1株LpsB突變致多黏菌素B耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌的全基因測(cè)序分析*

楊瑋,張思琴,陳福紅,李素娟

(杭州市中醫(yī)院檢驗(yàn)科,杭州 310007)

鮑曼不動(dòng)桿菌是院內(nèi)感染重要的病原菌之一且其耐藥率近年來(lái)居高不下,尤其是耐碳青霉烯藥物的鮑曼不動(dòng)桿菌(carbapenem-resistantAcinetobacterbaumannii, CRAB)成為臨床處理感染的棘手問(wèn)題。2021年中國(guó)CHINET監(jiān)測(cè)網(wǎng)(http://www.chinets.com/)統(tǒng)計(jì)顯示CRAB占比高達(dá)66.5%,然而15 166株全國(guó)CRAB對(duì)多黏菌素B的耐藥率僅為0.5%。因此,目前在臨床抗感染聯(lián)合治療中,多黏菌素B常作為抗CRAB的最后防線。然而,多黏菌素單獨(dú)使用會(huì)導(dǎo)致異質(zhì)性耐藥的問(wèn)題,臨床多主張聯(lián)合用藥。實(shí)際上鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)多黏菌素異質(zhì)性耐藥率遠(yuǎn)高于其檢出耐藥率[1]。本研究利用自一名腦出血術(shù)后并發(fā)腦膿腫患者分離到的1株國(guó)內(nèi)較為少見(jiàn)的多黏菌素B高水平耐藥的鮑曼不動(dòng)桿菌(polymyxin resistantAcinetobacterbaumannii, PmRAB),進(jìn)行深入的基因?qū)W研究,以便為今后的耐藥機(jī)理及流行病學(xué)的研究積累一定實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。

1 材料與方法

1.1研究對(duì)象 目標(biāo)菌株來(lái)自杭州市中醫(yī)院重癥醫(yī)學(xué)科腦出血術(shù)后并發(fā)腦膿腫的患者,該患者腦脊液多次同時(shí)分離出菌落大小不一異質(zhì)性耐藥的CRAB。在分離前臨床曾有多黏菌素B 5萬(wàn)單位QD鞘內(nèi)注射抗感染治療史。住院期間先后使用美羅培南、多黏菌素B、頭孢哌酮/舒巴坦、替加環(huán)素多種抗菌藥物治療,但后因腦部感染持續(xù)加重,放棄治療出院。本研究挑選多黏菌素B高水平耐藥小菌落突變株作為研究對(duì)象。

1.2主要儀器和試劑 Vitek質(zhì)譜儀、Vitek 2 Compact全自動(dòng)微生物儀(法國(guó)生物梅里埃公司)、PCR擴(kuò)增儀(Bio-Rad公司)、全自動(dòng)毛細(xì)管電泳儀(美國(guó)AATI公司)、超聲波破碎……