主動運輸功能［25］。

線粒體豐富細胞的形態結構、分布和數量適應環境中滲透條件的變化，但物種之間存在一些差異。一般來說，線粒體豐富細胞在廣鹽性硬骨魚鰓上皮的分布有3 種適應高滲或低滲環境的特點：（1）無論淡水或海水馴化時，線粒體豐富細胞僅分布在鰓絲上皮內；（2）海水高滲環境時，線粒體豐富細胞分布在鰓絲上皮內，但經淡水低滲環境馴化，線粒體豐富細胞在鰓小片上皮內也會有分布；（3）無論淡水或海水馴化，鰓絲和鰓小片上皮內均有線粒體豐富細胞分布［26］。本研究結果顯示，低鹽環境下四指馬鲅幼魚需要大量的能量來維持滲透壓平衡，因此線粒體豐富細胞數量逐漸增加；而線粒體豐富細胞數量也隨著應激時間的延遲而增加。當線粒體豐富細胞布滿基部后，該細胞呈向鰓小片末端蔓延的趨勢，表明線粒體豐富細胞在滲透壓調節上發揮非常重要的作用。區又君等［27］也提出相似觀點，線粒體豐富細胞結構和功能的適應性變化規律，是大多數廣鹽性魚類能適應復雜多變水體鹽度的主要原因之一。扁平上皮細胞是鰓組織結構的主要組成部分，主要以被動運輸方式參與鰓的生理功能，其表面的微脊能進一步增加鰓組織與水體的接觸面，起到增強氣體交換的作用。莊青青等［28］研究發現，在低滲環境中，由于尼羅羅非魚（Oreochromis niloticus）體內的離子濃度比環境高，魚傾向于滲透性地吸收水，盡管多余的水會被腎臟排出體外，但尿液中損失的一些鹽分通過鰓的主動吸收得到補償。此時，活性離子吸收的壓力增加，需要更多的線粒體豐富細胞參與鹽離子的吸收，導致鹽度為0 時的線粒體豐富細胞數量比鹽度為10 時增加。

3.2 急性淡水脅迫對四指馬鲅幼魚心臟組織結構的影響

心臟是魚類最重要的能量供應器官，與物質的運輸、內部環境的穩定和魚類的防御功能密切相關［29］。環境脅迫會使得魚類心臟受到損傷［30-31］。劉垚等［32］研究發現，高鹽飲食會導致人的心室肥大，心腔擴大；隨著時間推移，心室失代償，心室肌肉肥大，心臟逐漸喪失代償能力。本研究中，四指馬鲅幼魚心肌橫紋肌隨著淡水脅迫時間的延長逐漸變大，淡水脅迫12 h 時達到峰值，隨后逐漸縮小趨于脅迫前水平。這表明與高鹽對人類心臟的影響相似，低鹽脅迫對四指馬鲅幼魚心臟的損傷主要體現在心肌橫紋肌增厚。但四指馬鲅幼魚與斑馬魚（Danio rerio）類似，心臟的修復能力較好［31］，故隨著時間的推移損傷逐漸消失。郭曉麗等［33］在熱應激對大菱鲆（Scophthalmus maximus）心肌損傷及細胞凋亡的影響研究中指出，在24 ℃下熱應激12 h 內，心肌細胞出現增厚、腫脹、透明質變和染色質固縮，說明在熱應激下心肌細胞的收縮能力增強，增加了機體的散熱以維持生理活動。本研究中四指馬鲅幼魚心肌細胞在受到急性淡水脅迫后出現變粗的現象，這與前述研究相似，表明心肌細胞在急性淡水脅迫下擴張能力增強，以維持其正常生理活動。

Wang等［34］指出，高鹽暴露會增加胚胎發育過程中雛雞心血管異常循環和心腔內充血的風險，但心室細胞增殖和凋亡都增加。心室心肌細胞中高鹽誘導的高滲透壓導致的不完全分化與之類似。本研究中淡水脅迫的四指馬鲅幼魚心肌細胞和間質血管粗細的先增后減變化，表明急性淡水脅迫會對四指馬鲅幼魚的心臟組織產生損害，并導致流向心臟的血液減少，從而影響營養物質的攝取和吸收。經過48 h 的恢復，間隙減小到壓力前的水平，充血減少，表明心臟組織能夠更好地修復淡水脅迫造成的損害。與之類似，許多脊椎動物可以使失去的組織和器官再生。如斑馬魚的心臟在受到嚴重傷害或組織損傷后可以再生，在斑馬魚心臟再生過程中，心肌細胞在7 dpa 時開始進行DNA 合成和細胞增殖；增殖活動在14 dpa 達到高峰；新的心肌細胞取代了大部分失去的心室組織，心臟結構在30 dpa 時完全恢復［31］。Morgenroth等［10］指出，廣鹽性魚類在低鹽度養殖條件下，體液與周圍水體的滲透梯度降低，從而降低調節滲透壓的能量成本，而能量可能被引導到生長等其他過程，其對黃尾鰤［10］的研究驗證了這個結論。

3.3 急性淡水脅迫對四指馬鲅幼魚脾臟組織結構的影響

脾臟是魚體內最大的周圍淋巴器官，位于血液循環的通路上，有過濾血液以及對侵入血內的抗原產生免疫應答等重要功能。脾分為白髓、邊緣區和紅髓3個部分，脾內有大量血竇。本研究中，淡水脅迫0～24 h 的白髓面積逐漸增大，后逐漸回落，這與運輸脅迫對四指馬鲅幼魚脾臟的影響研究結論［35］相似。脾臟免疫功能的強弱與脾臟白髓的面積密切相關，伍智等［36］研究發現，馬來穿山甲（Manis javaniaca）脾臟白髓的面積遠比其他哺乳動物小，也就是脾小體和動脈周圍淋巴鞘的數量少，使得馬來穿山甲的免疫能力較差。胡玲玲等［37］也提到，脾臟對條石鯛（Oplegnathus fasciatus）的免疫能力有重大影響。本研究中，白髓面積增大體現了四指馬鲅幼魚為了適應淡水脅迫，增加了脾小體和動脈周圍淋巴鞘的數量，從而增強對環境突變的適應能力；淡水脅迫24～72 h白髓和紅髓區域趨于正常，淋巴細胞數量恢復正常，表明四指馬鲅幼魚體內的有害物質減少，脾臟應答能力恢復正常。黑色素巨噬細胞在集中處理體內各種外源性和內源性物質降解和再循環中發揮重要作用。衰老、饑餓、感染疾病、毒物作用等均有可能導致黑色素巨噬細胞增多［38］。本研究中黑色素巨噬細胞在受到淡水脅迫24 h 內逐漸增大、顏色加深、數量增多，可能與血液中可溶或顆粒物質先變多后變少有關，之后四指馬鲅幼魚適應了淡水環境，黑色素巨噬細胞的顏色逐漸恢復至脅迫前水平。

3.4 急性淡水脅迫對四指馬鲅幼魚肝臟組織結構的影響

肝臟位于魚腹腔前部，由許多角形肝細胞所形成的肝小葉集合而成，肝小葉中央靜脈分布不整齊，肝細胞往往不規則地排列在中央靜脈周圍。肝細胞的大小隨脂肪和糖原的貯藏量而變。在對泥鰍（Misgurnus anguillicaudatus）的急性氨氮脅迫研究中發現，隨脅迫時間延長，肝細胞空泡逐漸增大，細胞核形狀異常，內容物大量外泄［39］。本試驗結果與其相類似，隨著淡水脅迫時間的延長，細胞空泡逐漸增大，72 h 時達到最大值。這可能是由于在鹽度脅迫下，肝糖原被大量消耗以調節滲透壓，也有可能是因為脅迫導致肝糖原代謝和合成平衡被打亂。劉恩光等［40］研究表明，急性熱脅迫下的白梭吻鱸（Sander lucioperca）肝臟出現嚴重的空泡化，主要原因是高溫脅迫增加了細胞脂質過氧化水平，降低了細胞抗氧化能力。陳世喜等［41］也觀察到，隨著急性低氧脅迫時間延長，卵形鯧鲹（Trachinotus ovatus）肝組織空泡體積變大（肝糖原分解所致）；肝血竇間隙先逐漸擴大，24 h 時達到頂峰，后逐漸縮?。幻{迫前24 h，由于魚體調節滲透壓，耗氧量增大，血竇間隙隨之增大；脅迫24～48 h 后，魚體適應了淡水環境，耗氧量減小，血竇間隙隨之減小。這與本研究四指馬鲅幼魚在急性淡水脅迫下肝臟組織結構的恢復速度類似［42］。當時脅迫12 h 后，四指馬鲅幼魚血管形狀開始變得不規則，說明滲透壓的變化導致肝臟收縮，進而導致血管收縮。也有可能是因脅迫時魚體快速游動、撞擊導致的機械損傷。細胞核形態在淡水脅迫24 h 內較為正常，淡水脅迫48～72 h 卻出現了內容物流出的現象，說明魚體會在淡水脅迫24 h 后大致適應急性淡水脅迫，但脅迫并非完全不會對肝臟造成損傷，脅迫對細胞核的影響較大。區又君等［27］在急性低溫脅迫對四指馬鲅幼魚肝臟組織結構的影響研究中也發現，長期暴露在低溫環境下，魚的肝臟逐漸失去自我調節能力，部分肝細胞嚴重損傷直至細胞核萎縮或消失。

4 結論

本研究對急性淡水脅迫下四指馬鲅幼魚的鰓、心臟、脾臟和肝臟組織結構進行研究，結果發現，線粒體豐富細胞隨著脅迫時間延長而逐漸增加，部分肝細胞核逐漸萎縮甚至消失。四指馬鲅幼魚的鰓小片，心肌細胞，脾臟紅髓、白髓、邊緣區、黑色素巨噬細胞，肝板和肝血竇等大部分結構在淡水脅迫24 h 內有一定的應激反應，如鰓小片長度出現逐漸增長的趨勢，寬度先縮小后又逐漸增大，鰓小片間距先增大后有回落；隨著脅迫時間的延長，這些應激反應又逐漸恢復至脅迫前水平，表明四指馬鲅幼魚對短時間的急性淡水脅迫有一定的適應能力。