弓形蟲棒狀體蛋白15 的原核表達、純化及多克隆抗體的制備

蔣鵬，王澤祥，車亮，王由森，孫曉林

（甘肅農業大學動物醫學院，甘肅 蘭州 730070）

弓形蟲病是由弓形蟲寄生于哺乳動物、鳥類、海洋哺乳動物和人類而引起的一種原蟲病，分布于全球除南極以外的所有地區［1］。弓形蟲的生活史復雜，感染形式主要有3 種，分別是包含子孢子的卵囊、速殖子和包含緩殖子的包囊。包含緩殖子的包囊通常存在于慢性感染病例的腦組織、骨骼肌、內臟，能夠逃避宿主的免疫系統、抵抗藥物作用、轉化為具有毒力的速殖子［2］。速殖子通常存在于慢性感染病例體內，以內出芽法在有核細胞內生殖，在速殖子感染的細胞內會形成納蟲泡，速殖子在納蟲泡內復制。納蟲泡能夠保護速殖子免受宿主細胞溶酶體的降解，對弓形蟲速殖子在細胞內的生長是必需的［2］。

弓形蟲速殖子的頂質體主要由3個分泌性細胞器組成，分別是棒狀體、致密顆粒和微線體。棒狀體是頂復門原蟲共有的分泌性細胞器。弓形蟲棒狀體呈棒球狀，由前端的頸部和后端的球部構成［3-4］。弓形蟲棒狀體占據整個蟲體細胞總體積的1%～30%，在速殖子入侵宿主細胞和納蟲泡的生物合成中發揮作用。棒狀體蛋白在弓形蟲多個階段蟲體入侵宿主細胞過程中發揮作用，它們對于弓形蟲在宿主細胞內的生存是必需的［5-8］。學者對弓形蟲棒狀體蛋白質組學的研究表明，弓形蟲棒狀體包含38個蛋白質，目前發現11 個位于棒狀體球部、9 個位于棒狀體頸部［9-11］。許多棒狀體蛋白是弓形蟲的毒力因子，在弓形蟲的致病性方面發揮重要作用。……