格列齊特緩釋片的制備及體外釋放研究

劉正平 ，楊雪華 ，陳倩倩，毛楷凡 ，薛 松 ，李大偉 ,

（1. 山東省藥學科學院 新型緩控釋制劑與藥物靶向遞送系統山東省工程研究中心，山東 濟南 250101；2. 山東省化學藥物緩釋制劑工程技術研究中心，山東 濟南 250101；3. 國家藥監局藥物制劑技術研究與評價重點實驗室，山東 濟南 250101）

2019年國際糖尿病聯盟（IDF）發布的全球糖尿病地圖（第9版） 顯示，2019年全球約4.63億20～79歲成人患糖尿病（11個人中有1個為糖尿病患者）。糖尿病患者數正以驚人的速度在迅速增長，糖尿病尤其是2型糖尿病目前已成為嚴重影響人類身心健康的主要公共衛生問題。輕度糖尿病患者可通過飲食控制，堅持運動及控制體重等來控制血糖水平，但血糖控制不良患者需結合口服降糖藥或胰島素來維持足夠的血糖水平[1]。我國現階段所使用的口服降糖藥包括雙胍類、磺酰脲類、α-葡萄糖苷酶抑制劑、噻唑烷酮類等[2-3]。

格列齊特（gliclaizide）屬于第二代磺酰脲類長效口服降糖藥物，臨床可用于單用飲食療法不足以控制血糖的非胰島素依賴型糖尿病（2型）患者的一線用藥，也可與其他降血糖藥物一起或與胰島素配伍使用[4]。口服后2～6 h血藥濃度達高峰，t1/2約10～12 h，主要由腎排出。對成年型糖尿病人有降血糖作用，能降低血小板黏附力，降低血漿比黏度，減少ADP誘導的血小板聚集，改善甲皺微循環。普通格列齊特片每日服用160 mg，分2次口服，存在使用頻次高，臨床使用不方便，血藥濃度波動大，生物利用度低等問題。將格列齊特制備成緩釋片，臨床使用具有緩慢釋放，減少患者服藥量和服藥次數，血藥濃度相對穩定，從而提高患者用藥安全性和依從性。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

Agilent 8454 UV-Vis分光光度計（美國安捷倫公司）；G10實驗型濕法混合制粒機（深圳市信宜特科技有限公司）；ZP10A型旋轉壓片機（北京國藥龍力科技有限公司）；YD-20KZ片劑硬度儀（天津市天大天發科技有限公司）；Logan 860DL溶出自動取樣系統[祿根儀器（鎮江）有限公司]；Seven Excellence pH計[梅特勒托利多儀器（上海）有限公司]。

1.2 試藥

格列齊特原料藥（浙江九州藥業有限公司，批號：14W18091501）；格列齊特對照品（中國食品藥品檢定研究院，批號：1969-9701）；羥丙甲纖維素K4M（HPMC K4M，上海卡樂康包衣技術有限公司，批號：PDR480737）；羥丙甲纖維素K100LV（HPMC K100LV，上海卡樂康包衣技術有限公司，批號：PDR484708）；二水磷酸氫鈣（德國瑞登梅爾父子公司，批號：18J/225-P2X）；麥芽糊精（連云港ROQUETE公司，批號：1642C）；二氧化硅（SH-CD1，安徽山河藥用輔料有限公司，批號：181206）；硬脂酸鎂（SH-YM-M，安徽山河藥用輔料有限公司，批號：190126）；格列齊特緩釋片[達美康，施維雅（天津）制藥有限公司，規格：30 mg，批號：2013982]。

2 方法與結果

2.1 格列齊特緩釋片的制備

稱取處方量格列齊特、二水磷酸氫鈣、麥芽糊精、羥丙甲纖維素于濕法混合制粒機中，開啟攪拌和剪切，混勻物料；再向濕法混合制粒機中加入純化水制軟材，過20目篩制粒；將濕顆粒置60 ℃烘箱中干燥，過20目篩整粒，加入處方量的二氧化硅和硬脂酸鎂，混勻，壓片，即得，每片含主藥30 mg。

2.2 格列齊特緩釋片釋放度測定方法

依據《中國藥典》2020年版四部通則0931溶出度與釋放度測定法第二法[5]，以900 ml pH 7.4磷酸鹽緩沖液作為溶出介質，轉速為100 r/min，溫度為（37±0.5）℃。依法操作，于2，4，6，8，10 h和12 h分別取溶液10 ml，經0.45 μm濾膜濾過，并及時補液10 ml，棄去初濾液，取續濾液適量，以溶出介質稀釋至一定濃度，作為供試品溶液。另精密量取格列齊特對照品約13.00 mg，置500 ml量瓶中，加乙腈5 ml振搖使溶解后，加溶出介質稀釋至刻度，搖勻，精密量取5 ml，置10 ml量瓶中，加溶出介質稀釋至刻度，搖勻，作為對照品溶液。取供試品溶液和對照品溶液，照《中國藥典》2020年版四部通則0410紫外-可見分光光度法[5]在228 nm和290 nm波長處分別測定吸收度，求出二者之差，分別計算格列齊特的累積釋放度。

2.3 制備工藝研究

緩釋片釋藥行為的重要影響因素包括緩釋材料的種類、型號、用量，填充劑種類及用量等，其中以緩釋材料的遴選和制備工藝的研究尤其重要。本研究以HPMC作為格列齊特緩釋片的骨架材料，考察不同型號HPMC組合對緩釋片釋放度的影響；在此基礎上，對填充劑和潤濕劑進行了比較研究，最終確定格列齊特緩釋片的處方和制備工藝。

2.3.1 緩釋材料HPMC的影響 本研究選擇不同型號的HPMC作骨架緩釋材料，保持緩釋材料總用量20 %，設計5個方案，分別考察單獨使用HPMC K4M或HPMC K100LV，及HPMC K4M與HPMC K100LV的比例為1:3，1:1，3:1時的釋放度，試驗方案見表1，結果見圖1。

表1 緩釋骨架材料的選擇

圖1 緩釋材料種類及比例對緩釋片釋放度的影響

按《普通口服固體制劑溶出度試驗技術指導原則》[6]中非模型依賴相似因子（f2）方法，對自制樣品和參比制劑的釋放度進行對比研究，結果見表2。

表2 自研產品相似性分析

實驗結果表明，保持處方中緩釋材料總量不變，HPMC黏度對緩釋片釋藥速率有明顯影響。HPMC分子量越大，其黏度越大，藥物釋放越慢；不同黏度的HPMC進行組合，可以調整其釋放度。HPMC K4M和HPMC K100LV比例（1:1），制得的格列齊特緩釋片與參比制劑累積釋放曲線相似。故最終確定二者比例為1:1。

2.3.2 填充劑用量的影響 固定處方其他輔料的用量不變，分別考察加入二水磷酸氫鈣（60 %）、糊精（60 %）、二水磷酸氫鈣（50 %）/糊精（10 %）合用時對樣品釋放度的影響。設計了3個方案，對自制樣品和參比制劑的釋放度進行了對比研究。結果見表3，圖2。

表3 填充劑的選擇

圖2 填充劑種類對緩釋片釋放度的影響

采用相似因子法進行相似性判定，結果見表4。

表4 自研產品相似性分析

實驗結果表明，填充劑種類對藥物釋放度略有影響。根據與參比制劑釋放度相似性比較，確定填充劑選擇二水磷酸氫鈣用量為50 %，糊精用量為10 %。

2.3.3 潤濕劑的選擇 采用濕法制粒工藝，分別選用純化水、50 %乙醇溶液、70 %乙醇溶液進行濕法制粒，對制得的顆粒性狀及片劑的釋放度進行考察。方案見表5，結果見表6，表7。

表5 潤濕劑的選擇

表6 不同潤濕劑對顆粒性狀的影響

圖3 潤濕劑對緩釋片釋放度的影響

采用相似因子法進行相似性判定，結果見表 7。

表7 自研產品相似性分析

根據顆粒性狀及累積釋放度結果，確定采用50 %乙醇溶液作為潤濕劑，效果較好。

2.4 自制樣品與參比制劑體外釋放行為對比

按確定的處方和工藝制備格列齊特緩釋片，按2.2項下方法分別測定其在pH 7.4磷酸鹽緩沖液、pH 6.8磷酸鹽緩沖液、pH 4.5醋酸鹽緩沖液和水中的釋放度，與參比制劑釋放度進行對比，計算其f2分別為78.9，80.1，79.3，82.2。根據《普通口服固體制劑溶出度試驗技術指導原則》，非模型依賴相似因子f2值高于50 時，可認為兩條曲線具有相似性，故自制樣品與參比制劑體外釋放相似。

圖4 自制格列齊特緩釋片在4種溶出介質中釋放度測定結果

2.5 釋藥機制研究

采用模型擬合來判斷自制樣品與參比制劑的釋放機制是否相同，以此判斷兩者釋放行為的相似性，從而為BE試驗提供參考。根據優化后的處方，將自制樣品和參比制劑的釋放度采用零級方程、一級方程、Higuchi 方程進行曲線擬合，根據相關系數（r）判斷其擬合程度，r2越大，擬合效果越好。釋藥曲線擬合結果見表8。

由表8可見，自制樣品與參比制劑的釋藥曲線均符合Higuchi方程，且相關系數的r2最大，說明自制格列齊特緩釋片與參比制劑體外釋放均以Higuchi 擴散為主，兩者釋藥機制相同。

表8 釋藥曲線擬合結果

3 討論

HPMC是緩釋制劑中理想的水凝膠骨架材料，高黏度HPMC可作為親水凝膠骨架緩釋片的阻滯劑，低黏度HPMC可用作緩釋片劑致孔劑，用于緩釋、控釋制劑，可延長有效藥物濃度平臺期，增加藥效持續時間。HPMC遇水時水化形成凝膠層，凝膠擴散、溶蝕后釋放藥物，從而達到緩釋、控釋目的[7]。

以HPMC為緩釋骨架材料，采用濕法制粒壓片的格列齊特緩釋片釋放機制研究結果表明，HPMC種類和用量對格列齊特緩釋片體外釋放速率影響顯著，其體外釋放符合Higuchi方程。

自制格列齊特緩釋片最佳處方和制備工藝為：HPMC K4M和K100LV的比例為1:1， 二水磷酸氫鈣用量為50 %，糊精用量為10 %，潤濕劑為50 %乙醇溶液，濕法制粒。制備的格列齊特緩釋片在pH 7.4磷酸鹽緩沖液、pH 6.8磷酸鹽緩沖液、pH 4.5醋酸鹽緩沖液及水4種釋放介質中的相似因子f2均大于70，與參比制劑體外釋放行為相似。