臨床微生物檢驗中細菌耐藥性監測分析

錢王燕，陳訪，吉麗娟

上海交通大學醫學院蘇州九龍醫院檢驗科，江蘇蘇州 215000

細菌感染屬于臨床常見、多發病，近年來因環境變化、藥物使用等因素影響，各類細菌感染問題越發突出，且侵襲力不斷增強，給患者的健康帶來明顯威脅[1-2]。而隨著抗菌藥物使用范圍的持續性擴大以及用藥頻率的提升，部分微生物對抗菌藥物的耐藥性有一定增加，不少患者在使用抗菌藥物治療后療效不佳，且如抗菌藥物使用劑量、類別等不合理，甚至可能導致多重耐藥感染，進而導致治療難度進一步增加[3-4]。而耐藥菌株的蔓延、傳播也可能導致變異耐藥菌流行，對此臨床應當加以重視[5]。為了明確細菌感染現狀及常見細菌的耐藥性，各級醫院應當積極落實微生物檢驗以及耐藥性檢測，以指導臨床工作的開展[6-7]。基于此，本研究就上海交通大學醫學院蘇州九龍醫院2021年1月—2022年10月收集的2 880株病原菌監測樣本細菌種類分布情況及藥敏實驗結果進行分析，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇本院收集的2 880株病原菌監測樣本為研究對象。該2 880株病原菌標本主要源于：血液標本10 383份、痰液標本5 830份、尿液標本3 796份、分泌物標本1 118份。

1.2 納入與排除標準

納入標準：①留取標本操作規范；②標本未被污染；③及時檢測。排除標準：①重復性病原菌檢測標本；②未進行藥敏試驗標本。

1.3 方法

對采集的標本開展細菌培養工作，在培養完成后使用全自動微生物鑒定儀（儀器型號為VITEK-2）開展細菌鑒定，并開展藥敏實驗。在藥物耐藥性分析上，采用動態比濁法測定藥物最小抑菌濃度，配套使用GP67、GN67、GNXNO4藥敏板條，另外開展補充藥敏實驗，方法為紙片擴散法，常規進行耐藥性鑒定。

1.4 觀察指標

①分析分離病原菌的分布情況，計算每種菌株的例數及構成比。②分析藥敏實驗結果，選擇排名前5位的病原菌進行分析。其中將凝固酶陰性葡萄球菌分為耐甲氧西林與甲氧西林敏感凝固酶陰性葡萄球菌（methicillin-resistant/sensitive coagulasenegative Staphylococcus, MRCNS/MSCNS），金黃色葡萄球菌分為耐甲氧西林與甲氧西林敏感金黃色葡萄球菌（methicillin-resistant/sensitive staphylococcus aureus, MRSA/MSSA），而后進行分析。

1.5 統計方法

采用EXCEL處理數據，計數資料以頻數及百分率表示。

2 結果

2.1 病原菌分布情況分析

該2 880株病原菌占比排名前5的依次為：大腸埃希菌（23.26%）、肺炎克雷伯菌（16.15%）、銅綠假單胞菌（10.35%）、金黃色葡萄球菌（8.82%）、凝固酶陰性葡萄球菌（6.98%）。見表1。

表1 病原菌分布情況分析

2.2 細菌耐藥性監測分析

金黃色葡萄球菌中MRSA計90株，MSSA計164株。凝固酶陰性葡萄球菌中MRCNS計147株，MSCNS計54株。經檢驗大腸埃希菌耐藥性前3位：環丙沙星（57.9%）、左氧氟沙星（52.2%）、頭孢呋辛（50.4%）。肺炎克雷伯菌耐藥性前4位：環丙沙星（50.1%）、頭孢呋辛（47.5%）、頭孢噻肟（44.5%）、左氧氟沙星（43.2%）。銅綠假單胞菌耐藥性前3位：頭孢呋辛（81.2%）、亞胺培南（36.9%）、左氧氟沙星（36.6%）。MRSA耐藥性前3位：青霉素（100.0%）、紅霉素（52.2%）、克林霉素（35.6%）；MSSA則分別為：青霉素（81.1%）、紅霉素（40.2%）、左氧氟沙星與環丙沙星（均為12.2%，并列第3）。MRCNS耐藥性前3位：青霉素（98.6%）、左氧氟沙星（74.8%）、紅霉素（69.4%）；MSCNS則為：青霉素（70.4%）、紅霉素（48.1%）、左氧氟沙星（14.8%）。見表2。

表2 細菌耐藥性監測分析[n(%)]

3 討論

細菌對抗菌藥物產生耐藥性的原因在于其遺傳基因突變，產生耐藥基因，而這一變異存在遺傳性，隨著耐藥性的形成，可表現為長期耐藥[8-9]。耐藥細菌在患者體內持續性的繁殖，可造成抗生素作用目標菌種水平進一步降低，而耐藥細菌可逐漸成為優勢菌種，進而機體可產生對某種抗菌藥物的耐藥性[10-11]。而隨著目前臨床使用廣譜抗生素的增加，耐藥菌株不斷產生，多種抗菌藥物治療效果逐漸降低[12-13]。在該情況下，盲目使用抗生素可增加多重耐藥細菌感染的風險，患者的生命健康受到嚴重威脅，對此臨床應當積極開展微生物檢驗以及耐藥性監測，指導臨床合理使用抗菌藥物[14-15]。而從本研究2 880株病原菌的分析來看，排名前5的分別為大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌、銅綠假單胞菌、金黃色葡萄球菌以及凝固酶陰性葡萄球菌，其占比分別為：23.26%、16.15%、10.35%、8.82%、6.98%，另鮑氏不動桿菌也有較高占比，為4.83%，提示該類細菌感染在臨床中較為常見。朱江[16]研究中，對193株致病菌菌種進行分析發現，排名前6的分別為凝固酶陰性葡萄球菌（33.7%）、金黃色葡萄球菌（16.1%）、銅綠假單胞菌（10.4%）、大腸埃希菌（8.8%）、不動桿菌（7.7%）、克雷伯菌（6.2%），雖構成比有一定差異，但常見致病菌種類與本研究基本一致，證實了這些類致病菌感染在臨床中占比較高。

而在耐藥性檢測上，大腸埃希菌對環丙沙星（57.9%）、左氧氟沙星（52.2%）、頭孢呋辛（50.4%）有較高耐藥性，而對亞胺培南、美羅培南、阿卡米星等耐藥性較低，故對大腸埃希菌推薦采用這些藥物治療。而肺炎克雷伯菌對環丙沙星（50.1%）、頭孢呋辛（47.5%）、頭孢噻肟（44.5%）、左氧氟沙星（43.2%）均耐藥性較高，對其他常用抗菌藥物也存在不同程度耐藥，則考慮對應結合藥敏實驗結果靈活選擇抗菌藥物。銅綠假單胞菌對頭孢呋辛（81.2%）耐藥性最高，對阿卡米星、慶大霉素耐藥性較低。另外本研究中金黃色葡萄球菌（MRSA、MSSA）、凝固酶陰性葡萄球菌（MRCNS、MSCNS）均對青霉素、紅霉素有較高耐藥性，MRCNS對左氧氟沙星也有較高耐藥性，達74.8%，故不宜采用該類藥物治療，應綜合考慮患者病情、過敏反應以及機體狀態，選擇適宜的抗菌藥物。李振起[17]研究中，大腸埃希菌對環丙沙星、頭孢呋辛耐藥性分別為73.68%、78.95%；銅綠假單胞菌對頭孢呋辛耐藥性達100.00%；肺炎克雷伯菌對頭孢呋辛、環丙沙星耐藥性分別為53.33%、33.33%，均處于較高水平；而程慶妮等[18]研究中，MRSA、MSSA、MRCNS、MSCNS對青霉素耐藥性分別為98.15%、96.75%、95.19%、98.97%，對紅霉素耐藥性分別為91.98%、87.80%、87.01%、83.51%，另MRCNS對氧氟沙星耐藥性達84.13%，其研究結果與本研究基本一致，也佐證了本次耐藥性分析結果。

綜上所述，目前常見感染致病菌包括大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌、銅綠假單胞菌、金黃色葡萄球菌、凝固酶陰性葡萄球菌等，對各類抗菌藥物的耐藥性不一，應加強細菌耐藥性監測，以指導臨床合理用藥。