復(fù)方潤(rùn)燥止癢乳膏的制備及皮膚刺激性評(píng)價(jià)

龍雄初，劉小虎，張玉平，龍枚飛，張立民

1中國(guó)人民解放軍陸軍第八十一集團(tuán)軍醫(yī)院 急診科，河北張家口 075000；2張家口市中醫(yī)院 藥劑科 河北張家口 075000；3河北北方學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院 病理生理教研室，河北張家口075000

老年皮膚瘙癢癥（senile pruritus，SP）是影響老年人身心健康和生活質(zhì)量的疾病之一[1-3]。目前臨床上治療SP 常采用口服抗組胺藥、口服中草藥或中成藥、外用激素類藥物等[4]，但其療效不理想，易復(fù)發(fā)，副作用也比較明顯，如抗組胺藥物致頭暈、嗜睡，激素致皮膚脆性增加、快速耐受、皮膚粗糙、萎縮等，因而臨床使用受到限制。筆者采用中西醫(yī)結(jié)合的治療理念，精選具有祛風(fēng)止癢、潤(rùn)燥保濕的中、西藥物研制了非激素類復(fù)方外用乳膏——復(fù)方潤(rùn)燥止癢乳膏，用于治療SP，并獲得國(guó)家發(fā)明專利授權(quán)（專利號(hào)：ZL201811101029.3），現(xiàn)將該乳膏的制備和制劑的皮膚刺激性評(píng)價(jià)報(bào)道如下。

1 材料

1.1 藥物

維生素E（浙江新和成股份有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字：H19983188，批號(hào)：20200430），鹽酸利多卡因（山西新寶制藥有限公司生產(chǎn)，國(guó)藥準(zhǔn)字：H14020331，批號(hào)：20200518），馬來(lái)酸氯苯那敏（河南九勢(shì)制藥股份有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字：H41023287，批號(hào)：20201213），冰片（陜西西安天正藥用輔料有限公 司，批 號(hào)：20210526），荷荷巴油（批 號(hào)：20200819）、葡萄籽油（批號(hào)：20210203）、甜杏仁油（批號(hào)：20201026）購(gòu)自江西吉安吉水縣紅星天然藥用香料油廠，人參提取液（廣州美懿生物科技有限公司，批號(hào)：20201116），甘草提取物（批號(hào)：20210126）、苦參提取物（批號(hào)：20210108）、馬齒莧提取物（批號(hào)：20201216）購(gòu)自陜西森弗天然制品有限公司，甘油（浙江遂昌惠康藥業(yè)有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字H33020622，批號(hào)：20201126），硬脂酸（湖南爾康制藥有限公司，湘食藥輔準(zhǔn)字：F2006005，批號(hào)：20200623），三乙醇胺（批號(hào)：20210113）、聚山梨酯－80（批號(hào)：20210421）、95%酒精（批號(hào)：20210601）購(gòu)自陜西西安天正藥用輔料有限公司，純化水（自制）。

1.2 儀器

EK3641 型電子天平（廣東香山衡器集團(tuán)股份有限公司），TD-4W 型臺(tái)式低速離心機(jī)（廈門國(guó)儀科學(xué)儀器有限公司）等。

1.3 動(dòng)物

健康新西蘭大耳兔3 只，個(gè)體重量約3.5 kg，河北北方學(xué)院動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供（合格證號(hào)：醫(yī)動(dòng)字第18-068 號(hào)）。

2 方法

2.1 因素水平的確定與處方設(shè)計(jì)

參照文獻(xiàn)[5]，本品選擇水包油（O/W）型乳劑型基質(zhì)，處方中主藥含量固定（以制備一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)劑量1000 g 為例，以95%酒精15 mL≈15 g 計(jì)算），維生素E 20 g、鹽酸利多卡因20 g、馬來(lái)酸氯苯那敏5 g、冰片20 g、荷荷巴油60 g、葡萄籽油60 g、甜杏仁油60 g、人參提取液100 g、甘草提取物10 g、苦參提取物10 g、馬齒莧提取物10 g、甘油50 g；以硬脂酸為油相基質(zhì)；以三乙醇胺、聚山梨酯－80 為乳化劑。以基質(zhì)和乳化溫度為因素進(jìn)行三水平的正交實(shí)驗(yàn)，各因素具體試驗(yàn)的水平見表1。根據(jù)正交試驗(yàn)的結(jié)果，選取3 種乳膏劑的處方組成，見表2。

表1 因素水平表

表2 3 種乳膏劑的處方組成（g·g-1）

2.2 制備方法

參照文獻(xiàn)[6]，3 個(gè)處方均采用乳化法制備，先將冰片20 g 用15 mL 95%的酒精濕潤(rùn)、研磨、溶解備用；將硬脂酸、甜杏仁油、葡萄籽油、荷荷巴油、維生素E 混勻組成油相，攪拌均勻加熱至95℃，分別放冷至74℃、78℃、82℃保持；將鹽酸利多卡因、人參提取液、甘草提取物、苦參提取物、馬齒莧提取物、馬來(lái)酸氯苯那敏、聚山梨酯-80、三乙醇胺、甘油混勻組成水相，攪拌均勻加熱至90℃，保持10 min，分別放冷至74℃、78℃、82℃，將水相組分倒入油相內(nèi)，以750 r·min-1快速攪拌5～7 min，再以200 r·min-1攪拌15 min，停5 min，再繼續(xù)攪拌30 min 至初乳形成，然后降低攪拌速度（80 r·min-1），開啟冷凝降溫至40℃時(shí)加入冰片溶液，充分?jǐn)噭颍嘌b，即得。

2.3 評(píng)價(jià)指標(biāo)和評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)

采用L9（34）標(biāo)準(zhǔn)正交表進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，以外觀和離心時(shí)間綜合評(píng)價(jià)乳膏的質(zhì)量，外觀最好為5 分，最差為1 分。再以制得的乳膏外觀性狀、穩(wěn)定性和保濕性作為評(píng)價(jià)指標(biāo)，依據(jù)各評(píng)價(jià)指標(biāo)對(duì)乳膏質(zhì)量的影響大小來(lái)確定評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)，綜合評(píng)分滿分為100 分，其中外觀性狀占30%，保濕性占30%，穩(wěn)定性占40%。

2.3.1 外觀性狀 取成品，觀察3 種乳膏劑光澤度、細(xì)膩度，取適量乳膏涂抹于手背，感受3 種乳膏劑的黏稠度、涂布性和膚感。以膏質(zhì)均勻細(xì)膩、有光澤、黏稠適中、易涂布和膚感好為5 個(gè)評(píng)價(jià)指標(biāo)，每個(gè)指標(biāo)6 分，按照由低、中、高給予相應(yīng)的分值，最低為1分，最高為6 分，總分為30 分。

2.3.2 穩(wěn)定性 取適量成品在室溫（25℃左右）、烘箱（40℃，6 h）、冰 箱（4℃，24 h）及離心（2000 r·min-1，30 min）后儲(chǔ)存1 周，以有無(wú)油乳分層、變粗糙、變硬、變稀為指標(biāo)計(jì)分，每個(gè)指標(biāo)10 分，共40分。具體評(píng)分：有油乳分層為0 分，無(wú)油乳分層為10分；有變粗糙為0 分，無(wú)變粗糙為10 分；有變稀為0分，無(wú)變稀為10 分；有變硬為0 分，無(wú)變硬為10 分。

2.3.3 保濕性 取2g 成品乳膏，均勻涂在載玻片上，每種乳膏各3 份，稱重后，放入37℃恒溫箱內(nèi)8 h，取出稱重，計(jì)算各種乳膏失水率的平均值。評(píng)分計(jì)算公式為：

2.3.4 皮膚刺激性實(shí)驗(yàn) 將健康家兔背部剃毛，取3 種成品乳膏劑分別涂抹于家兔背部，早晚各1 次，連續(xù)涂抹7 天，觀察涂抹部位是否出現(xiàn)皮膚發(fā)紅、紅斑、水腫、水皰等不良反應(yīng)。

3 結(jié)果

3.1 正交試驗(yàn)與外觀評(píng)價(jià)結(jié)果

取成品5 g 放入試管內(nèi)，以2600 r·min-1離心，觀察分層時(shí)間，見表3。

表3 正交試驗(yàn)結(jié)果

由正交試驗(yàn)結(jié)果得知，外觀評(píng)價(jià)時(shí)最佳因素組合為A2B3C2D2 或A2B3C3D2，C2、C3 的均值相同，離心時(shí)間最佳組合為A2B3C2D1，可選定C 因素2水平為最好。外觀方差分析結(jié)果顯示，D因素（乳化溫度）對(duì)外觀影響有顯著作用，而離心時(shí)間起次要作用，但影響不顯著，故選用乳化溫度2（78℃）水平作為最佳溫度，所以最佳因素水平組合應(yīng)為A2B2C2D2。

3.2 驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)

為了驗(yàn)證上述結(jié)論的準(zhǔn)確性，重復(fù)最佳工藝A2B2C2D2 進(jìn)行平行試驗(yàn)，其離心分層時(shí)間最接近正交表中5 號(hào)試驗(yàn)的結(jié)果，外觀評(píng)價(jià)接近6 號(hào)試驗(yàn)，所以制備工藝定為A2B2C2D2。

3.3 外觀性狀

不同劑量基質(zhì)處方評(píng)價(jià)結(jié)果見表4。

表4 3 種不同劑量基質(zhì)處方評(píng)價(jià)結(jié)果

3.4 穩(wěn)定性

3 種不同劑量基質(zhì)處方所得的乳膏，在不同實(shí)驗(yàn)條件下的穩(wěn)定性評(píng)價(jià)結(jié)果具體見表5。

表5 3 種不同劑量基質(zhì)處方的乳膏劑穩(wěn)定性評(píng)價(jià)結(jié)果

3.5 保濕性

測(cè)得處方1、處方2、處方3 的失水率分別為41.5%、30.1%、21.1%，經(jīng)公式計(jì)算得分分別為17.55、20.97、23.67 分，保濕性處方3 ＞處方2 ＞處方1。

3.6 皮膚刺激性

采用3 種乳膏劑在3 只健康家兔背部皮膚連續(xù)涂抹7 天，均未見皮膚發(fā)紅、紅斑、水腫、水皰、潰爛等不良反應(yīng)。

3.7 評(píng)分結(jié)果

處方1、2、3 各評(píng)價(jià)指標(biāo)的總得分分別為：38.55、85.97、59.67 分，綜合得分表明處方2 為最優(yōu)處方。

4 討論

瘙癢是一種與抓撓有關(guān)的不愉快的感覺(jué)[7]，是老年皮膚瘙癢癥患者最主要的臨床癥狀。其發(fā)病機(jī)制目前尚未完全闡明[8]，亦無(wú)特效的治療藥物，常反復(fù)發(fā)作，經(jīng)久不愈。外用乳膏可以避免藥物對(duì)胃腸道的刺激，減少藥物進(jìn)入體循環(huán)的量而大大降低不良反應(yīng)，同時(shí)又可提高作用部位的藥物濃度[9]，是臨床治療皮膚瘙癢疾病較常用的制劑。復(fù)方潤(rùn)燥止癢乳膏是中西藥并用的O/W 型復(fù)方制劑，具有止癢快、副作用小、無(wú)激素、禁忌少、使用方便并能有效地減少瘙癢反復(fù)發(fā)作等優(yōu)點(diǎn)，同時(shí)可保持皮膚水分[10]，可為SP 的治療提供了新的選擇，但復(fù)方潤(rùn)燥止癢乳膏未見報(bào)道和上市。因此，探討復(fù)方潤(rùn)燥止癢的乳膏的制備及其對(duì)皮膚的刺激性進(jìn)行評(píng)價(jià)，具有重要的臨床意義。

臨床研究表明[9]O/W 型乳膏基質(zhì)中藥物的釋放和透皮吸收較快，基質(zhì)易涂布于皮膚，無(wú)油膩感，易于清洗，不污染衣物。基于上述特點(diǎn)，本研究采用O/W 型乳膏劑的制備方法。但既往研究顯示[9]，當(dāng)乳膏基質(zhì)處方及制備工藝選擇得當(dāng)，制備的乳膏細(xì)膩有光澤且穩(wěn)定性好，反之則粗糙且易分層或析出油滴。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，處方2 為外觀性狀、穩(wěn)定性和保濕性均良好的最佳處方。此外，經(jīng)過(guò)反復(fù)試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，在制作過(guò)程中，油相需加熱至95℃，水相需加熱至90℃，并保持10 min，在78℃時(shí)再將水相成分倒入油相內(nèi)。溫度過(guò)高或過(guò)低都會(huì)出現(xiàn)乳化不均勻，導(dǎo)致油水分離。攪拌時(shí)速度不能過(guò)快（750 r·min-1為宜），攪拌時(shí)間不能太長(zhǎng)，時(shí)間過(guò)長(zhǎng)易產(chǎn)生氣泡，所得膏劑外觀粗糙。冰片作為處方中的主要藥物，同時(shí)也是一種滲透促進(jìn)劑[11]，其不溶于水，但溶于酒精。20 g 冰片用95%酒精15 mL 濕潤(rùn)、研磨、溶解為最佳劑量，過(guò)多易出現(xiàn)油水分離，過(guò)少不能完全溶解。冰片溶劑加入膏劑時(shí)需降低攪拌速度（80 r·min-1），在40℃左右時(shí)加入較為理想，溫度過(guò)高會(huì)降低冰片的藥效，過(guò)低則膏劑較硬，難以攪拌均勻，易出現(xiàn)油水分離。

乳膏劑的外觀性狀對(duì)患者的購(gòu)買意向有著較大的影響，穩(wěn)定性決定了乳膏劑的質(zhì)量，而保濕性好使皮膚柔軟舒適、無(wú)油膩感[9]。由實(shí)驗(yàn)結(jié)果及分析可知，在穩(wěn)定性方面的考察，處方2 經(jīng)高溫、冷藏、離心處理后，未見油乳分離；在保濕性方面的考察，處方3 優(yōu)于處方2 優(yōu)于處方1。綜合考察外觀性狀、穩(wěn)定性、保濕性各評(píng)價(jià)指標(biāo)的總得分，表明處方2為最優(yōu)處方。在皮膚刺激性方面，均未發(fā)現(xiàn)有皮膚發(fā)紅、紅斑、水腫、水皰、潰爛等不良反應(yīng)。

綜上所述，采用乳化法制得的O/W 型復(fù)方潤(rùn)燥止癢乳膏，外觀呈暗灰色，光澤度好，膏質(zhì)均勻細(xì)膩，黏稠度適中，涂布性好，膚感清爽不油膩，穩(wěn)定性和保濕性均良好，應(yīng)用于完整皮膚未見不良反應(yīng)，符合臨床應(yīng)用要求，可為臨床治療SP 提供新的有效制劑。

致謝

在實(shí)驗(yàn)藥物的配制和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的實(shí)施過(guò)程中，得到了河北北方學(xué)院附屬第一醫(yī)院藥劑科李禎、張家口市橋西區(qū)明德北社區(qū)衛(wèi)生服務(wù)中心趙社海、張家口市中醫(yī)院老年病科王敏妨、河北省總工會(huì)溫塘工人療養(yǎng)院老年病科周曉青、中國(guó)人民解放軍陸軍第八十一集團(tuán)軍醫(yī)院急診科孫曉娟、張家口市經(jīng)濟(jì)開發(fā)區(qū)老鴉莊鎮(zhèn)衛(wèi)生院內(nèi)科賈志霞等老師的指導(dǎo)和幫助，在此一并致謝！