黃櫻初 鐘昌艷 阮良鵬 陸成光 羅幸 張曉霞



摘要:為了及時預防南美白對蝦疫病發生,提高疫病風險防控能力,降低疫病發生機率,科學處置潛在風險,提高南美白對蝦的產量和產值,開展南美白對蝦疫病監測及分析。文章旨在從南美白對蝦苗種疫病管理的角度出發,系統探討專項疫病監測結果分析與病害防控措施,逐步構建起完備、高效的南美白對蝦本土化養殖體系。
關鍵詞:南美白對蝦苗種 ;疫病監測 ;白斑綜合癥;防控措施
中圖分類號:S94? ? ? ? ? ? ?文獻標識碼:A
南美白對蝦又被稱為凡納濱對蝦,是現階段我國南方主要的對蝦養殖種類。近些年來,海南、廣東、廣西相關沿海省份,進行了苗種繁育、養殖等系列嘗試,獲得了巨大的經濟效益。隨著養殖規模的擴大以及不同來源苗種的引進,使得南美白對蝦病害頻發,對養殖戶帶來巨大經濟損失[1]。為了引進健康、優質的蝦苗進行養殖,欽南區水產技術推廣部門應當率先做好南美白對蝦苗種疫病監測。根據以往經驗,在細菌、病毒、病原生物等多種因素影響,南美白對蝦出現早期死亡綜合癥、白斑綜合癥等疫病的機率較大,蝦苗在發病后會出現厭料、白便、空腸空胃、甲殼潰瘍、肝胰臟萎縮、紅體、白斑等癥狀,滯緩生長速度,影響均勻度與成活率,嚴重的短時間內導致全部死亡,給養殖戶帶來嚴重的經濟損失[2]?,F階段,蝦苗場的苗種質量參差不齊,大部分養殖戶在苗種選購中存在盲目性,單憑經驗方法目測選購,沒有經過專業的苗種病毒檢測;在藥物品種的選擇與用量控制過程中,沒能根據疫病致病機理,進行科學用藥。
廣西欽州市欽南區是農業部對蝦優勢養殖區、“廣西對蝦之鄉”,2021年欽南區對蝦養殖面積達8.3萬畝,年產量5.6萬噸,對蝦養殖基地主要分布沿海8個鄉鎮,轄區內有38家蝦苗場,年培育蝦苗60億尾以上。近年來,該地區注重加大科技力量投入,通過池塘標準化改造、養殖尾水處理工程建設、引進新型高效養殖技術以及推廣引進優質苗種、做好苗種疫病監測等技術措施,進一步提高了對蝦的養殖產量。為保持良好發展勢頭,減少疫病對養殖的影響,實現養殖條件科學化調控,依托現有技術條件,定向做好蝦苗專項疫病監測,更好地指導對蝦養殖生產。
1? ?材料與方法
1.1? 樣品與來源
跟據廣西壯族自治區的有關文件精神,為強化養殖疫病防控,完善水生動物疫病防控體系,加強水生動物疫病監測預警和風險評估,提高重大疫病防控和應急處置能力。從2017年至今,在欽州市欽南區設立15-20個苗種場的監測點,每年對20-30個蝦苗樣品進行檢測,檢測項目有白斑綜合癥病毒(WSSV)、對蝦桃拉綜合癥病毒(TSV)、傳染性皮下及造血組織壞死病毒(IHHNV)、對蝦肝胰腺細小病毒(HPV)、對蝦黃頭病毒(YHV)、對蝦桿狀病毒(BP)、對蝦傳染性肌肉壞死病毒(IMNV)、急性肝胰腺壞死病毒(AHPND/EMS)、對蝦偷死野田村病毒(CMNV)、蝦血細胞虹彩病毒(SHIV)。
1.2? 樣品檢測方法
1.2.1? 樣品的采集:
嚴格按照《水生動物產地檢疫采樣技術規范》要求,開展南美白對蝦苗種樣品采集,所選蝦苗樣品長度在0.5厘米到1厘米,每批蝦苗采集兩份樣品,每一份樣品保證有600尾以上的蝦苗活體,將采集的樣品采用充氧運輸或干水低溫保存,回到實驗室馬上開展實驗室檢測[3]。
1.2.2? 水生動物病毒基因組DNA/RNA的提取:
取適量待檢新鮮樣品組織加入1-5倍的生理鹽水進行勻漿搗碎,取至少500微升勻漿至1.5毫升離心管中。離心5分鐘去除宿主細胞組織核酸。取100微升上清液質新的離心管中,加入300微升Buffer GXP至上清液中,顛倒混勻,靜置5-10分鐘裂解病毒。加入200微升無水乙醇至裂解液中,渦旋混勻20秒。把核酸吸附柱裝在2毫升收集管中。把裂解液全部轉移至核酸吸附柱核酸中,離心1分鐘。倒棄濾液,把核酸吸附柱裝回收集管中,加入400Buffer RW2至核酸吸附柱中,離心1分鐘,重復一遍這個步驟。倒棄收集管中的濾液,把核酸吸附柱裝回收集管中,離心3分鐘。把核酸吸附柱裝在新的1.5毫升離心管中。加入30-50微升DEPC水至核酸吸附柱中,靜置1-2分鐘,離心1分鐘,所得的溶液就是病毒基因組核酸溶液,若暫時不用,于-80℃儲存。
1.2.3? 各種對蝦病毒核酸檢測方法
采用的是恒溫擴增熒光法,所用的儀器是DEAOU-308C檢測儀。嚴格按照每一種病毒檢測的操作規程配制試劑,在設定的溫度時間內發生程序反應,做好陰性對照和陽性對照。為了保護蝦苗場的隱私,用“A蝦苗場、B蝦苗場、C蝦苗場、......來表示”。
2? 檢測結果的讀取與分析
2.1? 檢測結果的讀取
檢測結果有兩種讀取方式,第一種顯示檢測結果如圖1,在對蝦桿狀病毒檢測中,顯示“A蝦苗場、E蝦苗場、H蝦苗場及陽性對照”的檢測結果為陽性。再根據實驗圖2的擴增曲線,“A蝦苗場、E大蝦苗場、H蝦苗場及陽性對照”的擴增曲線呈“S”型曲線,且出峰時間≤60分鐘,則初步判斷為檢測陽性,含有對蝦桿狀病毒基因;如果曲線呈直線或輕微斜線無“S”型擴增曲線則為陰性。
本著對樣品的認真負責的態度,當樣品出現陽性曲線時要重檢一次,必要時送到廣西壯族自治區水產技術推廣總站實驗室復檢。
2.2? 2020年-2022年的南美白對蝦苗種專項疫病監測結果分析
在2020-2022年期間檢測中,欽南區水產檢測人員共抽樣檢測59個蝦苗樣品,每個蝦苗樣品同時開展10種病毒(WSSV、TSV、IHHNV、HPV、YHV、BP、IMNV、AHPND/EMS、CMNV、SHIV)的檢測,累計檢出病毒陽性樣本10批次(如表3)。其中2020年分別檢出WSSV陽性2批次、IHHNV陽性3批次和AHPND/EMS陽性1批次,病毒陽性檢出率分別是6.4%、9.7%和3.2%。2021年無檢出病毒陽性。2022年分別檢出IHHNV陽性1批次,BP陽性3批次,病毒陽性檢出率分別為5%和15%。由此得出,對蝦傳染性皮下及造血組織壞死病毒(IHHNV)檢出陽性4批次,次數最多,其次是對蝦桿狀病毒(BP)檢出陽性3批次。其余6種病毒如對蝦桃拉綜合癥病毒(TSV)、對蝦肝胰腺細小病毒(HPV)、對蝦黃頭病毒(YHV)、對蝦傳染性肌肉壞死病毒(IMNV)、對蝦偷死野田村病毒(CMNV)及蝦血細胞虹彩病毒(SHIV)近三年無檢出陽性。
2.3? 處置方式
經過復檢后確認是陽性,要將檢測結果及時向主管領導反映,同時反饋給苗種企業,監督指導企業將檢出病毒陽性的同批次的苗種進行銷毀和無害化處理,禁止銷售,并對相關的生產車間和運輸車輛進行全面徹底的消毒,防止病毒外溢和交叉感染。
3? 常見病害發病原因分析及綜合防控措施
3.1? 發病原因分析
通過多年的病害監測結果分析,南美白對蝦影響比較大的最主要的病害有白斑綜合癥、紅體病、急性肝胰腺壞死病、弧菌病、肝腸胞蟲病等[4]。總結發病的原因有:
3.1.1? 苗種退化、質量不高
由于欽南區內的蝦苗場都是從外地購進的蝦苗幼體,苗種退化、質量參差不齊,有個別蝦苗場在引進幼體前,沒有經過正規的檢測機構的檢測,存在蝦苗攜帶病毒的隱患。
3.1.2? 養殖管理不善造成的
部分養殖戶片面追求產量而加大放養密度、存在盲目濫用藥、在養殖過程中沒能及時有效處理養殖過程中出現的各種問題。
3.1.3? 飼料質量良莠不齊[5]
受玉米、大豆、魚粉等飼料原料價格的持續上漲,導致水產飼料價格連年上漲。加上水產養殖規模的擴大,飼料的需求量大,涌現出很多的飼料廠,飼料的質量良莠不齊。養殖戶為了貪圖便宜選擇一些低檔、便宜的飼料,導致對蝦營養跟不上,長不大,易致病。
3.1.4? 外界環境的影響
目前欽南區的池塘養殖主要以土池養殖為主,近兩年掀起了陸基圓池養殖、棚式養殖、工廠化養殖模式。土池養殖受外界影響較大,特別是在臺風、暴雨或天氣變化較大的情況下,對蝦易出現應激,抵抗力下降,導致病害發生。
3.2? 南美白對蝦病害的綜合防控措施
對蝦病害防控措施堅持“預防為主、綜合防治”的原則,根據多年的工作經驗,提出一些綜合的防控措施,以供參考:
3.2.1? 加強苗種質量管理,推動苗種產地檢疫
推廣引進SPF優質苗種,引導養殖戶選擇正規苗場生產的,并經過檢測合格的苗種。加快推進水產苗種產地檢疫和苗種疫病監測,健全漁業官方獸醫隊伍,全面推廣水產苗種產地檢疫出證工作,規范苗種流通,實行檢疫合格證制度,加強苗種檢疫執法監督。鼓勵苗種企業與各大科研機構和大學合作,通過先進的分子育種等技術,培育出抗病高產的優質品種。從源頭上保證苗種質量,保障水產養殖健康持續發展。
3.2.2? 強化養殖科學管理,構建健康生態系統
指導養殖戶從養殖源頭開始抓起,做好消毒及防控措施,引進優質苗種,投喂優質的配合飼料,合理調整放養密度,科學配套魚蝦混養技術,定期水質檢測,合理增氧,做好養殖生產、投入用品及產品銷售記錄,推廣微生物制劑的使用,構建生態養殖系統。
3.2.3? 開展疫病監測,推進疫病風險評估
欽南區水產技術推廣站利用實驗室的優勢,在轄區內合理設置病害監測點,科學準確地進行病害測報,做好疫病風險預警和防控。加強病害防疫隊伍的建設,提高病害檢疫技術水平,更好地為廣大養殖戶服務。
3.2.4? 推廣高效健康養殖模式,促進水產養殖用藥減量
近幾年,欽南區加大資金和科技力量的投入,逐步推進池塘標準化改造、向陸基圓池養殖、棚式對蝦養殖、工廠化設施養殖方向發展。推廣養殖尾水處理技術,加大安全用藥、科學用藥、減量用藥的宣傳力度,推廣使用微生物制劑,促進水產養殖業的可持續、綠色、健康發展。
4? 結語
通過建立疫病監測點,科學準確地開展檢測,完善水生動物疫病防控體系,加強水生動物疫病監測預警和風險評估,提高重大疫病防控和應急處置能力。文章借助實踐案例,在全面掌握南美白對蝦苗種疫病類型,設置專項疫病監測模型,完善常規監測流程,健全結果分析與病害防控措施,穩步提高南美白對蝦養殖向健康、生態養殖的方向發展。
參考文獻
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[2]李恒彬.淺談南美白對蝦養殖中常見病害及防治[J].農民致富之友,2017(22):239
[3]姜路辛,施禮科,陳喆等.一例南美白對蝦放苗后大量死亡原因的調查及分析[J].科學養魚,2022(5):57-58.
[4]翁歆之,羅華明,賀潔.臺州市南美白對蝦集約化養殖主要病害和控制對策[J].科學養魚,2021(10):52-53
[5]王華生.淺談南美白對蝦養殖存在的問題及其應對措施[J].農民致富之友,2019(10):172.