早產兒臍血AAG、IL-6、TNF-α水平對早發型敗血癥的預測價值

姚彥莉

早發型敗血癥(early onset sepsis,EOS)是指新生兒在出生后72 h內發生敗血癥,其中早產兒自身機體免疫防御系統較弱,導致EOS發病率、預后不良風險明顯高于足月兒,需給予重視[1,2]。目前,早產兒EOS早期診斷難度較大,細菌培養雖是金標準,但耗時較長,不利于早期診斷,而臍血是新生兒最早可獲取的血液樣本,故積極探索可靠且敏感的臍血標志物至關重要[3]。α1-酸性糖蛋白(α 1-acid glycoprotein,AAG)是血清中類黏蛋白的主要成分,在細菌感染引發炎癥反應時可大量合成、釋放,并促進炎癥反應發展[4]。白細胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)、腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)均是炎癥反應的產物,既往有研究表明,新生兒臍血中IL-6、TNF-α水平升高與其體內炎癥免疫應答密切相關[5,6]。但目前關于上述指標對早產兒EOS的預測價值及對預后的影響仍尚未明確,故本研究對該課題進行探討,旨在為臨床防治早產兒EOS提供臍血標志物。報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取我院2019年1月至2022年1月46例早產兒EOS患兒作為發生組,另選取同期46例無EOS早產兒作為未發生組。納入標準:孕周<37周,均為早產兒;EOS均符合新生兒敗血癥相關診斷標準[7],且發病時間在出生后72 h內;患兒監護人均知情,簽訂知情同意書。排除標準:存在先天性畸形者;伴有嚴重新生兒溶血病者;合并自身免疫性疾病者;伴有其他感染性疾病者。本研究經我院倫理委員會審批通過,批號:。

1.2 方法

1.2.1 臍血AAG、IL-6、TNF-α水平檢測方法:2組均于出生后留取臍血樣本,于胎兒娩出后,立即夾閉臍帶兩端,抽取2～3 ml臍動脈血,在室溫條件下靜置30 min,離心處理,離心速率為3 000 r/min,離心時間為5 min,取上清液,保存于-80℃條件下,備用。采用免疫比濁法檢測臍血AAG水平,試劑盒及特定蛋白分析儀購自德國西門子公司,采用酶聯免疫吸附法檢測臍血IL-6、TNF-α水平,試劑盒購自美國貝克曼庫爾特公司,所有操作嚴格遵循試劑盒說明書。

1.2.2 EOS治療方法:首先給予積極抗感染處理,待病原菌明確后根據藥敏試驗選擇合理抗生素,并采取適當改善通氣、血流動力學支持、營養支持、保護臟器等對癥治療措施。

1.2.3 預后判定方法[8]:治愈且出院時不遺留后遺癥判定為預后良好;出院時臨床癥狀無好轉;放棄治療自動出院3 d內死亡或住院期間死亡;住院期間發生需外科處理的并發癥,出現以上任何1種情況則判定為預后不良。

1.3 觀察指標 (1)2組臨床資料,包括胎齡、性別、分娩方式、母親妊娠期糖尿病、妊娠期高血壓疾病、極低出生體重兒、呼吸功能低下等資料。(2)2組臍血AAG、IL-6、TNF-α水平。(3)臍血AAG、IL-6、TNF-α水平與EOS發生的關系。(4)臍血AAG、IL-6、TNF-α水平對EOS的預測價值。(5)不同預后患兒臍血AAG、IL-6、TNF-α水平。(6)臍血AAG、IL-6、TNF-α水平對預后的影響。

2 結果

2.1 2組臨床資料比較 2組性別比、分娩方式、母親妊娠期糖尿病、妊娠期高血壓疾病比例差異無統計學意義(P>0.05);發生組胎齡短于未發生組,極低出生體重兒、呼吸功能低下比例高于未發生組(P<0.05)。見表1。

表1 2組臨床資料比較 n=46,例(%)

2.2 2組臍血AAG、IL-6、TNF-α水平 發生組臍血AAG、IL-6、TNF-α水平高于未發生組(P<0.05)。見表2。

表2 2組臍血AAG、IL-6、TNF-α水平比較 n=46,

2.3 臍血AAG、IL-6、TNF-α水平與EOS發生的關系 Logistic回歸分析方法,校正胎齡、極低出生體重兒、呼吸功能低下等其他因素前后,結果顯示,臍血AAG、IL-6、TNF-α均與EOS發生獨立相關(P<0.05)。見表3。

表3 臍血AAG、IL-6、TNF-α水平與EOS發生的關系

2.4 臍血AAG、IL-6、TNF-α水平對EOS的預測價值 ROC曲線分析,臍血AAG、IL-6、TNF-α預測EOS發生的AUC分別為0.765(95%CI:0.665～0.847)、0.718(95%CI:0.615～0.807)、0.818(95%CI:0.724～0.891),三者聯合預測EOS發生的AUC為0.925(95%CI:0.851～0.970),大于三者單獨預測。見圖1。

圖1 臍血AAG、IL-6、TNF-α水平對EOS的預測價值

2.5 不同預后患兒臍血AAG、IL-6、TNF-α水平 隨訪至所有患兒出院,預后良好31例,預后不良15例。預后不良患兒臍血AAG、IL-6、TNF-α水平高于預后良好患兒(P<0.05)。見表4。

表4 不同預后患兒臍血AAG、IL-6、TNF-α水平比較

2.6 臍血AAG、IL-6、TNF-α水平對預后的影響 以發生組所有患兒臍血AAG、IL-6、TNF-α水平平均值(2.26 g/L、30.21 pg/mL、3.72 μg/L)為界分為高水平與低水平患兒。危險度分析,臍血AAG、IL-6、TNF-α高水平患兒預后不良風險是低水平患兒的4.574倍(95%CI:1.165～17.967)、4.000倍(95%CI:1.298～12.326)、5.460倍(95%CI:1.386～21.509),差異均有統計學意義(P<0.05)。見表5。

表5 臍血AAG、IL-6、TNF-α水平對預后的影響

3 討論

早產兒EOS早期缺乏特異性表現,與常見感染類似,但其病情進展迅速,還極易并發血管內凝血、休克、多器官衰竭等嚴重并發癥,對患兒生命安全造成極大威脅[9,10]。及早準確有效診治能達到控制病情進展、降低并發癥與死亡風險、改善預后的目的。已有的臨床實踐證實,細菌培養作為EOS診斷的金標準,在新生兒EOS早期診治中的應用價值有限[11]。近年來,血清學診斷方式成為臨床早期診斷EOS的重要途徑,在此過程中,可靠的血清學指標是確保診斷效能的關鍵所在。

AAG是臨床常見急性時相反應蛋白之一,是血清中類黏蛋白的主要成分,在細菌感染引發炎癥反應時可大量合成、釋放,并促進炎癥反應發展既往有研究證實,急性感染期患者血液中AAG含量呈急劇增加趨勢,隨著炎癥控制逐漸下降,可作為判斷炎癥反應的有效指標[12,13]。IL-6屬于典型的促炎因子,是啟動細菌炎癥反應的關鍵細胞因子,在正常生理狀態下,其在血液中的含量極低或監測不到,一旦發生細菌感染則會迅速升高,在反映早期感染方面具有重要價值[14,15]。Ebenebe等[16]報道中顯示,IL-6不升高時新生兒敗血癥發病率約5%,IL-6升高時新生兒敗血癥發病率高達60%左右,說明其在新生兒敗血癥發生過程中扮演重要角色。TNF-α是一種內源性調節因子,作為炎性應答與感染的重要介質,能通過調節炎癥免疫反應參與感染性疾病發生發展過程[17,18]。有文獻指出,敗血癥作為細菌感染性疾病,勢必會導致機體免疫功能亢進,引發一系列炎癥免疫生理過程,而TNF-α在此過程中發揮關鍵的調節作用[19]。在上述研究基礎上,本研究結果顯示,發生組臍血AAG、IL-6、TNF-α水平高于未發生組,且Logistic回歸分析,校正其他因素前后,臍血AAG、IL-6、TNF-α均與EOS發生獨立相關,提示臍血AAG、IL-6、TNF-α水平異常升高參與早產兒EOS發生。分析原因,在于以下幾個方面:(1)炎癥反應發生后,可激活肝巨噬細胞、粒細胞、T細胞及內皮細胞,釋放大量的脂多聚糖,從而導致AAG過多合成、分泌,對機體免疫防御機制造成明顯破壞,進而促進炎癥反應發展,加重病情,最終引發敗血癥[20];(2)IL-6同樣是由T淋巴細胞、內皮細胞、單核型巨噬細胞產生,不僅會導致機體發熱,誘發炎癥反應,還能促進T淋巴細胞、B淋巴細胞自身增殖分化,從而啟動炎癥免疫應答反應,為急性時相反應蛋白的大量生成提供有利環境,進而不斷加快機體內炎癥反應擴散,促進EOS發生[21];(3)TNF-α能通過介導白細胞黏附在血管內皮細胞上,激活免疫T細胞及相關炎性細胞,刺激單核細胞產生大量炎性因子,同時誘導B細胞產生抗體,形成機體內因炎癥引起的免疫亢進反應,還可經由與其受體特異性結合后調控相關靶細胞,在敗血癥發生過程中發揮相關作用[22]。因此,提示臨床可將臍血AAG、IL-6、TNF-α作為臨床早期預測診斷早產兒EOS發生的重要血清學指標。

本研究數據,表明,臍血AAG、IL-6、TNF-α單獨預測EOS發生的價值有限,不適宜單獨應用于臨床早期預測中,故進一步嘗試探討三者聯合預測價值,結果發現,三者聯合預測EOS發生的AUC高達0.925,這為臨床早期預測提供了新的思路,有利于對EOS及早防治,改善預后。

此外,本研究隨訪至所有EOS患兒出院發現預后不良發生率高達32.61%,提示早產兒EOS患兒預后不良風險較高,臨床應給予重視。本研究還證實,預后不良患兒臍血AAG、IL-6、TNF-α水平高于預后良好患兒,高水平的臍血AAG、IL-6、TNF-α會明顯增加預后不良風險,可見臍血AAG、IL-6、TNF-α還能為臨床判斷預后不良風險提供有效信息,臨床應用價值較大。不足之處:本研究未詳細探討臍血AAG、IL-6、TNF-α對早產兒EOS患兒預后不良風險的具體預測價值,仍需進一步分析,以獲取更全面的數據支持。

綜上可知,早產兒臍血AAG、IL-6、TNF-α水平聯合預測EOS的價值較為可靠,且三者異常升高表達均會顯著增加預后不良風險,可為臨床防治、改善預后提供相關依據。