低離子聚凝胺技術與試管法在新生兒溶血病患兒輸血檢驗中的效果對比及對檢驗滿意度的影響

盧嵐，尹雪嬌，徐璐

新生兒溶血病患兒在最初發病時的臨床主要癥狀為水腫、黃疸以及貧血等，嚴重患兒還會出現繼發性膽紅素腦病，進而對其身體健康構成嚴重不良影響。所以，對新生兒溶血病患兒予以早期診斷與治療對于改善病情具有重要作用［1］。臨床上將輸血作為新生兒溶血病救治的主要手段，在對患兒予以輸血救治之前，需嚴格把控其檢驗工作流程，由此減輕或避免患兒發現溶血現象［2］。交叉配血試驗是現階段臨床上用以判別供血者和受血者之間的血型是否吻合的常用方式，可有效避免發生溶血反應，保障其輸血安全性。同時，目前在臨床上予以交叉配血試驗的方式多樣，不同檢測方法的檢測效果存在一定差異［3］。試管法是臨床上最常用的一種血型鑒定方法，其操作便利，對檢測儀器并無太高要求，可廣泛適用于首次血型鑒定［4］。而低離子聚凝胺技術則為現階段臨床上一種新型的檢驗方法，能有效精準地檢驗出完全及不完全抗體，并激發不規則抗體反應，促使紅細胞和相應的抗體生成反應，有助于臨床予以詳細觀察，進而降低假陽性現象發生，彌補傳統檢驗法的不足。低離子聚凝胺技術陽性檢出率高，檢驗時間短，且靈敏度、準確性以及穩定性高［5］。本研究比較低離子聚凝胺技術與試管法在新生兒溶血病患兒輸血檢驗中的效果及在檢驗滿意度的影響，為臨床研究對象提供有效參考依據。

1 對象與方法

1.1 研究對象

前瞻性選取2018 年4 月至2019 年12 月在江蘇省蘇北人民醫院出生的120 例新生兒溶血病患兒作為本次研究對象，并以隨機數字表法的方式將所有患兒分為對照組以及研究組，每組各60 例。對照組給予試管法檢驗，研究組則予以低離子聚凝胺技術檢驗。其中，研究組年齡1～6 d，體重2.5～3.0 kg；對照組年齡2～5 d；體重2.4～2.9 kg。納入標準：（1）新生兒溶血病患兒出生后便存在黃疸，且逐漸加重，符合臨床上病理性黃疸的診斷標準［6］；（2）患兒具有貧血、血紅蛋白下降以及溶血現象等癥狀出現［7］；（3）患兒以及母體血清中均檢測出不相符的血型系統抗體；（4）所有新生兒溶血病患兒以及家屬均知情本次研究方案，并簽署知情同意書。排除標準：（1）患兒具有先天性心臟疾病；（2）患兒具有家族性精神遺傳病；（3）患兒具有乙肝等感染性疾病；（5）資料不全者。2 組新生兒溶血病患兒的一般資料差異均無統計學意義（P＞0.05），有可比性。見表1。本研究方案已經獲得醫院倫理委員會的同意與認可。

表1 研究組與對照組新生兒溶血病患兒一般資料比較

1.2 方法

對照組給予試管法檢驗，具體步驟為：首先，使用鹽水將受檢紅細胞洗滌2 次，并加以4% 左右的紅細胞懸液。其次，將廣譜抗人球蛋白試劑2 滴和紅細胞懸液1 滴進行直抗試驗，離心后觀察其結果。最后，分別取A、B、O 3 支試管，每一根試管中只添加血清及滴放散液，標記好后再分別予以添加A、B、O 試劑中的紅細胞1 滴，并保持在37 ℃的溫度條件下孵育60 min，使用生理鹽水清洗3 次，再添加抗人球蛋白試劑2 滴，離心后觀察其結果。研究組予以低離子聚凝胺技術檢驗，具體步驟如下：（1）將1 滴患兒的血清添加入主側管內，并添加入1 滴供血者4% 左右的紅細胞懸液。（2）將1 滴供血者的血清添加入次側管中，再添加入1 滴患兒4% 左右的紅細胞懸液。（3）分別于主側管以及次側管中添加入低離子介質0.7 ml，等到混合均勻后置于室溫條件下，時間設定為30 s，之后再添加入2 滴聚凝胺溶液，等到混合均勻后置于室溫條件下，時間設定為15 s。（4）離心處理，倒掉上清液，并在試管底部置留0.1 ml 液體，待到出現凝集現象，便往試管內添加入1 滴解聚液，予以輕微搖晃，并對檢驗結果實施判定，如果60 s 內凝集現象沒有消失，則表示檢驗結果陽性，可予以配血，如果60 s內凝集現象消失，則表示檢驗結果陰性，不能予以配血。

1.3 觀察指標

1.3.1 溶血試驗檢測結果 對2 組患兒予以溶血試驗檢測，主要進行直接抗球蛋白、血清游離抗體以及抗體放散檢驗陽性率3 項檢測結果分析。陽性率=（陽性例數/總例數）×100.00%。

1.3.2 陽性檢出率及檢測時間 對2 組患兒的陽性檢出率予以分析對比，并將檢測所需時間進行統計。陽性檢出率=（陽性例數/總例數）×100.00%。

1.3.3 靈敏度、準確性以及穩定性 對2 組患兒的靈敏度、準確性以及穩定性予以分析對比。其中研究組以1 min 內2 管內凝集消失為陰性，其他情況則判定成陽性；對照組檢查試管上層液是否發生溶血現象，將其向后斜方輕微轉動，檢查管底反應物是否發生凝集，若主、次側管中未發生溶血、凝聚現象判定成陰性，其中1 支顯示凝聚或溶血判定成陽性；靈敏度＝［真陽性/（真陽性+假陰性）］×100.00%，準確性＝［（真陽性+真陰性）/總例數］×100.00%。

1.3.4 檢驗滿意度 對2 組患兒家屬的檢驗滿意度予以分析評估，指標包括非常滿意、較為滿意以及不滿意。

1.4 統計學處理

采用SPSS 26.0 軟件進行數據分析。其中計量資料以±s進行描述，組間對比以獨立樣本t進行檢驗，計數資料則以百分數（%）表示，2 組間對比以χ2進行檢驗，等級資料則以秩和進行檢驗。以P＜0.05 表示差異有統計學意義。

2 結果

2.1 觀察組與對照組溶血試驗檢測結果比較

研究組患兒應用低離子聚凝胺技術檢驗直接抗球蛋白、血清游離抗體以及抗體放散檢驗陽性率均高于對照組（P＜0.05）。見表2。

表2 研究組與對照組新生兒溶血病患兒的溶血試驗檢測結果比較［例（%）］

2.2 觀察組與對照組陽性檢出率及檢測時間比較

研究組患兒應用低離子聚凝胺技術檢驗后陽性檢出率高于對照組（P＜0.05），所需的檢測時間短于對照組（P＜0.05）。見表3。

表3 研究組與對照組新生兒溶血病患兒的陽性檢出率及檢測時間比較

2.3 觀察組與對照組靈敏度、準確性以及穩定性比較

研究組患兒應用低離子聚凝胺技術檢驗后靈敏度、準確性以及穩定性均高于對照組（P＜0.05）。見表4。

表4 研究組與對照組新生兒溶血病患兒的靈敏度、準確性以及穩定性比較（%）

2.4 觀察組與對照組檢驗滿意度比較

研究組患兒檢驗后的患兒家屬總滿意率高于對照組（P＜0.05）。見表5。

表5 研究組與對照組新生兒溶血病患兒家屬的檢驗滿意度比較［（例）%］

3 討論

新生兒溶血病發病的關鍵原因為患兒母體內具有著和胎兒紅細胞不相符的血型抗體，從而造成同種免疫疾病的出現［8］。其具體發病機制為患兒母體的抗體經過胎盤屏障到達患兒血液中，對患兒的紅細胞予以破壞后導致程度不一的貧血、黃疸和高膽紅素血癥等發生，由此造成難產或死產等現象出現，而存活下來的新生兒也會伴隨著嚴重貧血或智力低下等現象，嚴重者甚至會死亡。因此，對新生兒溶血病患兒予以早期診斷與治療就變得十分重要［9-10］。

目前臨床有大量研究證實試管法與低離子聚凝胺技術應用于新生兒溶血病患兒輸血檢驗中均具有一定效果［11-12］。試管法作為簡單基礎的一種血型鑒定方式，其操作便利，檢測儀器也無需過高標準，所以在臨床中常常得到大范圍的應用［13］。低離子聚凝胺技術是目前臨床上新型的交叉配血檢驗方式，但是該檢驗方式的操作要求較高，需在該組試驗試管中添加入低離子介質和聚凝胺試劑予以檢驗，主要原理為聚凝胺離子在得到溶解之后就會生成正電荷，且對血液中的具有負電荷的唾液酸予以中合，進而達到加快凝聚效果的目標［14］。同時，聚凝胺試劑作為一種氧離子多聚物，也是肝素中和劑之一，溶解后便可生成很多的正電荷，可以把紅細胞表面的負電荷予以中和，促使紅細胞電位降低，減輕紅細胞之間的距離，使得紅細胞生成非特異性聚焦［15］。然后添加入重懸液，對聚凝胺予以中和，使得正常水平的紅細胞呈現出非特異性聚集發散，且檢驗結果呈現為陰性；如果紅細胞因為抗體而出現致敏，那么聚凝胺聚作用下聚集無法發散，檢驗結果就會呈現為陽性。同時，如果添加重懸液后紅細胞凝聚現象立即散開，而非特異性聚集大量降低，那么就能使得假陽性率最低，進而保障輸血的安全性［16］。因此，低離子聚凝胺技術對患兒紅細胞的不完全抗體致敏性特別明顯，可有效提升抗體的陽性檢出率，且靈敏度、準確性以及穩定性高，臨床應用范圍廣。

本研究結果顯示研究組患兒應用低離子聚凝胺技術檢驗后直接抗球蛋白、血清游離抗體、抗體放散檢驗陽性率以及陽性檢出率均高于對照組，且研究組患兒應用低離子聚凝胺技術所需的檢測時間也短于對照組應用試管法所需的檢測時間；同時，研究組患兒應用低離子聚凝胺技術檢驗后靈敏度、準確性以及穩定性也均高于對照組，提示新生兒溶血病患兒采用低離子聚凝胺技術進行輸血檢驗，其檢驗效果顯著，可有效提升直接抗球蛋白、血清游離抗體、抗體放散檢驗陽性率以及陽性檢出率，減短檢測時間，且還能顯著提升其檢驗的靈敏度、準確性以及穩定性，保障檢驗結果的可靠性以及患兒進行輸血治療時的安全性。主要原因分析如下：聚凝胺作為季銨鹽多聚物之一，具有高價陽離子，在溶解后就會出現很多的正電荷，可以有效中和紅細胞表面的負電荷，促使紅細胞間出現凝聚現象。隨后添加入重懸液，若紅細胞出現凝集后呈現出迅速散開狀態，非特異性凝集量降低，那么就可以降低假陽性率，還可有助于抗體篩查，加強交叉配血試驗結果的可靠性［17-18］。同時，低離子聚凝胺技術對紅細胞不完全抗體致敏性尤為明顯，且具有靈敏度、準確性以及穩定性高的優勢，可有效提升陽性檢出率。因此應用低離子聚凝胺技術予以交叉配血試驗可有效提升直接抗球蛋白、血清游離抗體、抗體放散檢驗陽性率以及陽性檢出率，并保障靈敏度、準確性以及穩定性高，檢測花費時間短，檢驗效果顯著［19］。研究證明，低離子聚凝胺技術的檢驗速度快，且靈敏度、準確性以及穩定性高，與本研究結果相似。

本研究中研究組患兒應用低離子聚凝胺技術檢驗后的總滿意率顯著高于對照組，提示對新生兒溶血病患兒而言，低離子聚凝胺技術的檢驗效能更高，可提高患兒家屬的檢驗滿意度。由于試管法在檢驗操時需多次洗滌紅細胞，且流程較為繁瑣，尤其是會受到人為因素的影響，影響檢驗結果的判斷，且檢驗時干擾因素也比較多，如檢驗溫度的控制以及酶pH 值的控制，若酶化時間不能很好把握，就極易發生假陽性或假陰性。所以，常規試管法因為操作時間長、重復性高等導致檢驗滿意度不高，而低離子聚凝胺技術法操作簡單，所耗費的檢測時間短，檢驗結果更便于觀察，特別是在交叉配血試驗中，準確性及穩定性高，可在臨床進行大范圍推廣。

綜上所述，相較于試管法，低離子聚凝胺技術不僅能有效提升直接抗球蛋白、血清游離抗體、抗體放散檢驗陽性率和陽性檢出率，縮短檢測時間，且可提高靈敏度、準確性以及穩定性高，提升檢驗滿意度，值得推廣。因為本次研究受到樣本量的限制，研究結果可能出現偏倚，今后應加大樣本量予以進一步驗證。