血漿心臟型脂肪酸結合蛋白對非小細胞肺癌診斷和預后的價值研究

趙碩，王欣

在全球范圍內，肺癌是過去幾十年來最常見的癌癥，也是男性癌癥患者中死亡率最高的癌癥［1-3］。非小細胞肺癌（non-small cell lung cancer，NSCLC）約占肺癌的85%，其中肺腺癌是最常見的組織學類型，約占NSCLC 的6 成左右［4-6］。手術治療仍然是早期肺腺癌患者的首選治療策略［7］。但仍有近10%～44% 的患者在術后5 年內死亡［8-9］。除了傳統的臨床因素外，還必須開發一種新的診斷和預后標志物來進行個性化的生存風險評估，使潛在的高危患者從中受益。心臟型脂肪酸結合蛋白（hearttype fatty acid-binding protein，H-FABP）由位于1 號染色體1p33～p32 區域的FABP3 基因編碼，是一種主要分布在心肌細胞中的脂質結合蛋白［10］。研究顯示，H-FABP 的高表達對NSCLC 的總生存有重要的預后價值［11］，但目前并不清楚NSCLC 是否可以作為NSCLC 的診斷和預后標志物。本研究旨在評估血漿中H-FABP 水平對NSCLC 診斷和預后的價值。

1 對象與方法

1.1 研究對象回顧性分析海軍軍醫大學第一附屬醫院收治的252 例NSCLC 患者（研究組）和270 例非NSCLC 患者（對照組）的臨床資料。研究組納入標準：（1）NSCLC 患者的診斷基于修訂后的AJCC/UICC 第7 版TNM［T（腫瘤原發灶的情況，tumor），N（區域淋巴結受累情況，node），M（遠處轉移，metastasis）］分期模式［12］。（2）提取過血液樣本，且分析過血漿H-FABP 水平。研究組排除標準：（1）小細胞肺癌患者；（2）臨床資料不完整的患者；（3）患有其他惡性腫瘤、自身免疫病的患者；（4）采用藥物治療的患者。對照組納入的受試者中排除NSCLC 患者，且受試者的臨床資料完整。對照組的納入標準：提取過血液樣本，且分析過血漿H-FABP水平。對照組的排除標準：（1）NSCLC 患者；（2）患有其他惡性腫瘤、自身免疫病的患者；（3）采用藥物治療的患者。

1.2 方法收集2 組患者的臨床資料，包括年齡、性別、診斷結果、吸煙史、飲酒史、淋巴結轉移情況、TNM 分期、血漿H-FABP 水平、臨床隨訪結局等信息。血漿H-FABP 檢測采用荷蘭Hycult Bitechmology 公司的酶聯免疫吸附測定法檢測試劑盒進行檢測，操作過程嚴格按照試劑盒的說明書進行。

研究組與對照組患者的臨床資料見表1。統計學分析結果顯示，2 組的年齡、性別比較，差異均無統計學意義（P＞0.05），研究組中有吸煙史和飲酒史的患者人數明顯高于對照組，差異均有統計學意義（P＜0.05）。

表1 研究組與對照組患者的臨床資料比較［例（%）］

1.3 統計學處理采用SPSS 26.0 軟件進行統計學分析。符合正態分布的計量資料采用±s表示，組間統計學分析采用t檢驗，不符合正態分布的計量資料采用M（P25，P75）表示，組間統計學分析采用秩和檢驗。計數資料采用頻數和%表示，組間統計學分析采用χ2檢驗。所有的檢測均是雙尾的，α取0.05。P＜0.05 表示差異有統計學意義。

2 結果

2.1 肺癌患者血漿H-FABP水平的表達 研究組血漿H-FABP 水平顯著高于對照組，差異有統計學意義（P＜0.001）。見表2。采用受試者操作特征（receiver operating characteristic，ROC）曲線分析，結果顯示，血漿H-FABP 水平診斷肺癌的曲線下面積（area under curve，AUC）為0.74（95%CI：0.70～0.78，P＜0.01），靈 敏 度 為48.20%，特 異 度 為99.60%，cut-off 值為2.80 ng/ml。見圖1。由此說明，H-FABP 在NSCLC 患者血漿中的表達水平顯著升高，H-FABP 是NSCLC 診斷的潛在標志物。

表2 研究組和對照組患者血漿中H-FABP 的表達水平比較（ng/ml，± s）

表2 研究組和對照組患者血漿中H-FABP 的表達水平比較（ng/ml，± s）

注：H-FABP 為血漿心臟型脂肪酸結合蛋白，NSCLC 為非小細胞肺癌

H-FABP 5.88 ± 3.97 3.17 ± 2.41 9.51＜0.01組別研究組對照組t 值P 值例數252 270

圖1 H-FABP 水平診斷NSCLC 的ROC 曲線

2.2 不同表達水平H-FABP與NSCLC 患者臨床資料的關系 以血漿中H-FABP 的平均表達水平為界限，高于平均值歸為高表達組，低于平均值歸為低表達組，分析高表達組和低表達組NSCLC 患者的臨床資料。結果顯示，H-FABP 高表達的肺癌患者與低表達的NSCLC 患者的年齡、性別比較，差異無統計學意義（P＞0.05），但有吸煙史、飲酒史、淋巴結轉移以及TNM 分期較高的NSCLC 患者中H-FABP 表達水平較高（P＜0.05）。見表3。

表3 高表達和低表達H-FABP 的NSCLC 患者的臨床資料比較［例（%）］

2.3 NSCLC患者預后不良的單因素分析 采用Logistic 回歸分析NSCLC 患者預后不良因素，結果顯示年齡≥60 歲、有吸煙史、有飲酒史、有淋巴結轉移以及TNM 分期Ⅲ/Ⅳ期、H-FABP 高表達與NSCLC 患者預后不良有關（P＜0.05）。見表4。

表4 NSCLC 患者死亡的單因素Logistic 回歸分析［例（%）］

2.4 NSCLC患者預后不良的多因素分析 多因素Logistic 回歸分析結果顯示，年齡≥60 歲、有吸煙史、有飲酒史、有淋巴結轉移、TNM 分期為Ⅲ/Ⅳ期、HFABP 高表達均是NSCLC 患者預后不良的獨立危險因素（P＜0.05）。見表5。

表5 NSCLC 患者預后不良的多因素Logistic 回歸分析

3 討論

肺癌仍然是全球癌癥死亡的主要原因［13］。在中國，肺癌一直是一個嚴重的公共衛生問題。根據國際癌癥研究機構（International Agency for Research on Cancer，IARC）的數據顯示，在2018 年，37.00% 的新發癌癥病例和39.20% 的癌癥相關死亡發生在中國［14］。中國肺癌患者的生存率較差，但不同診斷階段預后差異較大［15］，Ⅳ期肺癌患者的5 年生存率低于10%，但I 期患者的5 年生存率超過77%［16］。由此可知，早期診斷并采取針對性的防治措施對于減輕疾病的整體負擔具有重要的意義。

準確的肺癌風險預測模型可以有效地幫助臨床上識別高危個體。目前已經鑒定了多種既定的風險因素，如吸煙、職業暴露、肺癌家族史和呼吸系統疾病等［17-18］?；诜肿訕酥疚锏念A測模型也有相關研究報道，然而關于這些標志物在肺癌中預測性能的證據有限［19-20］。此外，目前還沒有基于傳統流行病學危險因素和生物標志物的中國人群肺癌風險預測模型。因此，在本研究中，重點關注一般臨床環境中可用的肺癌風險相關的因素，旨在開發和內部驗證H-FABP 在NSLCC 風險預測和預后評估中的價值。

盡管許多研究已經確定了蛋白質或肽在肺癌中的預后和預測價值，但大多數未能為其臨床適用性提供強有力的證據。研究發現，血漿中游離的HFABP 在肺癌患者中異常升高，目前還沒有證據顯示H-FABP 水平與肺癌的發生相關。近期一項研究發現，肺癌組織中H-FABP 表達水平上調，與接受吉非替尼治療的肺癌患者的療效有相關性［21-22］。血漿H-FABP 水平不僅是肺癌的良好預測模型，而且根據Logistic 回歸分析結果顯示，血漿H-FABP 高表達是肺癌患者預后不良的獨立危險因素，在肺癌的發生和預后評估中有著一定的潛在應用價值。

H-FABP 在細胞內脂質轉運、儲存和代謝中發揮作用。由于H-FABP 在心臟中高表達并在心肌損傷后釋放到血漿中，因此已被用作急性心肌梗塞和中風早期診斷的血漿標志物。然而，許多證據也表明H-FABP 與癌癥生物學有關。與對照相比，在更具致瘤性的小細胞肺癌細胞系中觀察到H-FABP 的更高表達［23］。H-FABP 表達增加與胃癌的腫瘤侵襲性、轉移和不良預后相關［24］。相反，H-FABP 在乳腺癌細胞中具有生長抑制活性［25］，并且由于高甲基化導致基因沉默，乳腺癌不表達H-FABP［26］。Tang等［11］測定了30 名NSCLC 患者的癌性和非癌性新鮮冷凍組織中H-FABP 和FABP4 的mRNA 表達。結果顯示，與非癌癥組織相比，癌癥組織中H-FABP 和FABP4 的mRNA 和蛋白表達都明顯高于非癌癥組織。此外，H-FABP 或FABP4 在NSCLC 中的高表達與腫瘤結節轉移顯著相關。還有研究者證明，胃癌亞群表達H-FABP，其表達與脂肪酸合成酶（fattyacid synthase，FAS）狀態、疾病進展、腫瘤侵襲性和患者生存率低有關［24］。關于血漿H-FABP 在NSCLC 的發生和進展中的具體作用機制還需要進一步研究。另外本研究未分析血漿H-FABP 是否可以用作其他肺癌診斷和預后的標志物，后期可以進一步納入更多樣本分析該指標在其他類型肺癌診斷和預后的預測價值。

綜上所述，血漿H-FABP 是NSCLC 的診斷和預后評估的潛在有價值的標志物，高水平的H-FABP與肺癌患者不良預后相關。