自制糖化血紅蛋白質(zhì)控品及其臨床應(yīng)用

王加平,王娜,傅美麗,李恒星,胡明

(東海縣人民醫(yī)院檢驗科,江蘇連云港222300)

糖化血紅蛋白A1c(glycated hemoglobin A1c,HbA1c)反映糖尿病患者2～3個月平均血糖水平,在糖尿病診斷、療效判斷等方面具有重要意義。我國糖尿病學(xué)會已將HbA1c列入糖尿病診斷指標(biāo)。為了減輕患者就醫(yī)費用,國家衛(wèi)生健康委積極推進(jìn)檢驗結(jié)果互認(rèn),互認(rèn)的基礎(chǔ)首先要保證檢驗結(jié)果的可靠性和一致性,質(zhì)量控制是實現(xiàn)這一目標(biāo)的重要手段。開展質(zhì)量控制的前提是要有良好的質(zhì)控品,目前市場上主要有伯樂、朗道、昆淶公司的HbA1c商品化質(zhì)控品,因其價格昂貴,也有實驗室用糖尿病患者血液自行制備質(zhì)控品[1-3]。本研究嘗試用健康體檢者靜脈血液標(biāo)本制備異常濃度的HbA1c質(zhì)控品用于室內(nèi)質(zhì)控,獲得了滿意的結(jié)果。

1 材料與方法

1.1主要儀器與試劑 D-10糖化血紅蛋白儀及配套試劑(美國伯樂公司);邁瑞5390血細(xì)胞分析儀及配套試劑(深圳邁瑞公司);0.1 mol/L pH 6.8磷酸鹽緩沖液;牛血清清蛋白(新西蘭Prollat公司);葡萄糖(成都科隆化學(xué)品公司);海藻糖(羅恩試劑公司);Proclin 300防腐劑(美國Sigma公司)。

1.2標(biāo)本來源 收集2021年3月東海縣人民醫(yī)院健康體檢中心體檢健康者EDTA-K2抗凝靜脈血標(biāo)本,所有標(biāo)本HBV、HCV、HIV陰性。

1.3方法

1.3.1高值HbA1c生成 將EDTA-K2抗凝血標(biāo)本800×g離心15 min,棄上層血漿,用生理鹽水洗滌紅細(xì)胞3次,將各管紅細(xì)胞混合。加入與紅細(xì)胞體積等量的1∶10稀釋0.1 mol/L pH 6.8磷酸鹽緩沖液,充分混勻。加入終濃度為555.6 mmol/L葡萄糖,37 ℃溫育48 h,HbA1c達(dá)到預(yù)期目標(biāo)濃度(13.0%～16.0%)后將血紅蛋白液放入透析袋中,置于0.05 mol/L pH 6.80磷酸鹽緩沖液中,4 ℃透析24 h,中間換緩沖液1次。……