血清SIRT1、GLP-2水平與潰瘍性結腸炎患者病情嚴重程度及臨床轉歸的關系

盧麗娜,郭慧麗,龐敏

(北京市平谷區醫院消化內科,北京 101200)

潰瘍性結腸炎(ulcerative colitis,UC)是一種非特異性炎癥性腸病,臨床表現主要為腹痛、腹瀉及血便等,病情易反復發作,對患者身心健康造成嚴重影響。目前,臨床常將Mayo內鏡評分用于UC病情的評估,但結腸鏡檢查屬于有創操作,不易被患者接受,且存在評估不準確的情況[1]。因此,探尋能夠輔助評估UC病情的生物標志物有著重要意義。研究[2-3]表明,炎癥反應所致的腸黏膜損傷是UC發病的重要病理改變,多種細胞因子參與其中。沉默信息調節因子2相關酶1(SIRT1)是一種具有抗炎活性的蛋白質,參與著腸道炎癥反應調節過程[4]。胰高血糖素樣肽2(GLP-2)是一種新型的腸上皮特異性生長因子,能夠通過介導G蛋白偶聯受體而對腸道細胞產生保護作用[5]。研究[6]發現,GLP-2有助于抑制炎癥反應,促進腸黏膜的修復。目前關于SIRT1、GLP-2水平與UC相關性研究的報道尚缺乏。本研究通過檢測UC患者血清SIRT1、GLP-2水平,并探討其與病情程度及預后的關系。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2021年1月至2022年12月北京市平谷區醫院收治的88例UC患者為研究對象。其中男性53例,女性35例;年齡(41.78±6.27)歲。納入標準:(1)經結腸鏡組織病理學檢查確診為UC,符合《中國炎癥性腸病組織病理診斷共識意見》[7]中有關診斷標準;(2)年齡≥18歲;(3)自愿參與研究。排除標準:(1)既往有UC病史者;(2)合并重要臟器(心、肝、腎等)功能不全者;(3)合并腸結核或腸梗阻者;(4)合并嚴重感染性疾病者;(5)合并嚴重血液系統疾病者;(6)合并惡性腫瘤者;(7)孕婦或處于哺乳期女性。根據Mayo評分進行病情分級,將患者分為活動期組(Mayo評分>2分,n=59)與緩解期組(Mayo評分為0～2分,n=29);59例活動期患者中,輕度者19例(Mayo評分為3～5分),中度者22例(Mayo評分為6～10分),重度者18例(Mayo評分為11～12分)。另選取同期在本院的體檢健康者50名作為對照組,其中男性29名,女性31名,年齡(40.58±6.14)歲。UC組與對照組一般資料比較,差異無統計學意義(P>0.05)。本研究獲得本院倫理委員會批準,且與受試者簽署知情同意書。

1.2 方法

1.2.1 血清SIRT1、GLP-2水平的檢測 患者均于入院次日清晨采集空腹靜脈血4 mL,于4 ℃條件下離心(3 000 r/min,半徑13.5 cm)10 min,收集血清,置于-70 ℃環境下保存待測,于48 h內完成檢測。采用酶聯免疫吸附法進行SIRT1、GLP-2的檢測,試劑盒均由南京健成生物工程研究所提供,檢測步驟嚴格遵照試劑盒說明書進行。對照組于體檢當天采血,采取同樣方法檢測SIRT1、GLP-2水平。

1.2.2 治療方法及預后分組 活動期組患者中輕中度患者予以美沙拉嗪腸溶片(德國福克制藥股份有限公司)口服,每次兩片,4次/d,重度患者予以美沙拉嗪腸溶片上述劑量及醋酸潑尼松片(劑量為1 mg·kg-1·d-1,天津天藥藥業股份有限公司)口服;緩解期組患者予以美沙拉嗪腸溶片每次2片,3次/d口服,以28 d為1個療程,根據患者病情控制狀況,服用1～2個療程。于治療兩個月后行結腸鏡復查,根據患者療效預后將患者分為好轉組(患者腹瀉、腹痛等癥狀明顯減輕或者消失,鏡檢顯示腸黏膜改善,n=61)與未好轉組(患者臨床癥狀及鏡下腸黏膜未見改善,n=27)。

1.3 統計學分析

2 結果

2.1 UC組與對照組血清SIRT1、GLP-2水平比較

UC組患者血清SIRT1、GLP-2水平均低于對照組(P<0.05)。見表1。

表1 UC組與對照組血清SIRT1、GLP-2水平比較

2.2 緩解期組與活動期組患者血清SIRT1、GLP-2水平比較

活動期組患者血清SIRT1、GLP-2水平均低于緩解期患者(P<0.05)。見表2。

表2 緩解期與活動期UC患者血清SIRT1、GLP-2水平比較

2.3 活動期組不同病情程度患者血清SIRT1、GLP-2水平比較

活動期組患者中,隨病情程度加重,患者血清SIRT1、GLP-2水平均逐漸降低(P<0.05)。見表3。

表3 活動期UC患者不同病情程度組血清SIRT1、GLP-2水平比較

2.4 血清SIRT1、GLP-2水平與患者療效預后比較

與好轉組比較,未好轉組患者血清SIRT1、GLP-2水平及CRP、ESR水平降低(P<0.05)。以治療后是否好轉為因變量(好轉=0,未好轉=1)為因變量,以單因素分析中有統計學意義的因素為自變量進行Logistic回歸分析,結果表明,患者血清SIRT1、GLP-2水平降低是UC患者治療后未好轉的危險因素(P<0.05)。見表4及表5。

表5 UC患者治療后療效預后影響因素的Logistic回歸分析

表4 不同療效預后組血清SIRT1、GLP-2水平等臨床資料比較

2.5 血清SIRT1、GLP-2對UC患者治療后未好轉的預測價值

血清SIRT1、GLP-2水平預測UC患者治療后未好轉的ROC曲線下面積(AUC)為0.722、0.713,差異無統計學意義(Z=0.096,P=0.924);二者聯合預測的AUC為0.832,高于單一SIRT1、GLP-2檢測(Z=2.057、2.432,P=0.040、0.015)。見表6及圖1。

表6 血清SIRT1、GLP-2水平預測UC患者治療后未好轉的效能

3 討論

UC是一種腸道慢性炎癥疾病,腸道黏膜免疫失衡所致的炎癥反應是其重要發病機制,持續性的腸道黏膜炎癥可造成腸道屏障功能損傷,由于病情反復,給患者造成巨大的痛苦[8]。準確評估UC患者病情對于臨床診治有著重要意義。目前,對于UC病情的評估,常規生化指標如CRP、ESR的效能有限[9]。因此,探尋UC病情評估的新型生物標志物尤為重要。

炎癥因子過度釋放是腸道炎癥疾病發病的關鍵因素[10]。SIRT1是細胞核中被廣泛研究的一種乙酰化酶,作為Sirtuin蛋白家族的重要成員,其能夠通過去乙酰化作用抑制核因子-κB與核內炎癥相關基因的結合,而發揮抗炎、抗氧化的作用[11]。研究[12]證實,在慢性炎癥損傷過程中,SIRT1可發揮保護作用。Tang[13]發現,在機體缺血、缺氧狀態下,上調SIRT1表達能夠抑制心肌細胞凋亡,發揮心肌保護作用。Hansen等[14]報道,SIRT1能夠抑制結腸炎小鼠模型白細胞介素-6等炎癥因子的表達,有效緩解炎癥反應,減輕腸道黏膜損傷。在UC動物模型中,SIRT1能夠抑制炎癥因子的產生,緩解UC小鼠模型腸黏膜損傷[15]。以上研究提示SIRT1可能通過調控炎癥反應,而參與UC的病理過程中。有研究[16]報道,血清SIRT1可用于新生兒小腸結腸炎的診斷,但關于SIRT1是否可用于UC的病情評估尚不清楚。本研究結果發現,UC患者血清SIRT1水平表達降低,活動期患者SIRT1水平低于緩解期,且隨著病情程度加重,血清SIRT1水平逐漸降低,這提示SIRT1表達降低與UC疾病活動性及病情程度相關,可作為臨床輔助診斷的指標。

GLP-2是近年新發現的腸上皮特異性生長因子,是一種由33個氨基酸所組成的多肽物質,主要由腸道L內分泌系統合成,具有促進腸道、黏膜生長和維持腸道屏障功能的作用[17]。研究[18]發現,GLP-2能夠通過作用于腸上皮細胞GLP-2受體而促進腸上皮細胞的增殖。GLP-2還可抑制腸壁促炎癥因子的表達,利于腸黏膜的再生與修復。在壞死性小腸結腸炎的動物模型中,GLP-2能夠通過抑制腫瘤壞死因子-α等炎癥介質的釋放,而減輕腸壁損傷[19]。王金虎等[20]研究顯示,壞死性小腸結腸炎患兒血清GLP-2表達降低,且與病情嚴重程度相關。本研究中,UC患者血清GLP-2水平表達降低,活動期患者水平低于緩解期,且隨著病情程度加重,血清GLP-2水平逐漸降低,提示GLP-2可能參與了UC的發病和進展過程。隨著UC發生發展,腸上皮黏膜屏障破壞,機體炎癥因子釋放增多,引起上皮屏障共破壞,刺激核因子-κB活化,使得GLP-2表達降低,隨著病情加重而變化[5],因此GLP-2可作為UC病情的評估指標。

本研究中,未好轉組血清SIRT1、GLP-2水平低于好轉組,且Logistic回歸分析表明SIRT1、GLP-2水平降低是患者治療后未好轉的危險因素,可見SIRT1、GLP-2水平與患者臨床轉歸有關。同時ROC曲線分析表明,血清SIRT1、GLP-2水平預測治療后未好轉的AUC分別為0.722、0.713,二者聯合的AUC為0.832,表明二項指標對于療效有中等價值的預測效能,且聯合應用能進一步提高預測效能。因此,SIRT1、GLP-2水平不僅能夠評估患者病情,還可預測患者臨床轉歸。

綜上,本研究表明,UC患者血清SIRT1、GLP-2水平表達降低,二者與疾病活動度有關,可作為病情評估指標,并對臨床轉歸有較高的預測價值。本研究納入樣本量較小,所得結果仍需更大樣本量來驗證。