宮腔粘連患者血清雌激素水平及其臨床意義*

王燕青,張 瑩,陳海燕,韓秋峪

徐州市第一人民醫院檢驗科,江蘇徐州 22000

宮腔粘連是全球范圍內女性生殖系統子宮的常見疾病,多因宮腔介入性操作而發病,常見臨床表現為子宮內膜基底受損導致宮腔部分粘連,甚至閉塞,腹痛、月經量減少、閉經、不孕等[1-2]。目前,宮腔粘連的確切病因仍不清楚,除宮腔介入性操作外,可能與肥胖、性激素刺激、高血壓、遺傳等因素相關,其中包括孕激素受體(PR)和雌激素受體(ER)的雌激素受體蛋白陽性表達或異常高表達,均可能在宮腔粘連的發生、發展中起到重要作用[3-4]。但是,雌激素受體蛋白在宮腔粘連患者中的表達特點及其與預后的相關性尚少見報道。鑒于此,本研究收集了本院宮腔粘連患者的病歷資料,觀察宮腔粘連患者雌激素的表達特點,研究雌激素表達與宮腔粘連臨床治療預后的相關性,從而判斷雌孕激素受體蛋白在宮腔粘連中的生物學行為,為宮腔粘連的臨床治療及預后評估提供參考。

1 資料與方法

1.1一般資料 采用巢式病例對照研究法,選取2018年1月至2019年5月于徐州市第一人民醫院經宮腔鏡檢查確診為宮腔粘連的54例患者納入宮腔粘連組,同時選取54例基線資料相匹配的體檢健康者納入宮腔正常組。納入標準:年齡≥18歲。排除標準:生殖器發育異常、惡性腫瘤及自身免疫性疾病;絕經期。宮腔粘連組年齡22～64歲,平均(36.7±3.3)歲;體重指數21～29 kg/m2,平均(25.8±1.7)kg/m2;月經周期22～32 d,平均(26.6±3.9)d;生育43例,未生育11例。宮腔正常組年齡22～64歲,平均(36.8±3.4)歲;體重指數21～29 kg/m2,平均(25.6±1.8)kg/m2;月經周期21～34 d,平均(26.8±3.8)d;生育44例,未生育10例。兩組基線資料比較,差異無統計學意義(P>0.05),具有可比性。本研究獲得本院倫理委員會批準,兩組受試者均簽署知情同意書。

1.2方法 宮腔粘連組患者手術后接受西藥治療,即口服結合雌激素片(倍美力,惠氏制藥,批號H20130230,規格0.625 mg),每天1粒(0.625 mg),21 d為1個療程,每個療程間隔5日,并服用黃體酮膠囊(益瑪欣,批號H20041902,規格50 mg)口服,每天2粒(100 mg)。藥物應用避開月經,月經來潮前3 d停藥,月經后5 d繼續服藥,共治療3個療程后評估臨床療效。

1.3觀察指標 檢測兩組血清雌激素水平,包括雌激素受體(ER)和孕激素受體(PR)。(1)蘇木素-伊紅染色:子宮內膜石蠟包埋后,切成 4 μm連續切片,使用二甲苯溶液、乙醇脫蠟,蒸餾水沖洗,蘇木素染色,水洗,伊紅乙醇溶液浸染,水洗,脫水,透明,封片觀察。(2)免疫組化法檢測:使用0.01 mol/L 枸櫞酸微波修復15 min,冷卻后,使用3% 過氧化氫溶液封閉10 min,滴入PR或ER工作液,置于 4 ℃環境中,使用磷酸緩沖液(PBS)沖洗,滴入辣根過氧化物酶(HRP)標記羊抗鼠IgG,DNA 顯色,蘇木素復染。以陽性細胞百分比進行統計,陽性細胞<50%的為低表達;陽性細胞 >50% 的為高表達。顯微鏡下觀察ER、PR陽性表達,細胞核內棕黃色顆粒為陽性表達。高倍顯微鏡下(×400)隨機計數5個視野,每個視野讀取200個組織細胞,計算陽性細胞數目。以陽性細胞染色<5%作為ER或PR表達陰性,以陽性細胞染色≥5%作為ER或PR表達陽性[5]。

1.4預后判定標準[6]痊愈:月經量恢復正常,且宮腔鏡檢查無異常粘連情況;有效:月經量有所增加,但仍小于既往正常月經量,宮腔鏡檢查仍存在少量的宮腔粘連狀況;無效:月經量無改變或減少,甚至閉經,宮腔鏡檢查宮腔粘連狀況無改善。

2 結 果

2.1兩組血清ER、PR陽性表達情況比較 免疫組化染色結果顯示,宮腔粘連組的血清ER、PR陽性率高于宮腔正常組,差異均有統計學意義(P<0.05)。見表1及圖1。

表1 兩組血清ER、PR陽性表達情況

注:A為血清ER陽性表達;B為血清PR陽性表達。

2.2兩組血清ER、PR水平比較 宮腔粘連組的血清ER、PR水平低于宮腔正常組,差異均有統計學意義(P<0.05)。見表2。

表2 兩組血清ER、PR的表達水平

2.3宮腔粘連患者預后分析 54例宮腔粘連患者中,臨床治療有效36例(66.67%),無效18例(33.33%)。有效組血清ER水平[(3.37±0.66)U/mL]、ER表達陽性率(0%)低于無效組[(2.77±0.47)U/mL和27.78%(5/18)],差異均有統計學意義(t=12.034,P<0.001 和χ2=9.162,P=0.002)。有效組血清PR水平[(4.53±0.49)U/mL)]、血清PR陽性表達率(0%)低于無效組[(3.27±0.68)U/mL和22.22%(4/18)],差異均有統計學意義(t=11.884,P<0.001和χ2=8.012,P=0.005)。

2.4血清ER、PR表達與宮腔粘連患者預后的相關性 Spearman秩相關分析結果顯示,血清ER、PR表達與宮腔粘連患者預后呈正相關(r=0.032、0.026,均P<0.05)。

3 討 論

絕大多數宮腔粘連的發生均與宮腔介入性操作有關,其發生的主要原因是子宮內膜基底受損[7]。近年隨著人工流產、不良生活習慣等宮腔介入性操作增加,導致了宮腔粘連組發生率升高,影響了患者的生活質量[8]。在宮腔粘連臨床治療方案上,手術中粘連切開和術后再粘連預防是兩個重要環節,第1個環節手術粘連分離手術可在恢復患者宮腔結構上具有重要作用,但第2個環節再粘連預防才是最為關鍵的環節[9-10]。研究數據顯示,宮腔粘連分離手術后的宮腔再粘連發生率可高達30%～40%[11-12]。有研究表明,宮腔粘連分離手術后予以患者大量雌孕激素治療可使術后宮腔再粘連發生率降低,使大量雌孕激素應用成為宮腔粘連分離手術后預防宮腔再粘連發生的常規方式[13]。

大量雌孕激素應用對于部分宮腔粘連分離手術患者而言效果微小甚至是無效,且雌、孕激素應用也存在較多并發癥風險,當子宮內膜基底層中雌激素受體飽和后繼續增加雌激素用量并不能增加子宮內膜的修復功能,相反大劑量雌激素會增加肝臟負荷,引起水鈉潴留和乳房脹痛等不適,如引發乳腺癌、宮頸血栓、肝腎功能損傷等[14]。因此,尋找可對宮腔粘連分離術治療效果進行預測的生物學指標具有重要的臨床意義。在解剖結構上,子宮內膜可分為功能層和基地層,其中子宮內膜功能層受到性激素水平的調節,具有周期性增殖、分泌及脫落等臨床特性,而子宮內膜基底層可在月經周期后再生并轉化為子宮內膜功能層[15]。ER和PR均是重要雌激素,ER和PR高表達可促進子宮內膜上皮、子宮內膜腺體改變。通常在子宮內膜受損狀態下,ER和PR均呈高表達或陽性表達[16-17]。

本研究結果顯示,宮腔粘連組的血清ER、PR的陽性表達率高于宮腔正常組(P<0.05),提示宮腔粘連患者血清ER、PR水平異常,分析原因在于子宮內膜間質細胞、上皮細胞表達,破壞了子宮內膜基底層,減少殘留子宮內膜,而導致ER、PR表達逐漸降低,此外靶細胞中雌孕激素受體水平與靶細胞效應強弱存在密切關聯,當ER、PR表達下降時,子宮內膜雌孕激素作用下修復和增生受到了限制,導致宮腔粘連治療效果受到影響[18]。因此,宮腔粘連分離術后給予雌激素調節,對于改善臨床治療效果具有重要意義。本研究結果還顯示,有效組的血清ER水平和ER陽性表達率、血清PR水平和PR陽性表達率均低于無效組(P<0.05),提示血清雌激素(包括ER、PR)表達異常與臨床預后密切相關。究其原因在于宮腔粘連分離術后給予結合雌激素藥物,可結合子宮內大量游離受體蛋白(ER、PR),從而起到促進子宮內膜生長和修復,改善宮腔粘連處纖維瘢痕,提升宮腔粘連臨床治療效果[19-20]。理論上,長期服用雌激素可能會增加患者發生乳腺癌、子宮內膜增生的風險,本研究認為短期內給予適量的雌激素治療是有效且安全的,但在患者接受治療前應先排除乳腺病變、下肢靜脈血栓、吸煙史等,以減少因雌激素使用導致的各類并發癥發生。

綜上所述,宮腔粘連患者存在明顯的血清雌激素(包括ER、PR)水平異常,且其表達異常與臨床預后密切相關,因此對宮腔粘連血清雌激素水平檢測,并制訂個性化的雌激素治療方案,以提升宮腔粘連患者臨床治療效果。