全身麻醉對舍飼大熊貓血液流變學的影響

姜瑞婕 ，張心怡 ，夏茂華，趙素芬，王運盛，普天春，張成林，范開

（1.中國農業大學動物醫學院，北京，100193；2.北京動物園，北京，100044）

大熊貓（Ailuropoda melanoleuca）是陸地哺乳動物中最瀕危的物種之一，在世界范圍內具有重要的學術研究價值［1?2］。由于圈養動物管理和獸醫技術的進步，許多注射麻醉劑組合已被用于固定大熊貓，其中美托咪定-替來他明-唑拉西泮（medetomidinetiletamine-zolazepam，MTZ）較常用，已有使用MTZ 對野外大熊貓麻醉的相關報道［3］，但關于大熊貓血液方面各基礎數據的研究有限，特別是有關大熊貓在麻醉與非麻醉狀態下血液流變值的測定，以及麻醉前后血液流變值的比較分析更是鮮有報道。因此，全面系統地測定和分析大熊貓在非麻醉與麻醉狀態下的血液基礎數值，有重要的理論參考價值和科研價值。許多國內外獸醫工作者開始把血液流變學應用在獸醫臨床上，特別是在外科手術與麻醉的研究中［4?9］。有研究表明，麻醉使動物血液流變學發生一定程度的變化，吸入麻醉劑或使用非揮發性麻醉劑的全身麻醉會導致動物微循環發生顯著變化［8］，血液流變學很大程度上影響外科手術和術后階段，血液流變學紊亂可能直接誘發并發癥［10?12］。

本試驗全面系統地檢測了舍飼大熊貓4 項血常規指標、10 項血液生化指標和22 項血液流變值，對所測數值進行了統計學分析，明確大熊貓在非麻醉與麻醉狀態下各項指標間的差異，試驗結果將為研究珍稀物種大熊貓提供必要的、較全面的參考數據，為舍飼大熊貓的合理飼養和醫療提供參考。

1 材料與方法

1.1 基本情況

表1 大熊貓基本信息Tab.1 Basic information of giant pandas

1.2 麻醉藥品及劑量

將舒泰50 注射液，即替來他明-唑拉西泮（tiletamine-zolazepam，TZ；2 mg/kg，5 mg/mL；法國維克有限公司）和鹽酸右美托嘧啶注射液，即右美托咪定（dexmedetomidine，dexM；8 μg/kg，0.5 mg/mL；碩騰生物制藥有限公司）注射至大熊貓髖部外側部位。

1.3 血液采樣

麻醉前對大熊貓進行非麻醉體檢，4只大熊貓經正向訓練均可在不麻醉固定的情況下配合采集血液。采集大熊貓前肢頭靜脈的血液樣本，血量為 5 mL，置于EDTA 抗凝管中保存，在30 min 內完成全血細胞計數、血清生化和血液流變學指標檢測。

1 周后，對4 只大熊貓注射麻醉藥物，在進入外科麻醉期后立即采血。采集大熊貓前肢頭靜脈的血液樣本，血量為5 mL，置于EDTA 抗凝管中保存，在30 min內完成血液相關檢測。

1.4 血樣處理

血液常規檢測包括4 項內容，即紅細胞、白細胞、血紅蛋白和紅細胞壓積。血細胞計數采用人工鏡檢的方式，由檢驗科人員在血細胞計數板上完成計數。血紅蛋白數據由血紅蛋白儀測定，在5 mL 稀釋好的文齊氏液中加入20 μL 全血，搖勻后放置 5 min 后測定。紅細胞壓積使用溫氏法測定，離心機轉速為12 000 r/min，時間為5 min，使用比數板讀數。

血液生化指標檢測包括10 項內容，即總蛋白、白蛋白、球蛋白、總膽紅素、血糖、肌酐、尿素氮、丙氨酸氨基轉移酶、堿性磷酸酶和淀粉酶。用日本FUJIFILM全自動生化分析儀和對應檢測試劑板測定。

血液流變學指標檢測包括22 項內容，即全血低、中、高切黏度，還原低、中、高切黏度，相對低、中、高切黏度，血漿黏度，紅細胞聚集、變形、剛性指數，血沉，血沉方程K值，紅細胞電泳時間，卡松黏度，卡松屈服應力，纖維蛋白原以及流阻低、中、高切。以上指標使用HT-100A 型血流變黏度測試儀（淄博恒拓分析儀器有限公司）檢測，全血黏度切變率為3、30、200 s-1，血漿黏度在抗凝血離心分離后測定。

1.5 統計分析

應用SPSS 軟件進行統計分析，計算大熊貓血液指標和血液流變值指標的平均值和標準差，經ANOVA檢驗差異有統計學意義（α=0.05），使用配對t檢驗分析顯著差異。

1.6 道德規范

根據官方指南和規則進行本試驗，并獲得了北京動物園的知情同意以收集相關數據。

2 結果

2.1 麻醉監測

通過對大熊貓可視黏膜顏色、毛細血管再充盈時間、呼吸頻率、心率和體溫的監測，發現注射麻醉劑5 min 后大熊貓行為活動明顯減緩，呼吸頻率升高，心率降低。在5～10 min 大熊貓平穩進入外科麻醉期，可視黏膜顏色逐漸恢復粉紅色，肢體肌肉張力和眼瞼反射消失，舌頭可自由拉出，呼吸頻率降低，心率維持在77～81次/min。麻醉固定持續時間為1 h 左右，期間大熊貓無嘔吐或失禁等不良反應，過程較為平穩。對麻醉過程中大熊貓的基礎指標進行檢測，結果如表2所示。

表2 大熊貓麻醉過程中的基礎體征Tab.2 Basic signs of giant panda during anesthesia

2.2 血細胞和生化指標

使用右美托咪定-替來他明-唑拉西泮（dexmedetomidine-tiletamine-zolazepam，dexMTZ）對大熊貓麻醉后，4 項血常規指標均上升，但無顯著差異；10 項血液生化指標中，TP、GLB、Cr、BUN、ALT、ALP 和AMY 較麻醉前有所上升，ALB、TBIL 和GLU有所下降，但無論升降，變化均無顯著性差異，且在正常范圍內（表3）。dexMTZ麻醉方案不會對大熊貓的血細胞和生化指標造成顯著影響。

表3 麻醉前后血常規和生化指標差異Tab.3 Changes in blood routine and biochemical index before and after anesthesia

2.3 血液黏度和紅細胞流變學

麻醉后的大熊貓全血黏度低、中、高切，血沉方程K值，紅細胞電泳時間，卡松黏度，卡松屈服應力，纖維蛋白原，流阻低、中、高切11 項指標與麻醉前相比，呈現顯著上升趨勢（p<0.05，表4）。舍飼大熊貓麻醉后的血液黏度較麻醉前顯著升高。

表4 麻醉前后血液流變學指標變化Tab.4 Changes in hemorheology indexes before and after anesthesia

3 分析與討論

試驗期間選擇的麻醉劑量（dexM，8 μg/kg；TZ，2 mg/kg）能使大熊貓的麻醉固定時間持續1 h 左右，無嘔吐或失禁等不良反應，整個麻醉過程較為平穩。舍飼大熊貓麻醉后的血常規和生化指標較麻醉前無顯著差異，說明dexMTZ 麻醉組合不會對大熊貓的肝、腎等器官產生明顯損害，但從血液流變學檢測數據看，大熊貓麻醉后的全血黏度、血流阻力、纖維蛋白原和血沉方程K值、紅細胞電泳時間、卡松黏度和卡松屈服應力較麻醉前顯著升高，即血液黏度較麻醉前有明顯升高，提示大熊貓在麻醉后存在循環障礙的風險。

全身麻醉可誘導內分泌、免疫和代謝反應［15］。除去特別藥物的影響，出現上述結果可能是由于所有麻醉方式幾乎都會影響機體肌肉的松弛程度和間歇正壓呼吸，同時會改變小動脈和小靜脈的直徑以及對應激的反應［14］（即兒茶酚胺刺激或出血），再加上動脈壓和心排血量的下降，導致一般麻醉都會對機體微循環產生影響。因此，結合本試驗數據，推測在紅細胞壓積沒有降低的情況下，麻醉后的血黏度上升可能與微循環血液分配不均及纖溶系統的激活有關。同時，纖維蛋白原升高的黏度和聚集增加，有較高形成血栓的風險，提示麻醉有發生微循環障礙及動靜脈血栓形成的可能［10］。今后，應進一步研究麻醉大熊貓的通氣和氧合作用，并在手術開始前干預改善大熊貓的血液流變學，以提高大熊貓麻醉的安全性。