呂生華, 曹興中, 劉 相, 劉雷鵬, 危得全, 魏艷敏

(陜西科技大學 輕工科學與工程學院, 陜西 西安 710021)

0 引言

智能材料是能夠對一種或多種環境刺激(如pH值、溫度、光、濕度、電、磁場、力或生物刺激等)做出可逆響應并具有各種應用價值的材料,如傳感器、執行器、電子皮膚、人工肌肉、智能藥物載體等[1,2].在以前的研究工作中,研究人員主要選擇金屬合金、無機化合物和聚合物等作為智能材料的基底[3-5],這類材料用于制備電子皮膚、人工肌肉和智能藥物載體等智能材料時存在著通過結構調控實現智能性功能困難、對于環境刺激響應速度慢及生物相容性差等缺點,從而限制了其應用[6].研究中人們發現蛋白質具有復雜的拓撲結構及可編程自組裝性,適合構建具有復雜結構和多種功能的智能材料[7-9].

蛋白質是一切生命體賴以生存的重要物質,蛋白質的一個重要特征就是能夠感知及響應各種環境和生物刺激如光、pH值、溫度、金屬離子和特定分子等[7,10-12].蛋白質的種類很多,其中纖維狀蛋白質在構筑智能材料方面具有重要的意義,纖維狀蛋白質包括絲素蛋白、角蛋白、膠原蛋白、彈性蛋白等[13],主要來源于絲綢、羊毛、皮革等蛋白質材料.目前利用天然纖維狀蛋白質或其衍生物作為“智能材料”是研究熱點領域[14],因此對其研究現狀進行綜述及分析對于其未來的研究及發展具有積極意義.

1 常見纖維狀蛋白質結構和性能

纖維狀蛋白質的分子類似細棒狀或者纖維狀,具有高度重復的氨基酸序列,因此形成相對均勻的二級結構賦予蛋白質獨特的機械和結構特性,能在動物體內和體表起支撐和保護作用,所以又稱為結構蛋白.圖1是天然纖維蛋白質來源和一級結構中氨基酸的不同重復單元.人們根據X射線衍射圖或者肽鏈構象的不同,把纖維狀蛋白質分為α-螺旋型(α-角蛋白)、β-折疊片層型(絲素蛋白)和三股螺旋(膠原蛋白)等.

利用蛋白質的重組性可以通過“自下而上”與傳統的“自上而下”生物制備技術與方法[15],設計制備出能夠對人工及環境刺激反應具有敏感響應性的智能材料[16],將其應用于具有智能要求的醫學、傳感、三維(3D)打印油墨及柔性可穿戴電子材料等中.

圖1 纖維蛋白的天然來源和一級結構中氨基酸重復結構[13]

1.1 絲素蛋白

絲素蛋白(SF)是一種天然存在的蛋白質,來源于蠶絲、蜘蛛絲等,作為一種天然生物聚合物,由于其易加工性、優異的生物相容性和生物降解性,在生物醫學和可穿戴設備領域得到廣泛研究[17].如蜘蛛絲具有重量輕、強度高及彈性好的特點.SF多以蠶絲作為原料,通過在堿性溶液(碳酸氫鈉、溴化鋰)處理提取得到.蠶絲主要由絲素和絲膠兩類蛋白質組成.絲素長絲被組織成納米纖維束占蠶絲纖維重量的70%～75%,剩下的絲膠(分子量20～310 kDa)是一種可以將絲素纖維粘合在一起的水溶性膠狀蛋白[18].蠶絲中的絲素蛋白通常是由1∶1的輕鏈(≈26 kDa)和重鏈(≈390 kDa)組成的二聚體,并通過一個二硫鍵相連,其初級序列由高度重復的六肽序列組成,如甘氨酸-X重復序列,X是丙氨酸、絲氨酸、蘇氨酸和纈氨酸(如圖2(a)所示)[19].因此固態SF的蛋白質構象可呈現兩種形態,即結晶/紡絲前的腺體狀態(絲素I)和具有二級結構的紡絲狀態(絲素II).一般絲素I結構是水溶性的,在熱、有機溶劑(醇類)或物理(超聲、pH值)等處理下,可以很容易地轉化為不溶于水的絲素II結構.

由于SF鏈上含有極性羥基的絲氨酸和含有功能酚羥基的酪氨酸以及大量甘氨酸和丙氨酸使得SF鏈本質上是疏水的,因此它們在水中容易組裝成β-折疊,并由系列氫鍵穩定,相互作用決定了蛋白質的結晶度,可以賦予SF物理凝膠的能力,而敏感性作為構建智能響應性材料的基礎.另外,SF溶液對機械力極為敏感,剪切和張拉力都可以展開和排列SF鏈,促進β-折疊的形成,攪拌或流動都能誘導SF構象從無序結構轉變為有序的β-折疊結構.隨著濃度的增加,SF分子優先通過廣泛的氫鍵形成穩定和不可逆的β-折疊結構,同時SF具有溫度誘導相變導致構象轉變的傾向.這些刺激因素引起構象變化可以進一步用于催化或信號傳遞、刺激響應,或與其它材料相互作用,是設計新型智能材料的理想成分[20].

圖2 絲素蛋白、角蛋白、膠原蛋白的結構特點[19]

1.2 角蛋白

角蛋白是毛發、爪子、指甲、蹄、角、鱗、喙和羽毛的主要成分,是一種有效的天然生物材料,具有良好的生物相容性和細胞相互作用位點,廣泛來源于低成本和具有生物降解性的工業廢料.角蛋白纖維一般由兩個主要的形態部分皮質層(纖維的內部)和角質層外層構成,進一步可以分為兩類:I型(酸性)角蛋白和II型(堿性)角蛋白.如圖2(b)所示,皮層由紡錘形的纖維組成,由一層膜隔開,膜由非角質蛋白和脂質組成.角質層占總重量的10%,起到保護內層和保持水分的作用.α-角蛋白自組裝成長絲狀纖維,可以在不斷裂的情況下得到相當大的伸展,使毛發具有較高的機械強度、惰性和剛性[21].

角蛋白的-SH和-S-S-可以通過化學修飾賦予其pH值響應性、熱敏性、溶脹性,這些刺激響應性不是由靜電斥力/吸引驅動的,而是起源于多肽構象的變化,利用這一特性可以作為傳感器和制動器等智能材料應用于生物醫學領域[22,23].角蛋白的纖維在被拉伸或暴露在特定刺激下時,結構解卷、鍵重新排列,形成穩定的β-折疊,纖維保持在該位置直到外界觸發以恢復其原始形狀,依此作為構建塊用來設計智能材料.利用從α-螺旋到β-折疊的可逆角蛋白自組裝轉變過程作為各向異性結構和響應性的機理,可以用來設計具有高強度智能形狀記憶材料[24].

1.3 膠原蛋白

膠原蛋白是人體內含量最豐富的蛋白質,具有良好的生物相容性、極低的抗原性、柔韌性和良好的生物降解性[25].如圖2(c)所示,膠原蛋白具有復雜的層次結構:一級結構為氨基酸三聯體,以富含脯氨酸(Pro)的氨基酸序列Gly-X-Y為特征,每個氨基酸三聯體上有一個甘氨酰(Gly)殘基以及通常分別位于X和Y位的Pro和4-羥基脯氨酸(Hyp);二級結構是由氨基酸三聯體重復折疊形成的α鏈;三級結構為原膠原分子,是一個左手的三螺旋結構,通常由三個鏈組成,分別稱為α1(I)、α1(II)和α2(I),每個鏈都含有約1 000個氨基酸;鏈間共價鍵將原膠原分子連接起來,形成穩定的膠原纖維[26].從物理角度看膠原分子可以自組裝成纖維,包括主要存在于端肽中的賴氨酸、羥賴氨酸和醛殘基,形成三股螺旋結構,纖維交聯證細胞外基質的機械強度和完整性,而纖維直徑的分布以及交聯度對組織的抗拉強度和彈性有很大的影響[27].因此通過調整不同的物理參數,包括膠原濃度、pH值、溫度、離子含量、各向異性、等電點,都可以改變膠原的凝膠動力學、硬度和納米纖維結構[28].

膠原基質微觀結構的各向異性和排列在很大程度上會影響其機械性能,I型膠原單體自組裝成纖維狀結構,可能會交聯或纏繞,形成具有不同網絡結構和機械性能的粘彈性凝膠.除了在食品、醫學領域的應用外,富含I型膠原的動物組織也是皮革、化妝品和明膠等產品的重要來源[29],明膠是膠原在酸、堿、酶或高溫作用下的變性產物,與膠原一樣由18種氨基酸組成,但已失去了生物活性.通過化學修飾膠原胺基和羧基結構[30],具有成本低、免疫原性低、通用性強、生物相容性好、與天然細胞外基質相似等優點,因此在生物醫藥領域可以用于生產智能藥物緩釋載體、智能柔性傳感器、智能可穿戴電子設備等.

1.4 彈性蛋白

彈性蛋白是細胞外基質中的一種蛋白質成分,廣泛存在于進行伸展和回縮的器官中,如大動脈血管、彈性韌帶、軟骨和皮膚等[31].皮膚中存在豐富的彈性蛋白纖維,賦予皮膚彈性和延展性.鎖鏈素和異鎖鏈素是天然彈性蛋白的兩個主要交聯,每一個都涉及四個賴氨酸殘基,這些賴氨酸殘基通過賴氨酰氧化酶交聯[32].因此彈性纖維的穩定結構是通過肽鏈之間的氧化賴氨酰殘基間形成的共價交聯,增加彈性蛋白纖維的硬度,而交聯結構一旦形成,在生物環境下不再逆轉[33].

由于存在交聯結構導致彈性蛋白的溶解性很差,很難加工成新的生物材料.第一種方法是用熱堿、胍或草酸(產生α-彈性蛋白)和氫氧化鉀的增溶處理可以用來水解從動物組織中收獲的彈性纖維成分,溶解的彈性蛋白保留了彈性蛋白單體的許多物理化學性質,包括自組裝的能力,但是缺少完整結構[34].第二種方法是通過優化大腸桿菌中重組原彈性蛋白的遺傳密碼子,可以更容易地通過細菌培養獲得合成出高純度的重組原彈性蛋白.通過合成或重組的方法獲得類彈性蛋白多肽(ELPs),其優點除了保留了親本蛋白原有的自組裝特性和熱響應性,表現出更好的水溶性.溫度敏感性ELPs是一類由多肽序列組成的重組生物聚合物,這一序列的獨特之處在于它在臨界溶液溫度以下溶解,超過臨界溫度后會自組裝形成凝膠[35].因此ELPs具有良好的響應性和可逆相變能力,是一種很有吸引力的新型生物材料,從水凝膠和支架到纖維和人工組織,在醫學和工程領域有著許多“智能聚合物”的應用.

2 纖維狀蛋白質基智能材料的制備及應用

基于纖維狀蛋白質組裝體表現出對環境刺激響應的智能行為,近些年通過自下而上的技術構筑多維多樣化的“智能”蛋白質功能組裝體成為了研究的熱點[36,37].基于纖維狀蛋白質作為基礎材料開發的對溫度、濕度、pH值、光、電等具有靈敏刺激響應性的智能材料如“智能”水凝膠[38]、生物傳感器、智能柔性可穿戴設備、智能藥物釋放載體、智能3D打印油墨等已經獲得了應用[39].

2.1 智能水凝膠

水凝膠的結構是以三維聚合物網絡為基礎,這種網絡可以在水中吸水膨脹并保持大量水分,同時保持其結構不被破壞[40].多種天然材料都可以形成無細胞毒性的聚合物水凝膠.這些天然聚合物可分為蛋白質(膠原蛋白、明膠、纖維蛋白、彈性蛋白、角蛋白、絲素蛋白、肌球蛋白等)、多糖(纖維素、直鏈淀粉、海藻酸鹽、殼聚糖等)等[41-43].尤其是蛋白質基水凝膠可以模擬人體組織細胞外基質的特征,具有多功能性、生物相容性、適應性和對刺激的響應性,以及可調的強度和彈性模量[44].

纖維狀蛋白質基水凝膠主要通過物理/非共價交聯、化學/共價交聯凝膠法以及酶交聯方法制備[45].角蛋白在過氧化氫氧化下得到水凝膠,過程中角蛋白的-SH和-S-S-基團氧化成-SO3,保持了水凝膠的三維結構和蛋白質的一級序列[46,47].利用角蛋白水凝膠對介質pH值和特定離子的存在表現出可逆的刺激響應行為,表明其可以用作智能傳感材料[48],如其對Ca2+、Cu2+表現出膨脹和收縮的可逆刺激響應行為.Chen等[49]基于二硫鍵重組,開發了一種葡萄糖觸發的原位角蛋白水凝膠.氧化性是由葡萄糖氧化酶(GOD)催化體液中葡萄糖所體現的,水凝膠前體溶液由角蛋白、半胱氨酸和GOD組成,可通過GOD催化體液中葡萄糖的氧化而溫和地生成H2O2(如圖3所示),與傳統的O2氧化法和直接加H2O2法相比,GOD催化氧化法的優點是間接和逐步地提供較高的H2O2氧化力,不僅縮短了凝膠的成膠時間,提高了水凝膠的機械強度,而且避免了角蛋白中巰基的過氧化.同時,智能水凝膠可適應任何不規則形狀的傷口且不需要添加交聯劑或對角蛋白進行化學修飾,從而使水凝膠具有良好的生物相容性.這種葡萄糖觸發的原位形成角蛋白水凝膠“智能材料”為創傷愈合治療和組織工程中的其他潛在應用提供了一種有效的策略[50-52].

圖3 葡萄糖誘導的原位形成角蛋白水凝膠機理及合成步驟圖[50]

2.2 智能生物傳感器材料

傳感器作為當下一個重要的發展領域,蛋白質基生物傳感器在臨床檢測或家庭護理點監測中體現出巨大的應用潛力,一般來說,生物傳感器的設置主要有三個部分,即目標識別、信號轉導和響應輸出[53-55].具有不同活性官能團、大比表面積和特定識別系統的蛋白質,它們通常可以滿足生物傳感器的兩個基本要求,即選擇性和靈敏度.

基于可再生、生物友好的天然蛋白質材料設計能夠與生物組織具有相容性、可持續、高性能生物傳感器的發展至關重要[56].利用SF的多功能性,Liu等[57]設計了一種具有協同優異、機械/熱雙重敏感性、生物安全性、耐久性、耐極端溫度和抗菌性能的SF智能水凝膠傳感器.SF在高濃度LiBr溶液中預先溶解,通過SF與環氧交聯劑的開環反應,化學交聯合成了含有導電聚合物聚(3,4-亞乙二氧基噻吩)-聚(苯乙烯磺酸)(PEDOT∶PSS)的水凝膠(SF-LiBr),賦予其導電性和熱響應性,然后依次浸泡在水和單寧酸(TA)甘油/水二元溶劑,TA能與水凝膠網絡中的極性基團形成強的化學結合鍵,促進了TA在水凝膠中的自由擴散,從而獲得具有極強韌性、極端耐溫性、耐濕性和抗菌等性能的絲素蛋白/單寧酸/甘油/水(ST-GW)水凝膠傳感器,可用于監測大型或細微的人體運動,而且在-40 ℃到60 ℃范圍內表現出顯著的壓敏性和電子耐用性,傳感器能夠響應從20 ℃到60 ℃的外部溫度變化,具有更好的溫度靈敏度和高分辨率(<1 ℃)的溫度分辨率(如圖4所示),其多功能性有望應用于電子皮膚、人工智能和人機界面領等領域.

不同的功能材料可以摻雜或修飾到蛋白質表面作為信號產生或放大的探針,從而提高傳感器的靈敏度[58,59].以含鉻廢革中的膠原(CA)為基材,Wang等[60]以聚苯胺(PANI)酸化多壁碳納米管(H-MWNTs)作為導電材料(P-M)摻雜在不同的CA層中,設計了多功能膠原骨料的多層三維網絡結構柔性傳感器.其基底層具有提供交叉電極和濕度傳感的功能,壓電層內的多層三維網絡提供了極高的壓電傳感能力(如圖5所示).具有靈敏度高、檢測范圍大(28～100 KPa)、響應時間短(110 ms)等多功能優點,可同時檢測壓縮、彎曲和扭轉應變,同時由于CA具備獨特的柔軟性,使得所制備的傳感器呈現出傳統傳感器所不具備的舒適度、可降解性和耐久性等多個優點,在實時健康監測、生物醫學、智能機器人等領域具有廣闊的應用前景[61,62].

圖5 膠原的結構及應用

2.3 智能3D打印油墨

3D打印是一種變革性的制造策略,允許快速成型、定制和靈活處理結構-性能關系[63].3D打印的關鍵部件是打印油墨,其特性和功能在很大程度上取決于油墨的理化、流變和材料等特性,而生物油墨由于其優異的生物相容性、可設計性等具有廣泛研究價值[64,65].常見纖維蛋白的復合功能化材料可以最大限度地減少免疫反應,促進與宿主的整合,并隨著時間的推移完全降解,產生多肽和氨基酸作為細胞的營養物質,如膠原蛋白、絲素、纖維蛋白原、角蛋白等利用其具有熱敏性、光敏性等對環境刺激做出響應的性能,作為“智能”生物油墨已經被使用到許多3D打印結構中[66].

從液體到固體的溶膠-凝膠轉變,通常與蛋白質分子的交聯有關,各種交聯機制已被用于制備蛋白質基可打印油墨,并用于增強可印刷性,其機理包括通過弱鍵進行分子自組裝和通過共價鍵進行化學交聯,通常使用多種交聯機制來增強印刷性和強度[67-70].前者的特點是形成弱的鏈間和鏈內相互作用,可以通過除水、加熱、超聲、pH值和鹽來實現,在沒有化學試劑或副產品的情況下自組裝.例如:溫度敏感性類彈性蛋白(ELPs)其獨特之處在于在臨界溶液溫度以下溶解而在超過臨界溫度后會自組裝形成凝膠,這種熱響應性可以用于自組裝3D打印生物油墨[71].利用ELRs與氧化石墨烯(GO)共組裝的無序到有序轉變,設計具有自組裝生物油墨[72],ELRs-GO生物油墨可以制作單個管狀結構,具有層次化的組織結構,分辨率可達約10 μm,壁厚約為2 μm,這些結構可以在組裝后立即灌注,并表現出類似生理結構的物理特性(如圖6所示).生物油墨可以通過調節GO的濃度來實現印刷保真度、結構孔隙度和滲透率的控制,具有生物相容性,有助于人臍靜脈內皮細胞(HUVEC)的生物打印、生長和正常功能.3D打印過程逐漸形成了不同結構和滲透性的管壁,說明了通過超分子制造的ELRs-GO智能生物油墨能夠實現這種仿生結構[73,74].

丙烯酸酯基團的自由基光聚合由于反應效率高而被廣泛應用于基于蛋白質的油墨的3D打印,天然蛋白質中不存在丙烯酸酯基團,因此需要化學改性,如明膠進行化學處理可以引入(甲基)丙烯酰基,在光照射下甲基丙烯酰基以鏈增長的方式相互聚合,同時添加交聯劑可以更好的控制蛋白質的光聚合分子網絡[75-77].Donghyeok等[78]提出了一種不需要模具,采用數字光處理(DLP)3D打印技術,在低濃度的水溶液中直接構建3D結構,得到DLP打印SF的“蛋白質微針”.另外,硫醇-烯光聚合反應,該反應機理偶聯C=C雙鍵/烯和巰基-硫醇基團兩個互補基團,屬于點擊化學,具有快速、高效的特點.利用這些優點可以減少光引發劑濃度和光照時間,有利于細胞相容性、形成均勻的聚合物網絡及更好的保真度,因此,硫醇-烯反應對于某些側鏈富含半胱氨酸和硫醇的纖維狀蛋白質是有利的[79].

圖6 ELRs-GO 3D打印生物墨水組裝原理和結構示意圖[72]

2.4 智能柔性可穿戴材料

柔性材料具有可變形、可伸縮、重量輕等優點,是作為個人“智能防護設備”(PPE)的理想材料,也是可穿戴系統中的主要功能部件[80].利用一些纖維狀蛋白質對壓力、溫度或濕度的響應性及優異的生物相容性作為“智能”柔性可穿戴材料(如電子皮膚、致動器),可自發地將環境刺激(pH值、溫度、光、濕度和壓力等)轉換成實時和可視化的電子脈沖實現對于刺激作用的預警及檢測,提高防護能力及減少意外傷害[81,82].設計智能可穿戴材料時,其延展性、超薄性、輕量化以及快速響應性是健康監測平臺的基本要求,方便從可穿戴的帶子、護墊、腕帶或皮膚獲取生理信息[83].

SF具有良好的生物相容性和降解速率,是一種理想的柔性材料,Gong等[84]開發了一種高透明度、生物相容性、完全可降解和柔性納米發電機(TENG)可以作為智能自供電柔性可穿戴設備.通過摻雜甘油和聚氨酯(PU)對SF進行功能化處理,顯著增強絲蛋白膜的機械柔韌性(應變ε=520%),然后在絲膜上構建中空銀納米纖維,形成一層透氣、可拉伸、生物相容性和可降解的摩擦電極,以驅動可穿戴電子設備,如作為人造電子皮膚進行觸摸/壓力感知及無線網絡開關制動器.

柔性智能響應蛋白質基功能材料作為可穿戴設備中的組件已被廣泛研究,Yue等[85]基于蜘蛛網和螞蟻觸角構建了一種具有多層納米結構的仿生多功能電子皮膚,它可以通過摩擦納米發電機收集生物能量,同時可智能檢測濕度、溫度和壓力變化.由于聚乙烯醇/聚偏氟乙烯納米纖維的蜘蛛網結構、及內部珠鏈結構和膠原納米纖維聚集體的正摩擦材料(如圖7所示),其具有高的壓力靈敏度(0.48 V·kPa-1)和高檢測范圍(0～135 kPa),模仿螞蟻觸角的納米纖維為電子皮膚提供了較短的響應和恢復時間(分別為16 s和25 s),以適應較寬的濕度范圍(25%～85% RH),天然膠原納米纖維聚集體確保了電子皮膚的生物降解性、生物兼容性和透氣性,在人機界面和人工智能中顯示出巨大的實用性前景[86].

可穿戴傳感技術的迅速發展為人工智能提供了前所未有的機遇,建立了物理世界和虛擬世界之間的交互界面.基于多功能可穿戴傳感SF摩擦納米發電機,可提供體系需要的能量,同時可精確地檢測環境濕度和人體運動的成分,能夠區分空氣中水分子的存在狀態,可以監測人體呼吸狀態[87].

圖7 電子皮膚設備的結構、組成、生物相容性和透氣性[85]

2.5 智能藥物釋放載體

納米技術已被應用于制藥領域,用于輸送具有治療各種疾病的活性藥物成分,納米粒子(NPs)作為藥物釋放載體的核心目標是將所需劑量的藥物輸送到所需的作用部位(例如:腫瘤)用于應對疾病的診斷和治療[88].而蛋白質納米粒子不會造成細胞毒性,并且可以通過表面功能化來改變它們的停留時間和靶標特異性,同時降低免疫反應的幅度,提高被細胞充分吸收的程度.目前,將具有pH值響應、溫度響應、光響應等性能蛋白質作為智能藥物釋放載體用于藥物輸送系統已有廣泛研究[89-91].例如:由于pH值在不同器官和癌細胞會有變化,pH值觸發智能觸發藥物載體釋放的重要性越來越大,利用這一特殊特征設計具有pH值依賴性的聚合物載體,使藥物分子更精確地釋放到目標位置[92].膠原/明膠納米粒子、SF納米粒子、彈性蛋白納米粒子、角蛋白納米粒子、酪蛋白納米粒及蛋白質修飾納米粒子廣泛用于研究藥物載體,具有可生物降解的、可代謝的、非抗原性的特征[93,94].

膠原/明膠納米顆粒含有氨基酸的胺基和羥基 使得易于官能化,在不同pH值下膠原/明膠納米顆粒對pH值具有響應性,如在中性和堿性pH值下明膠納米顆粒具有更大的溶脹能力,從而在藥物輸送中包裹有無機藥物的明膠納米顆粒具有不同pH值下的釋放曲線,可用于某些疾病的治療[95-97].例如:在表面包覆了白細胞介素-17(IL-17)適配子的氧化鈰納米顆粒被負載到明膠水凝膠中,可用于治療炎癥相關的腦損傷[71].溫敏性ELPs的自組裝特性和熱響應性已被有效地用于輸送治療劑,表現出更好的水溶性.例如:ELP-連接藥物和ELP-納米粒結合物都已被開發用于治療部分的溫度響應性和緩釋,可用于延長藥物釋放時間.ELPs在特定的轉變溫度以上可形成水凝膠狀聚集體,并控制藥物釋放的時間[98].角蛋白不易被酸消化,同時具有低免疫原性、pH值響應性和生物相容性,從而可以作為藥物載體受到廣泛研究.Liu等[99]在其一項研究中,通過將阿霉(DOX)pH值敏感性的腙鍵連接到角蛋白納米顆粒上,然后通過去溶劑化方法制備成顆粒狀智能藥物載體(如圖8所示).角蛋白中的羧酸基團使角蛋白-藥物結合物表面帶負電荷,降低了免疫識別和免疫應答,在酸性腫瘤微環境中,由于質子化,負電荷丟失,因此,納米粒子的電荷反轉為表面正電荷,這促進了細胞內化,導致藥物更快的釋放,以使得A549肺癌細胞活力的更快降低,是一種理想的智能藥物釋放載體[100,101].

蛋白質的兩親性使它們能夠高效地負載疏水和親水分子,蛋白質納米粒子的官能化能力可以用不同的功能部分來化學修飾粒子的表面[102-104],從而賦予了額外的特性,如靶標特異性、隱形特性、可視化能力、刺激響應性、膠體穩定性以及長循環時間,同樣可以方便進行表面調節和藥物與配體的共價連接[105-107].從蛋白質的組裝體的設計和生物材料的觀點來看,基于蛋白質的納米顆粒為表面修飾和共價藥物結合作為智能藥物載體具有優異的研究前景.

圖8 角蛋白腙鍵偶聯 DOX 納米粒子制備示意圖[100]

3 結論及展望

基于蛋白質功能材料表現出對外界刺激(pH值、溫度、濕度、光等)的“智能”行為,從而使它們在各個領域的應用變得越來越普遍,目前成為了研究的熱點.本文論述了纖維狀蛋白質在智能材料中的研究現狀,介紹了絲素蛋白、角蛋白、膠原和彈性蛋白等常見纖維狀蛋白質的結構和智能響應的性能,分析了具有pH值響應、溫敏性、光敏性、構象變化響應及濕敏性的纖維狀蛋白質作為智能材料結構基礎及設計原理,總結了其在智能水凝膠、智能生物傳感器、智能3D打印油墨及智能柔性可穿戴材料方面的研究進展.與一些合成聚合物相比,纖維狀蛋白質基功能材料結構中具有特異性、生物相容性、可降解性以及構象折疊/展開可相互轉變的特點,使其在構筑具有多功能性、強適應性、靈敏刺激響應性及強度和彈性模量的可調控性智能材料方面具有不可替代的優勢.

智能蛋白質功能材料的發展和應用依賴于蛋白質自身的結構、性能及其獲取方式,決定于蛋白質功能材料的制備方法及其應用領域的對于蛋白質功能材料的性能要求.雖然基于特定需求開發出了許多具有智能行為的蛋白質功能材料,擴寬了在智能水凝膠、電子皮膚、3D打印油墨、機器人等先進領域的應用范圍,啟發了如何實現從基本概念到多功能蛋白質材料的智能制造,但是這些材料大多還處于研究階段,存在尚未投入大規模產業應用中的巨大挑戰,因此可以考慮從生物學、蛋白質組學、材料學等不同角度入手展開研究,充分借鑒納米生物技術,通過自下而上的方法或通過結合物理方法來構筑多維多樣化的“智能”蛋白質功能組裝體.例如:基于蛋白纖維智能柔性可穿戴材料,用于提醒佩戴者即將出現的身體健康緊急情況或作為智能機器人的電子皮膚感知外界刺激.將具有適當智能響應性的蛋白質材料與合適的制備方法相結合才能夠制備獲得具有智能行為的蛋白質功能材料,另外由于蛋白質基材料具備綠色、可持續、可生物降解和生物兼容等特點,也為其在人工智能、生物醫學、能源環境、生物傳感等領域的發展開拓了新思路.